MTS Zellprogramm Testkit

MTS Zellprogramm TestkitDas MTS Cell Proliferation Assay Kit ist ein gängiges Test-Kit für Zellproliferation und Toxizität. MTS ist ein neues Tetrazolsalz, das durch Bernsteinsäuredehydrogenase in lebenden zellulären Mitochondrien zu einem wasserlöslichen Produkt Formazan reduziert werden kann. Radium hat eine spezifische Absorption bei 490 nm, so dass die Zellprogramm durch Messung der Absorption bei 490 nm reflektiert werden kann. Je schneller sich die Zellen vermehren, desto höher ist der Absorptionswert.
Im Vergleich zu den gängigen MTT-Kits muss diese Kit das ursprüngliche Medium nicht entfernen, und es ist nicht erforderlich, dass ein zusätzliches Lösungsmittel verwendet wird, um das Medium zu lösen, was bequemer ist, während die Entfernung eines Teils des Mediums durch das Entfernen eines Teils des Mediums verursachte experimentelle Fehler vermieden werden können. Diese Kit ist sehr flexibel zu verwenden und kann nach dem Test weiterhin inkubiert werden, um ein besseres Ergebnis zu erzielen. Darüber hinaus hat dieses Kit die Vorteile eines breiten linearen Bereichs, einer hohen Empfindlichkeit und einer sicheren Verwendung.
Produktzusammensetzung:

Experimentelle Operation:
1, MTS Arbeitsflüssigkeit Zubereitung:
Durch Mischen von MTS-Lösung und PMS-Lösung im Verhältnis von 20:1 entsteht eine MTS-Arbeitsflüssigkeit. Die fertige MTS-Arbeitsflüssigkeit sollte bei -20 ° C zur Lichtschutz gelagert werden, um wiederholtes Gefrierschmelzen zu vermeiden.
Hinweis: Sowohl die MTS-Lösung als auch die PMS-Lösung sind leicht abbaubar und müssen daher sowohl während der Herstellung als auch während der Verwendung vor Licht geschützt werden (kann in Zinnpapier verpackt werden). Für häufige Anwendungen und die Aufbewahrung des Kits bei 4 °C sollte die MTS-Arbeitsflüssigkeit jedes Mal vor der Prüfung bereitgestellt werden. Zubereitete unbenutzte MTS-Arbeitsflüssigkeiten müssen bei -20°C vor Licht gelagert werden.
2. Zellkultur:
Die Zellen werden in geeigneten Behältern wie Bohrplatten impft. Für 96-Loch-Platten wird empfohlen, 100 uL Medium pro Loch hinzuzufügen, während eine Impfung von 5-100 x 10 pro Loch empfohlen wird.3Eine Zelle. Die Zellen der Versuchsgruppe können für eine gewisse Zeit mit interessierenden Medikamenten behandelt werden, entsprechend dem experimentellen Design, wobei eine separate leere Gruppe (nur mit Medium) und eine Kontrollgruppe (mit Medium, Zellen und medizinischen Lösungsmitteln) eingerichtet werden müssen.
Hinweis: Die spezifische Anzahl der Zellen, die pro Loch geimpft werden, kann je nach Zelltype angepasst werden.
MTS Inkubation:
20 µL MTS Arbeitsflüssigkeit für jedes Loch hinzugefügt und anschließend in die Zellkultur für 1-4 h inkubiert.
Hinweis: Die MTS-Inkubationszeit kann je nach Experiment angepasst werden.
4. Prüfung:
Messung der Absorption (A) mit einem Enzym-Scaler bei 490 nm. Wenn kein 490 nm Filter vorhanden ist, können Sie einen 450-540 nm Filter verwenden.
5. Datenanalyse:
Die Formel zur Berechnung der Zellenüberlebensrate lautet wie folgt:
Überlebensrate (%) = [(A)Experimentelle Gruppe-ALeere Gruppe) / (AKontrollgruppe-ALeere Gruppe)] ×100

1, wenn die Zellen für eine lange Zeit kultiviert werden, sind die Randlöcher der 96-Loch-Platte anfällig für Flüssigkeitsverdampfungsprobleme. Es wird empfohlen, die 96-Loch-Platte um einen Kreis herum zu werfen, anstelle steriles Wasser, Kulturmedium oder PBS hinzuzufügen; Gleichzeitig kann die 96-Loch-Platte in der Nähe der Wasserquelle in der Kultivkammer platziert werden.
2, MTS-Lösung und PMS-Lösung werden bei niedriger Temperatur kondensiert, vor der Verwendung bitte auf Raumtemperatur oder 37 ° C-Wasserbad etwa 10 Minuten zurückerwärmen, bis Wan nach der vollständigen Schmelze verwendet wird.
MTS-Lösung und PMS-Lösung sind empfindlich gegen Licht, wenn sie bei 4 ° C gelagert werden, kann sich die Farbe der Lösung leicht ändern, die die Absorptionswerte des Bodens erhöhen kann, aber das Endergebnis des Experiments nicht beeinflussen.
Wenn es nicht rechtzeitig erkannt werden kann, kann nach dem Ende der Inkubation in Schritt 3 25 µl 10% SDS pro Loch hinzugefügt werden, um die Reaktion zu beenden. Durch SDS behandelte Bohrplatten können platziert werden
Nicht länger als 18 h im Lichtschutz aufbewahren.
Zur Sicherheit und Gesundheit tragen Sie bitte eine experimentelle Anzug und Einweghandschuhe.

Lagern Sie das Kit bei -20°C weg von Licht und Feuchtigkeit, stabil für 1 Jahr. Für den häufigen Gebrauch kann das Kit bei 4°C weg von Licht und Feuchtigkeit gelagert werden, stabil für 6 Wochen.