Menschliche embryonale Nierenzellen 293T

HEK-293T menschliche embryonale Nierenzellen

HEK-293T „293T“.

l Zellendifizierung

STR-Zertifizierung bestanden

l Zellenquellen

Nationale Ressourcenbank

Zellhintergrund

Die HEK-293T-Zellen sind Derivate der Zelllinie 293T (293tsA1609neo) (ATCC CRL-11268). Die Zellen drücken kontinuierlich das SV40-Antigen aus, das häufig in Transfektionsexperimenten verwendet wird und eine höhere Transfektionseffizienz aufweist. (Transfektion ist in der Regel mit einer Dichte von 50% beschichtet, bis die Zellen nur an die Scheibenwand geklebt sind (in der Regel 8-10 Stunden), können Transfektionsoperationen durchgeführt werden)

l Zelleigenschaften

1) Quelle: Embryo-Nieren

2) Morphologie: Epithelzellenartig, klebendes Wachstum, schwache Klebende Fähigkeit

3) Inhalt: > 1x106 Zellzahl

4) Spezifikationen: T25 Flasche oder 1ml Gefrierrohrverpackung

5) Verwendungszweck: ausschließlich für wissenschaftliche Zwecke

l Erziehungsbedingungen:

1) DMEM-Medium (awcell-0001 empfohlen) vorzubereiten; Hochwertiges Rinderserum, 10%; L-Glutamin (2mM) 1%; NEAA 1% ； Doppelt gegen 1%

2) Kulturbedingungen: Gasphase: Luft, 95%; Kohlendioxid, 5 Prozent. Temperatur: 37 ° C, die Luftfeuchtigkeit im Ausbauraum beträgt 70% -80%.

l Hinweise:

Die Zelle ist eine suspendierte und leicht klebende Zelle, die sich auf die folgenden Methoden beziehen kann:

1. Sammeln: Sammeln Sie die suspendierten Zellen in der Kulturflasche in die Zentrifuge. Waschen Sie die Zellen 1-2 mal mit PBS ohne Kalzium und Magnesium. Da die Zellen nach der PBS-Schmierung nicht fest kleben, fallen die Zellen ab, so dass PBS auch in die Zentrifuge zurückgewinnt wird.

2. Fügen Sie 0,25% (w / v) Panprotease-0,53 mM EDTA in der Flasche (T25 Flasche 1-2 mL, T75 Flasche 2-3 mL) in einem 37 ° C-Schacht für 1-2 Minuten verdauen (schwer verdaubare Zellen können die Verdauungszeit angemessen verlängern), dann beobachten Sie unter dem Mikroskop die Verdauung der Zellen, wenn die meisten der Zellen sich runden und fallen schnell zurück auf den Arbeitstisch, ein paar Klicks auf die Flasche und fügen Sie 3-4 ml des Mediums hinzu, das 10 S enthält, um die Verdauung zu beenden.

3. Die gesammelten Zellen in der Suspension, die Zellen in der PBS-Reinigungsflüssigkeit und die verdauten Klebstoffzellen werden bei 1000 rpm für 5 Minuten zentrifugiert, die Oberflüssigkeit entfernt, 1-2 ml Kulturflüssigkeit hinzugefügt und gemischt und die Zellsuspension im Verhältnis von 1: 2 in die neue T25-Flasche aufgeteilt, 6-8 ml neues * Medium hinzugefügt, das gemäß den Anforderungen der Anleitung konfiguriert ist, um die Wachstumsleistung der Zellen aufrechtzuerhalten, und die nachfolgende Übertragung erfolgt im Verhältnis von 1: 2 ~ 1: 5 nach den tatsächlichen Umständen.

Menschliche embryonale Nierenzellen 293T-Zellen Einfrieren: Nach Erhalt der Zellen wird empfohlen, eine Reihe von Zellsamen für die nachfolgenden Experimente während der Kultivierung der ersten 3 Generationen einzufrieren.

l Transportform:

Tiefe Temperatur: (1) 1ml Gefrierrohr Verpackung Trockeneis Transport, nach Erhalt von -80 Grad im Kühlschrank aufbewahren über Nacht in flüssigen Stickstoff oder direkt Erholung, wenn Trockeneis gefunden wurde, flüchtig und sauber, Gefrierrohr Flaschendeckel fallen, zerstört und Zellen kontaminiert, kontaktieren Sie uns bitte sofort.

Normale Temperatur (2) T25-Flasche Erholung von überlebenden Zellen bei normaler Temperatur geliefert und nach Empfang nach der Behandlung der Zellen nach Empfang.

Biologische Sicherheit:

1. Alle Tierzellen werden als potenziell biologisch gefährlich angesehen und müssen in einem Biosicherheitsstand der zweiten Stufe betrieben werden, und bitte achten Sie darauf, dass alle Abfälle und Gefäße, die mit dieser Zelle in Berührung kommen, sterilisiert werden müssen, bevor sie entsorgt werden können.

Es wird empfohlen, immer Schutzhandschuhe, Kleidung und eine Schutzmaske zu tragen, wenn Sie gefrorene Zellen wiederherstellen. Hinweis: Ein Gefrierrohr, das in flüssigen Stickstoff eingetaucht ist, leckt und wird langsam mit flüssigem Stickstoff gefüllt. Wenn flüssiger Stickstoff in eine Gasphase umgewandelt wird, kann der Behälter explodieren oder seinen Deckel mit gefährlicher Kraft abblasen, wodurch fliegendes Schutt verursacht wird, das Menschen verletzt.