Alkaline Phosphatase (AKP/ALP）Aktivitätstests-Kit-Anleitung

Spurmethode 100T/48S

Vor der offiziellen Prüfung notwendig 2-3 Eine Probe mit größeren erwarteten UnterschiedenBedeutung bestimmen:

AKP/ALP Es ist eine zinkhaltige Glykoproteinase, die verschiedene natürliche und künstlich synthetische Phospholipidmonoester-Verbindungen in alkalischer Umgebung hydriert.

AKP/ALP Es ist weit verbreitet in allen Organen des menschlichen Körpers, hauptsächlich in der Leber.

Bestimmungsprinzip:

In einer alkalischen Umgebung,AKP/ALP Katalysiert Benzindinatriumphosphat zur Herstellung von freien Phenolen; Phenol und 4-Aminoantibilin und Eisen Cyanuhua Kalium Reaktion rote SubQuinon-Derivate, in 510nmCharakteristische Lichtabsorption; Durch Messung 510 nmAbsorptionsrate erhöht, um zu berechnenAKPAktivität.

Alkaline Phosphataseaktivität Testkit Esterase-Serie

Zusammensetzung:

Reagenz 4: Flüssigkeit×1 Flasche,4℃Lichtschutz, kann verwendet werden, bevor es blau-grün wird. Standardprodukt: Flüssigkeit×1 Zweig (EP im Rohr),2 μmol/ml Phenol-Standardflüssigkeit,4℃Speichern.

Eigene Geräte und Zubehör:

Sichtbares Spektrophotometer/Enzym-Calibrator, Spuren-Quarzschalen/96 Bohrplatten, Tischzentrifugen, Wasserwannen, verstellbare Pipetten und destilliertes Wasser.

Die Parameter des spezifischen Produkts hängen von den Parametern ab, die die Produktbeschreibung erhalten haben

Rohenzymflüssigkeitsextraktion:

1. Organisation: nach Organisationsqualität (g(1) Volumen des Reagents(ml)für 1：5~10Der Anteil (Empfohlen ungefähr 0.1gOrganisation, Beitritt 1 mlReagenziena) ein Eisbad durchführen,4℃、8000gZentrifugieren 10 MinutenEntnehmen Sie die Flüssigkeit zur Prüfung.

2. Bakterien oder Zellen: nach der Anzahl der Bakterien oder Zellen (104 (a): Volumen des Reagents (ml）für 500~1000：1 Der Anteil (Vorschlag 500 zehntausendZellen beitreten 1 mlReagenz I), Eisbad Ultraschall Zerbrechen Zellen (Leistung 300wUltraschall. 3 Sekunden, Intervall 7 Sekunden, Gesamtzeit 3 Minuten）；dann 8000g，4℃Zentrifugieren. 10 MinutenEntfernen und auf dem Eis testen.

3. Das Blut kann direkt oder nach entsprechender Verdünnung gemessen werden.

Schritte zur Bestimmung:

1. Spektrophotometer/Enzym-Vorwärmung 30 MinutenDie Wellenlänge einstellen 510 nmDestillationswasser Null.

2. Reagenz 3 in 37℃Vorwärmung im Bad 30 Min。

3. Leere Rohre:取EP Schlauch, beitreten 4 μl destilliertes Wasser,40 μl Reagenz 2,40 μl Reagenz 3, nach Mischung in 37℃Wärmedämmung im Bad 15 Minuten；Zusatz von Reagenzien 4 120 μlNach der Mischung 510nmAbsorptionsgrad messen, wieALeere Rohre.

4. Standardrohr:取EP Schlauch, beitreten 4 μl Standardprodukte,40 μl Reagenz 2,40 μl Reagenz 3, nach Mischung in 37℃Wärmedämmung im Bad 15 Minuten；

Zusatz von Reagenzien 4 120 μlNach der Mischung 510nm Absorptionsgrad messen, wieA Standardrohre.

5. Kontrollrohr:取EP Schlauch, beitreten 4 μl Flüssigkeit,40 μl destilliertes Wasser,40 μl Reagenz 3, nach Mischung in 37℃Wärmedämmung im Bad 15 Minuten；Zusatz von Reagenzien 4 120 μlNach der Mischung 510nmAbsorptionsgrad messen, wieAMessrohre.

6. Messrohre:取EP Schlauch, beitreten 4 μl Flüssigkeit,40 μl Reagenz 2,40 μl Reagenz 3, nach Mischung in 37℃Wärmedämmung im Bad 15 Minuten；

Zusatz von Reagenzien 4 120 μlNach der Mischung 510nm Absorptionsgrad messen, wieA Messrohre.Standardrohre und leere Rohre müssen nur ein Rohr gemacht werden, Messrohre und Kontrollrohre müssen für jede Probe gemacht werden.

Hinweis: Leere Rohre und Standardrohre müssen nur einmal gemessen werden.

AKP/ALP Berechnung der Aktivität:

1. Im Blut.AKP/ALP Berechnung der Vitalität

Definition der aktiven Einheit:37℃Katalysiert pro Milliliter Blut pro Minute 1 μmol Phenol definiert als 1 eine lebende Enzymeinheit.

AKP/ALP 活力(μmol/min) / ml)= [C] Standardprodukte× A Messrohre-A Kontrollrohr÷(A) Standardrohre-A Leeres Rohr)×V Gegen General] ÷V wie

÷T=6,8×(A) Messrohre-A Kontrollrohr÷(A) Standardrohre-A Leeres Rohr)

2. in Gewebe, Bakterien oder ZellenAKP/ALP Aktive Berechnung

（1）Berechnung nach Proteinkonzentration

Definition der aktiven Einheit:37℃Katalysiert pro Milligramm Protein pro Minute 1 μmolPhenol definiert als 1 eine lebende Enzymeinheit. AKP / ALP (μmol / min / mg) prot)=[C] Standardprodukte× A Messrohre-A Kontrollrohr÷(A) Standardrohre-A Leeres Rohr)×V Gegen General]÷(Cpr×Vwie÷T = 6,8× (A)Messrohre-AKontrollrohr÷(A)Standardrohre-ALeeres Rohr÷Cpr

（2）Berechnung nach Probenqualität

Definition der aktiven Einheit:37℃Katalysiert pro Gramm Gewebe pro Minute 1 μ mol Phenol definiert als 1 eine lebende Enzymeinheit.

AKP / ALP (μmol / min / g) Schwer)=[C Standardprodukte× A Messrohre-A Kontrollrohr÷(A) Standardrohre-A Leeres Rohr)×V Gegen General] ÷ (W × V) wie÷VGesamt÷T = 6,8× (A)Messrohre-AKontrollrohr÷(A)Standardrohre-ALeeres Rohr÷W

（3）Berechnen nach der Anzahl der Bakterien oder Zellen

Definition der aktiven Einheit:37℃Mittel jedes 10⁴ Bakterien oder Zellen werden pro Minute katalysiert. 1 μmolPhenol definiert als 1 eine lebende Enzymeinheit.AKP/ALP (μmol/min/10)⁴ Zelle)=[C] Standardprodukte× A Messrohre-A Kontrollrohr÷(A) Standardrohre-A Leeres Rohr)×V Gegen General]÷(Anzahl der Zellen× V wie÷V Gesamt÷T = 6,8×(A)Messrohre-AKontrollrohr÷(A)Standardrohre-ALeeres Rohr) ÷Anzahl der Zellen

C Standardprodukte:2 μmol / ml；V Gegensumme: Gesamtvolumen des Reaktionssystems (ml），205μl = 0,205ml； Cpr: Proteinkonzentration der Rohenzymflüssigkeit（mgim/ml），Eine zusätzliche Messung ist erforderlich und wird empfohlen, von unserem Unternehmen hergestellte Produkte zu verwenden. BCAProteingehaltsmessung Kit;W Probenqualität;VBeispiel: Fügen Sie das obere Flüssigkeitsvolumen in das Reaktionssystem hinzu (ml），0.004ml；VProbensumme: Extrahiertes Flüssigkeitsvolumen,1 ml；TReaktionszeit (Min），15 Minuten。

Hinweis:

1. Reagenz 2, Reagenz 3 und Reagenz 4 müssen vor Licht bewahrt werden.

2. Das Reagenz kann nicht mehr verwendet werden, nachdem es blau-grün ist.

3. Nach dem Zugabe des Reagents muss sofort vermischt werden, sonst wird die Farbe nicht angezeigt.Alle。

Alkaline Phosphataseaktivität Testkit Esterase-Serie