Stickstoffmonoxid (Stickstoffstoff Oxid，NEIN）Inhaltsmessung Kit Anleitung

Spurmethode 100 Rohr/96 wie

Vor der offiziellen Prüfung notwendig 2-3 Eine Probe mit größeren erwarteten UnterschiedenBedeutung bestimmen:

NEIN（Stickstoffstoff Oxid，NEIN）Weit verbreitet in den Nerven, Kreislauf, Atmung, Verdauung, Urogenital und anderen Systemen im Organismus, insbesondereReicher im Nervengewebe. Es ist eine neue Art von biologischen Botenmolekülen, die eine wichtige Rolle in den physiologischen und pathologischen Prozessen des Körpers spielen.

Bestimmungsprinzip:

NEIN Sehr oxidativ im Körper oder in einer WasserlösungNEINunter sauren Bedingungen,NEIN2Herstellung schwerer Stickstoffverbindungen mit schweren Stickstoffsalzsulfonaten,Weiter mit Naphthylvinyldiamin gekoppelt, das Produkt in 550 nmDer charakteristische Absorptionsspitze, die Messung seines Absorptionswertes, kann berechnet werden NEINInhalt.

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Zusammensetzung:

Reagenz 2: Flüssigkeit 6 ml x 1 Flasche,4℃Lichtschutz aufbewahren.(Vor dem Gebrauch 60℃Heizungsschock 15 Minuten)

Die Parameter des spezifischen Produkts hängen von den Parametern ab, die die Produktbeschreibung erhalten haben

Eigene Geräte und Zubehör:

Waage, Grinder oder Absorber, sichtbares Spektrophotometer/Enzym-Calibrator, Spuren-Quarzschalen/96 Bohrplatten, destilliertes Wasser.

ProbenStelleGrund:

1. Organisation: nach Organisationsqualität (g:: Flüssigkeitsvolumen extrahieren(ml)für 1：5~10Der Anteil (Empfohlen ungefähr 0.1gOrganisation, Beitritt 1 mlExtrahierenFlüssigkeit) ein Eisbad durchführen.10000g，4℃Zentrifugieren 15 MinutenEntfernen und auf dem Eis testen.

2. Bakterien, Pilze: nach Zellzahl (10⁴ Flüssigkeitsvolumen (ml）für 500~1000：1 Der Anteil (Vorschlag 500 Millionen Zellen plusEinen 1 ml Extraktionsflüssigkeit）Eisbad Ultraschall zerstört Zellen（Leistung 300wUltraschall. 3 Sekunden, Intervall 7 Sekunden, Gesamtzeit 3 Minuten）und dann; 10000g， 4℃Zentrifugieren. 15 MinutenEntfernen und auf dem Eis testen.

3. Andere flüssige Proben wie Körperflüssigkeiten und Kulturflüssigkeiten: Direkte Messung.

Messschritte und Arbeitstabellen:

1Spektrophotometer oder Enzym-Calibrator Vorwärmung 30 Minuten Stellen Sie die Wellenlänge auf 550 nm。

2、Arbeitstabellen

NEIN Inhaltsberechnung:

a.Die Berechnungsformel, die mit Spuren-Quarzschalen gemessen wurde, ist wie folgt:

Die Standardkurvenregressionsgleichung lautet:y=0.016x -0.0103，R²=0. 9986 1Organisationsproben:

（1）Berechnung nach Probenqualität

NEIN Inhalt (Mikromol/g schwer)=（ΔA +0.0103）÷0,016×V Gegen General÷（V wie÷V Gesamt× W）×10^-3

= 0.125×（ΔA +0.0103）÷W

（2）Berechnung nach Proteinkonzentration

NEIN Inhalt (Mikromol/mg prot）=（ΔA +0.0103）÷0,016×V Gegen General÷（V wie× Cpr）×10^-3

= 0.125×（ΔA +0.0103）÷Cpr

2Zellen:

NEIN Inhalt (von μmol/10⁴ Zelle）=（ΔA +0.0103）÷0,016×V Gegen General÷（V wie÷V Gesamt×Anzahl der Zellen)×10^-3

=0.125×（ΔA +0.0103）÷Anzahl der Zellen (Millionen)）

3Andere Proben:

NEIN Inhalt (μmol / L）=（ΔA +0.0103）÷0,016×V Gegen General÷V wie

= 125×（ΔA +0.0103）

V Gegensumme: Gesamtvolumen der Reaktion,0,2 ml；V Probe: Probenvolumen in der Reaktion,0,1 ml；V Probensumme: Extraktionsflüssigkeitsvolumen hinzufügen,1 ml；W: ProbenQualität,g；CprProteinkonzentration,mg/ml

b.Verwenden 96 Die Berechnungsformel für die Bohrplattenmessung lautet wie folgt:

Die Standardkurvenregressionsgleichung lautet:y=0.008x -0.0103，R²=0. 9986 1Organisationsproben:

（1）Berechnen nach Probengewicht

NEIN Inhalt (Mikromol/g schwer)=（ΔA +0.0103）÷0,008 × V Gegen General÷（V wie÷V Gesamt× W）×10^-3

= 0.25×（ΔA +0.0103）÷W

（2）Berechnung nach Proteinkonzentration

NEIN Inhalt (Mikromol/mg prot）=（ΔA +0.0103）÷0,008 × V Gegen General÷（V wie× Cpr）×10^-3

= 0.25×（ΔA +0.0103）÷ Cpr

2Zellen:

NEIN Inhalt (von μmol/10⁴ Zelle）=（ΔA +0.0103）÷0,008 × V Gegen General÷（V wie÷V Gesamt×Anzahl der Zellen)×10^-3

=0.25×（ΔA +0.0103）÷Anzahl der Zellen (Millionen)）

3Andere Proben:

NEIN Inhalt (μmol / L）=（ΔA +0.0103）÷0.008×V Gegen General÷V wie=250×（ΔA +0.0103）

V Gegensumme: Gesamtvolumen der Reaktion,0,2 ml；V Probe: Probenvolumen in der Reaktion,0,1 ml；V Probensumme: Extraktionsflüssigkeitsvolumen hinzufügen,1 ml；W: ProbenQualität,g；CprProteinkonzentration,mg/ml

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