H9C2 Herzmuskelzellen von Ratten

Herzmuskelzellen von Ratten H9C2

l Zellendifizierung

Die Identifizierung wurde genehmigt

l Zellenquellen

Nationale Ressourcenbank

Zellhintergrund

B. Kimes und B. Brandt subklonierten den Zellstamm H9c2(2-1) aus einem klonierten Zellstamm, der aus dem embryonalen Herzgewebe von BD1X-Ratten stammt, der Eigenschaften vieler Skelettmuskeln aufweist. Muskelformende Zellen in diesem Zellstamm können sich zu polynuklearen Muskelgefäßen verschmelzen und auf Acetylcholin-Stimulationen reagieren. Wenn die Serumkonzentration im Medium auf 1% sinkt, tritt die Fusion schnell auf.

l Zelleigenschaften

1) Quelle: Herz

2) Morphologie: Muskelformende Zellen, Adhesive Wachstum

3) Inhalt: > 1x106 Zellzahl

4) Spezifikationen: T25 Flasche oder 1ml Gefrierrohrverpackung

5) Verwendungszweck: ausschließlich für wissenschaftliche Zwecke.

l Erziehungsbedingungen:

1) DMEM-Medium (mit 1,5 g/L NaHCO3 empfohlen: awcell-128-0001) oder (GIBCO, Artikelnummer 12800017, mit 1,5 g/L NaHCO3) zubereiten; Hochwertiges Rinderserum, 10%; Doppelt gegen 1%.

2) Kulturbedingungen: Gasphase: Luft, 95%; Kohlendioxid, 5 Prozent. Temperatur: 37 Grad Celsius, die Feuchtigkeit im Ausbauraum beträgt 70% -80%.

l Hinweise:

Hinweis: H9C2-Herzmuskelzelle von Ratten Diese Zelle wächst gut in einem DMEM-Medium (enthaltend 1,5 g/LNaHCO3) und die meisten Marken von DMEM enthalten höhere Konzentrationen von NaHCO3 (3,7 g/L), was eine erhöhte CO2-Konzentration (7% -10%) erfordert, wenn Zellen mit DMEM-Medium (3,7 g/L NaHCO3) kultiviert werden.

Für die klebende Zelltransmission kann man sich auf die folgenden Methoden beziehen:

1. Entfernen Sie die Kultur und waschen Sie die Zellen 1-2 mal mit PBS ohne Kalzium- und Magnesiumionen.

2. 0,25% (w / v) Panprotease-0,53 mM EDTA in der Flasche (T25 Flasche 1-2 mL, T75 Flasche 2-3 mL) hinzufügen, in einem 37 ° C-Schacht für 1-2 Minuten verdauen (schwer verdaubare Zellen können die Verdauungszeit angemessen verlängern), dann beobachten Sie unter dem Mikroskop die Verdauung der Zellen, wenn die meisten der Zellen sich runden und fallen, schnell wieder auf dem Arbeitstisch, ein paar leichte Klopfe auf die Flasche, um 3-4 ml des Mediums mit 10 S hinzuzufügen, um die Verdauung zu beenden.

3. nach sanftem Schlagen aussaugen, 3-5 min unter 1000 RPM zentrifugieren, die Oberflüssigkeit entfernen und 1-2 ml Kulturflüssigkeit hinzufügen. Verteilen Sie die Zellsuspension im Verhältnis von 1: 2 in eine neue T25-Flasche, fügen Sie 6-8 ml eines neuen * Mediums hinzu, das gemäß den Anforderungen der Anleitung konfiguriert ist, um das Wachstum der Zellen zu erhalten, und die nachfolgende Übertragung erfolgt im Verhältnis von 1: 2 bis 1: 5 je nach den tatsächlichen Umständen.

3) Zellfrieren: Nach Erhalt der Zellen wird empfohlen, eine Reihe von Zellsamen für die nachfolgenden Experimente bei der Kultivierung der ersten 3 Generationen einzufrieren.

l Transportform:

Tiefe Temperatur: (1) 1ml Gefrierrohr Verpackung Trockeneis Transport, nach Erhalt von -80 Grad im Kühlschrank aufbewahren über Nacht in flüssigen Stickstoff oder direkt Erholung, wenn Trockeneis gefunden wurde, flüchtig und sauber, Gefrierrohr Flaschendeckel fallen, zerstört und Zellen kontaminiert, kontaktieren Sie uns bitte sofort.

Normale Temperatur (2) T25-Flasche Erholung von überlebenden Zellen bei normaler Temperatur geliefert und nach Empfang nach der Behandlung der Zellen nach Empfang.

Biologische Sicherheit:

1. Alle Tierzellen werden als potenziell biologisch gefährlich angesehen und müssen in einem Biosicherheitsstand der zweiten Stufe betrieben werden, und bitte achten Sie darauf, dass alle Abfälle und Gefäße, die mit dieser Zelle in Berührung kommen, sterilisiert werden müssen, bevor sie entsorgt werden können.

Es wird empfohlen, immer Schutzhandschuhe, Kleidung und eine Schutzmaske zu tragen, wenn Sie gefrorene Zellen wiederherstellen. Hinweis: Ein Gefrierrohr, das in flüssigen Stickstoff eingetaucht ist, leckt und wird langsam mit flüssigem Stickstoff gefüllt. Wenn flüssiger Stickstoff in eine Gasphase umgewandelt wird, kann der Behälter explodieren oder seinen Deckel mit gefährlicher Kraft abblasen, wodurch fliegendes Schutt verursacht wird, das Menschen verletzt.