Endotelzelllinie menschlicher Nabelvene

HUVEC Immortalisierung menschlicher Nabelvenen Endotelzellen

l Zellendifizierung

Immunofluoreszenz-Identifizierung erfolgt

l Zellenquellen

Nationale Ressourcenbank (Shanghai Academy of Sciences)

Zellhintergrund

HUVEC wurde lange zuvor von der US-ATCC gegründet, wurde später weit verbreitet, aber in den letzten Jahren wurde die Kreuzkontamination der Zellquelle entdeckt, die derzeit international entfernt wurde, die USA haben auch ein Problem mit der Zelle entdeckt, so dass eine neue HUVE-C aufgebaut wurde, aber derzeit ist die Zelle nach der Einführung in das Inland in einem sehr schlechten Zustand, kann nicht verwendet werden. Daher ist es schwierig auf dem Markt, HUVE-C-Zellen zu finden, die in einem guten Zustand der menschlichen Nabelvenen Endotelzellen verwendet werden können. Unser Unternehmen ist auch, weil es keine geeigneten Zellen in einem guten und genauen Zustand gibt, so haben wir die inländische Primärzelle-Immortalisierung aufgebaut, um eine völlig neue genaue Zelle zu erhalten: die menschliche Nabelvene Endotelzelle Immortalisierung. Die Immunfluorescenz-Identifizierung eines einzelnen Endothelzellmarkers zur Verfügung gestellt. Die Zellen heißen: menschliche Nabelvenen-Endotelzellen Immortalisierungszellen, und huve-c ist der gleiche Typ von Zellen, alle gehören zu menschlichen Nabelvenen-Endotelzellen, nur die Bezeichnung ist anders, und weil sie inländisch gebaut sind, können sie keine STR-Identifizierung anbieten, sondern eine Immunfluorescenz-Identifizierung anbieten.

l Zelleigenschaften

1) Quelle: Menschliche Nabelschnur

2) Morphologie: Endotelzell-ähnliches Wandwachstum

3) Inhalt: > 1x106 Zellzahl

4) Spezifikationen: T25 Flasche oder 1ml Gefrierrohrverpackung

5) Verwendungszweck: ausschließlich für wissenschaftliche Zwecke.

l Erziehungsbedingungen:

1) Vorbereitung des Endotelzellkultursystems (empfohlen: PriMed-awcell-002)

Endotelzellenkultur Basismedium 93%

Fetales Rinderserum (FBS) 5%

Endotelzellkulturzusatz 1%

Penicillin / Ketomycin, P/S 1%

2) Kulturbedingungen: Gasphase: Luft, 95%; Kohlendioxid, 5 Prozent. Temperatur: 37 ° C, die Luftfeuchtigkeit im Ausbauraum beträgt 70% -80%.

l Hinweise:

Die menschliche Nabelvene-Endotelzelllinie HUVEC kann sich auf folgende Methoden für die Adhesive-Zelltransmission beziehen:

1. Entfernen Sie die Kultur und waschen Sie die Zellen 1-2 mal mit PBS ohne Kalzium- und Magnesiumionen.

2. 0,25% (w / v) Panprotease-0,53 mM EDTA in der Flasche (T25 Flasche 1-2 mL, T75 Flasche 2-3 mL) hinzufügen, in einem 37 ° C-Schacht für 1-2 Minuten verdauen (schwer verdaubare Zellen können die Verdauungszeit angemessen verlängern), dann beobachten Sie unter dem Mikroskop die Verdauung der Zellen, wenn die meisten der Zellen sich runden und fallen, schnell wieder auf dem Arbeitstisch, ein paar leichte Klopfe auf die Flasche, um 3-4 ml des Mediums mit 10 S hinzuzufügen, um die Verdauung zu beenden.

3. nach sanftem Schlagen aussaugen, 3-5 min unter 1000 RPM zentrifugieren, die Oberflüssigkeit entfernen und 1-2 ml Kulturflüssigkeit hinzufügen. Verteilen Sie die Zellsuspension im Verhältnis von 1: 2 in eine neue T25-Flasche, fügen Sie 6-8 ml eines neuen * Mediums hinzu, das gemäß den Anforderungen der Anleitung konfiguriert ist, um das Wachstum der Zellen zu erhalten, und die nachfolgende Übertragung erfolgt im Verhältnis von 1: 2 bis 1: 5 je nach den tatsächlichen Umständen.

3) Zellfrieren: Nach Erhalt der Zellen wird empfohlen, eine Reihe von Zellsamen für die nachfolgenden Experimente bei der Kultivierung der ersten 3 Generationen einzufrieren.

l Transportform:

Tiefe Temperatur: (1) 1ml Gefrierrohr Verpackung Trockeneis Transport, nach Erhalt von -80 Grad im Kühlschrank aufbewahren über Nacht in flüssigen Stickstoff oder direkt Erholung, wenn Trockeneis gefunden wurde, flüchtig und sauber, Gefrierrohr Flaschendeckel fallen, zerstört und Zellen kontaminiert, kontaktieren Sie uns bitte sofort.

Normale Temperatur (2) T25-Flasche Erholung von überlebenden Zellen bei normaler Temperatur geliefert und nach Empfang nach der Behandlung der Zellen nach Empfang.

l Biologische Sicherheit

1. Alle Tierzellen werden als potenziell biologisch gefährlich angesehen und müssen in einem Biosicherheitsstand der zweiten Stufe betrieben werden, und bitte achten Sie darauf, dass alle Abfälle und Gefäße, die mit dieser Zelle in Berührung kommen, sterilisiert werden müssen, bevor sie entsorgt werden können.

Es wird empfohlen, immer Schutzhandschuhe, Kleidung und eine Schutzmaske zu tragen, wenn Sie gefrorene Zellen wiederherstellen. Hinweis: Ein Gefrierrohr, das in flüssigen Stickstoff eingetaucht ist, leckt und wird langsam mit flüssigem Stickstoff gefüllt. Wenn flüssiger Stickstoff in eine Gasphase umgewandelt wird, kann der Behälter explodieren oder seinen Deckel mit gefährlicher Kraft abblasen, wodurch fliegendes Schutt verursacht wird, das Menschen verletzt.