Mäuse in Fibrozellen

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Identifizierung der Gattung von Mäusenfibrozyten L929 Im März 1948 wurde der NCTC-Klon 929 (Mäusenbindegewebe), ein Klon der Zelllinie L, gegründet. Die Zelllinie L war eine der ersten kontinuierlich kultivierten Zelllinien, während der Klon 929 der erste Klonstam war. Die Elternzelllinie L wurde aus dem normalen subkutanen, porosen Bindegewebe einer männlichen C3H/An-Maus im Alter von 100 Tagen in das Fettgewebe aufgebaut. Die Zelllinie L der 95. Generation wurde durch Kapillarität zur Isolierung von Einzelzellen Clone929 aufgebaut. Der Test ergab, dass das Virus negativ ist.

Produktdetails

Mäusenfibrozyte L929Identifizierung als Organismus

Auch als NCTC-Klon 929 bekannt, ist eine Zelllinie, die aus normalem subkutanen Lactose und Fettgewebe von C3H/An-Mäusen isoliert wurde. Diese Zelllinie wurde im März 1948 gegründet und war eine der ersten kontinuierlich kultivierten Zelllinien. L929-Zellen haben eine fibroblastische Form, wachsen nahe an sich und sind empfindlich gegen eine Vielzahl von Viren, wie Glasgow Follicular Mouth Virus, Orsay Follicular Mouth Virus, Cerebromyelitis Virus usw. Darüber hinaus sind sie tumoral in immununterdrückten Mäusen und können als Wirtszellen Transfektionsexperimente durchgeführt werden.

L929-Zellen werden in der Zellbiologie und biomedizinischen Forschung eingesetzt, einschließlich Toxizitätstests, Virologieforschung, Drogenscreening, Immunologie und Gewebetechnik. Ihre Wachstumseigenschaften machen sie zu wichtigen Modellen für die Untersuchung von Zellprogramm, Zytotoxizität, Zellhaftung und Zellverbindung. Unter Kulturbedingungen wachsen L929-Zellen in der Regel in einem DMEM-Zuckermedium, das 10% fetales Rinderserum enthält, und werden unter Gasphasenbedingungen von 37 Grad Celsius, 95% Luft und 5% Kohlendioxid kultiviert.

Bei der Zellkultur ist das Übertragungsverhältnis von L929-Zellen in der Regel 1: 2 bis 1: 8 mit einem Übertragungszyklus von etwa 2-3 Tagen und einer Gefrierformel von 92% Kulturflüssigkeit und 8% DMSO. Diese Zellen sind in der wissenschaftlichen Forschung sehr weit verbreitet, aber es ist wichtig zu beachten, dass alle Zellen, die von Tumoren und Viren infiziert werden, als potenziell biologisch gefährlich betrachtet werden und daher im Betrieb im Sekundärbiosicherheitsstand mit geeigneten Schutzmaßnahmen durchgeführt werden müssen.

Mäusenfibrozyte L929 NCTC-Klon 929 (L929)
l Zellendifizierung	Die Identifizierung wurde genehmigt
l Zellenquellen	Nationale Ressourcenbank
Zellhintergrund	Im März 1948 wurde der NCTC-Klon 929 (Maus-Bindegewebe) erstellt, ein Klon der Zelllinie L. Die Zelllinie L war eine der ersten kontinuierlich kultivierten Zelllinien, während der Klon 929 der erste Klonstam war. Die Elternzelllinie L wurde aus dem normalen subkutanen, porosen Bindegewebe einer männlichen C3H/An-Maus im Alter von 100 Tagen in das Fettgewebe aufgebaut. Die Zelllinie L der 95. Generation wurde durch Kapillarität zur Isolierung von Einzelzellen Clone929 aufgebaut. Der Test ergab, dass das Virus negativ ist.
l Zelleigenschaften	1) Quelle: Gewebe: Subkutales Bindegewebe; Porose Bindegewebe und Fette: C3H/An; 2) Morphologie: Fibrozellen, Adhesive Wachstum; 3) Inhalt: > 1x106 Zellzahl; 4) Spezifikationen: T25 Flasche oder 1ml Gefrierrohrverpackung; 5) Verwendungszweck: ausschließlich für wissenschaftliche Zwecke.
l Erziehungsbedingungen	1) Vorbereitung des MEM-Mediums (empfohlen awcell-0012); Pferdeserum (empfohlen: awcell-002b) 10%; Doppel, 1 Prozent. Diese Zelle kann nicht mit fetalen Rinderserum kultiviert werden. 2) Kulturbedingungen: Gasphase: Luft, 95%; Kohlendioxid, 5 Prozent. Temperatur: 37 Grad Celsius, die Feuchtigkeit im Ausbauraum beträgt 70% -80%.
l Achtung	Für die klebende Zelltransmission kann man sich auf die folgenden Methoden beziehen: 1. Entfernen Sie die Kultur und waschen Sie die Zellen 1-2 mal mit PBS ohne Kalzium- und Magnesiumionen. 2. 0,25% (w / v) Panprotease-0,53 mM EDTA in der Flasche (T25 Flasche 1-2 mL, T75 Flasche 2-3 mL) hinzufügen, in einem 37 ° C-Schacht für 1-2 Minuten verdauen (schwer verdaubare Zellen können die Verdauungszeit angemessen verlängern), dann beobachten Sie unter dem Mikroskop die Verdauung der Zellen, wenn die meisten der Zellen sich runden und fallen, schnell wieder auf dem Arbeitstisch, ein paar leichte Klopfe auf die Flasche, um 3-4 ml des Mediums mit 10 S hinzuzufügen, um die Verdauung zu beenden. 3. nach sanftem Schlagen aussaugen, 3-5 min unter 1000 RPM zentrifugieren, die Oberflüssigkeit entfernen und 1-2 ml Kulturflüssigkeit hinzufügen. Verteilen Sie die Zellsuspension im Verhältnis von 1: 2 in eine neue T25-Flasche, fügen Sie 6-8 ml eines neuen * Mediums hinzu, das gemäß den Anforderungen der Anleitung konfiguriert ist, um das Wachstum der Zellen zu erhalten, und die nachfolgende Übertragung erfolgt im Verhältnis von 1: 2 bis 1: 5 je nach den tatsächlichen Umständen. 3) Zellfrieren: Nach Erhalt der Zellen wird empfohlen, eine Reihe von Zellsamen für die nachfolgenden Experimente bei der Kultivierung der ersten 3 Generationen einzufrieren.
l Transportform	Tieftemperatur: (1) 1mL Gefrierrohr Verpackung Trockeneis Transport, nach Erhalt von -80 Grad Kühlschrank nach Übernachtung in flüssigen Stickstoff oder direkte Erholung Trockeneis gefunden hat, flüchtig und sauber, Gefrierrohr Flaschendeckel abgefallen, zerstört und Zellen kontaminiert, bitte kontaktieren Sie uns sofort. Normale Temperatur: (2) T25-Flasche Erholung von überlebenden Zellen bei normaler Temperatur geliefert und nach Empfang nach der Behandlung der Zellen nach Empfang.
l Biologische Sicherheit	1. Alle Tierzellen werden als potenziell biologisch gefährlich angesehen und müssen in einem Biosicherheitsstand der zweiten Stufe betrieben werden, und bitte achten Sie darauf, dass alle Abfälle und Gefäße, die mit dieser Zelle in Berührung kommen, sterilisiert werden müssen, bevor sie entsorgt werden können. Es wird empfohlen, immer Schutzhandschuhe, Kleidung und eine Schutzmaske zu tragen, wenn Sie gefrorene Zellen wiederherstellen. Hinweis: Ein Gefrierrohr, das in flüssigen Stickstoff eingetaucht ist, leckt und wird langsam mit flüssigem Stickstoff gefüllt. Wenn flüssiger Stickstoff in eine Gasphase umgewandelt wird, kann der Behälter explodieren oder seinen Deckel mit gefährlicher Kraft abblasen, wodurch fliegendes Schutt verursacht wird, das Menschen verletzt.

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