Anleitung zum Proteingehalt-Test-Kit

Spurmethode 100T/96S

Hinweis: Auswahl vor der offiziellen Messung 2-3 Eine Probe mit hohen erwarteten Unterschieden wird prognostiziert, um sicherzustellen, dass die Proteinkonzentration in 1 bis 10 mg/ml UmfangInnerhalb.

Bedeutung bestimmen:

Der Gehalt an löslichen Proteinen in Proben wird häufig zur Berechnung der Enzymaktivität verwendet. Darüber hinaus wird der Gehalt an löslichen Proteinen auch für Qualitätsanalysen wie Lebensmittel verwendet.

Bestimmungsprinzip:

In stark alkalischer Lösung, doppelter Harnstoff und CuSO4 Bildung eines violetten Komplexes; Die Farbe des violetten Komplexes ist proportional zur Proteinkonzentration undDas Molekulargewicht des Proteins ist unabhängig von der Aminosäurekomponente und kann daher zur Bestimmung des Proteingehalts verwendet werden. Die Methode bestimmt den Umfang 1 bis 10mg Protein, geeignet für Proben mit hohen Proteinkonzentrationen, insbesondere tierisches Material.

Proteingehalt-Test-Kit - Standby

Zusammensetzung:

Standardprodukt: Flüssigkeit 1ml × 1 Flasche,5 mg/ml bei 4°CSpeichern.

Eigene Geräte und Zubehör：

Zentrifugen, sichtbare Spektrophotometer/ Enzym-Calibrator, Spuren-Quarzschalen / 96 Bohrplatten, Pipetten und Destillationswasser.

Die Parameter des spezifischen Produkts hängen von den Parametern ab, die die Produktbeschreibung erhalten haben

Lösliche Proteinextraktion in der Probe:

1. Flüssigkeitsproben:Klare farblose Flüssigkeitsproben können direkt gemessen werden.

2. Organisationsproben:Organisationsqualität (g): Volumen der extrahierten Flüssigkeit (ml)für 1：5~10 Der Anteil (Empfohlen ungefähr 0.1g Organisation, Beitritt 1 mlExtraktionsflüssigkeit (selbst bereitgestellt, nach Bedarf mit enzymatischem Extraktionspuffer oder destilliertem oder physiologischem Salzwasser ausgewählt)））

Eisbad gut,8000g bei 4°CZentrifugieren 10min， Entfernen, bis zur Prüfung. (Tierproben müssen oft verdünnt werden)）

3 Bakterien, Pilze: nach Zellzahl (104 Personen)Flüssigkeitsvolumen (von ml)für Verhältnis von 500:1Vorschlag Fünf Millionen Zellenbeitreten 1 ml Extrakt), Eisbad Ultraschall Zerbrechen Zellen (Leistung 300wUltraschall. 3 Sekunden, Intervall 7 Sekunden, Gesamtzeit 3 Minuten);dann 8000g，

4℃Zentrifugieren. 10 MinutenEntfernen und auf dem Eis testen.

Messvorgänge:

1. Spektrophotometer/Enzym-Vorwärmung 30 MinDie Wellenlänge einstellen 540 nmDestillationswasser Null.

2. Leere Rohre:取 0,5 ml EP Schlauch, beitreten 40 μl destilliertes Wasser,200 μl Reagenz 1, nach der Mischung bei Raumtemperatur 15 Min， 取 200 μl In SpurenGlasschalen/96 Löcherplatte,540 nm Zum Beispiel, erinnern Sie sichA Leeres Rohr.

3. Standardrohr:取 0,5 ml EP Schlauch, beitreten 40 μl Standardflüssigkeit,200 μl Reagenz 1, nach der Mischung bei Raumtemperatur 15 Min， 取 200 μl Glasvergleichsschale in Spuren96-Loch-Platte, 540 nmZum Beispiel, erinnern Sie sich A Standardrohr.

4. Messrohre:取 0,5 ml EP Schlauch, beitreten 40 μl zur Prüfung,200 μl Reagenz 1, nach der Mischung bei Raumtemperatur 15 Min， 取 200 μl In SpurenGlasschalen/96 Löcherplatte,540 nm Zum Beispiel, erinnern Sie sichA Messrohre.

Hinweis: Leere Rohre und Standardrohre müssen nur einmal gemessen werden.

Formel zur Berechnung der Proteinkonzentration in der Probe:

C Testen (von mg/ml)=C Standardrohre× A Messrohre -A Leeres Rohr÷(A) Standardleitung -A Leeres Rohr)

= 5×(A) Messrohre -A Leeres Rohr÷(A) Standardleitung -A Leeres Rohr)

Hinweise:

1. Die Proteinkonzentration muss 1 bis 10 mg/mlim Bereich, unter 1 mg/mlDiese Methode kann nicht verwendet werden, höher als 10 mg/ml muss entsprechend verdünnt werden. Deshalb messenVorbereitung 1～2Versuche durchgeführt werden, um sicherzustellen, dass die Proteinkonzentration im Bereich von 1 bis 10 mg/ml.

2. Proteinextraktion der Probe mit physiologischem Salzwasser, Doppeldampfwasser oder ohne Protein PBS Extrahieren. Das Gesetz unterliegt Ammoniumsulfat,Tris Puffer Störungen, HebenDiese Stoffe sollten nicht in der Entnahme enthalten werden; Andernfalls ändernBCA-Proteingehalt Testkit.

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