Absolute Zählung von Mikrokugeln

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Flow absolute Zählung Mikrosphären sind heute weit verbreitet in Zellzählung Experimente und Krankheit Fortschritt Forschung, insbesondere im Bereich der Stammzellenforschung.

Produktdetails

Absolute Zählung von Mikrokugeln

Produktbeschreibung

Beschreibung

Die Flow-Zytometrie-Zellzählanalyse ermöglicht eine schnelle Quantifizierung der Zellmerkmale, und die absolute Zellzählmikrosphäre wird jetzt weit verbreitet in Zellzählexperimenten und in der Krankheitsforschung verwendet, insbesondere im Bereich der Stammzellenforschung. Die einzelne Flasche dieses Produkts enthält fluoreszierende Partikel, die mit fluoreszierenden Farbstoffen präzise gefärbt sind, die eine optimale fluoreszierende Intensität und ein breites Emissionsspektrum in mehreren Kanälen (FITC, PE, PE-Cy5) aufweisen. Die hydrophile Partikeloberfläche eliminiert die Erzeugung von Diomeren und gewährleistet die Genauigkeit der Zählungen, die durch den Analyseprozess überprüft wurden, sowie die Zuverlässigkeit der absoluten Zählungen des Flusszellometers.
Die absolute Zellzahl wird in der Regel durch zwei Methoden erhoben: eine ist die Kombination der Zellkonzentrationen, die in einem Zellanalyseinrichtung erfasst wurden, mit den Zellpopulationsdaten aus der Stream-Zytometrie-Zellzahl-Analyse (Multi-Plattform-Detektion), und eine andere ist die Hinzufügen von internen Mikrosphärenzählstandards in die Stream-Zellprobe (Single-Plattform-Detektion). Die Methode der einzelnen Plattform-Detektion ist sehr einfach, um Unterschiede zwischen den Laboren zu vermeiden, wodurch eine genauere, fluoreszierende Referenz als Mikrosphäre zur absoluten Zählung von Zellen verwendet wird, ist eine der derzeit von klinischen und wissenschaftlichen Forschern weit anerkannten Methoden der absoluten Zählung von Stream-Zytometrie.

Anwendung

Absolute Anzahl der T-Lymphozyten, absolute Anzahl der CD34+-Blutstammzellen, absolute Anzahl der Netzwerkroten Blutkörperchen, absolute Anzahl der zirkulierenden Tumorzellen usw.

Konzentration

6.4x107Partikel/ml ± 5 %

Gebrauchsanweisung

Musteranforderungen:
1. Sammeln Sie mehr als 200 ml Proben mit Hepatin-Antikoagulation-Guan.
Die Probe muss bei Raumtemperatur gelagert werden und Schütteln vermieden werden und innerhalb von 24 Stunden nach der Blutentnahme verwendet werden.
3, die Probe nach der Färbung bei 2-8 ° C aufbewahrt und innerhalb von 24 Stunden an Bord getestet wird.
4. Proben mit mikrobieller Kontamination, Lipid, Blutgerinnung und schlechter Zellivität sollten vermieden werden, es sei denn, die Probe ist unersetzbar, bitte beim Bericht über die Ergebnisse kennzeichnen.

Eigenes Material:
1, Blutzellenteilung xij
2. Streaming-Antikörper
3, Hepatin Antikoagulation Guan
4, Messbereich geeignet für Pipetten von 20 uL, 100 uL, 1 mL und Einweg-Saugköpfe
5. Wirbelsozilator
6. Flusszellometer

Betriebsschritte:
1, mit der umgekehrten Pipettierung-Technik, um 50 uL gemischte Probe zu saugen, fügen Sie die absolute Zählung Guan-Boden hinzu, vermeiden Sie den Kontakt mit dem Rohrboden und vermeiden Sie, dass Blut die obere Rohrwand berührt.
2. Fügen Sie eine bestimmte Menge an Stream-Antikörper-Reagenzien auf den Boden des Flussrohres hinzu.
3. Abdecken Sie die Kappe und mischen Sie sie sanft für etwa 3 Sekunden, während die Lichtschutzreaktion bei Raumtemperatur 25 Minuten dauert.
4. Fügen Sie 450 uL Blutzellen in das Röhrchen Xi mit Hemolyse Ji hinzu, decken Sie die Röhrenkappe ab, mischen Sie sie leicht für etwa 15 Sekunden und bewahren Sie die Lichtschutzreaktion bei Raumtemperatur für 10 Minuten. Waschfrei, zu prüfen.
5, sanft wirbeln und mischen Sie für etwa 10 Sekunden, um an Bord zu erkennen.
Im Folgenden wird ein Beispiel für die Analyse mit einer normalen peripheren Blutprobe eines Erwachsenen, einem fluoreszierenden monoklonalen Antikörper-Kit CD3-FITC/CD8-PE/CD45-PerCP/CD4-APC (Flow-Zellometrie).
Erstens erstellen Sie eine CD45 / SSC-Streutkarte, in der die Lymphozytenpopulation mit einer hohen Expression von CD45 und einer niedrigen Expression von SSC mit unregelmäßigen Türen ausgekreist wird, siehe Abbildung 1:

Abbildung 1: Umkreisung der Lymphozytentüre in der CD45/SSC Streuungskarte

Zweitens wählen Sie die Anzeige der Zellen innerhalb des Lymphozytenportels und setzen Sie ein CD3/SSC-Streutbild ein. CD3+, siehe Abbildung 2.

Abbildung 2: CD3+-Lymphozyten im CD3/SSC-Streuungsdiagramm

Wählen Sie die Anzeige der Zellen innerhalb der Lymphozytentoren und setzen Sie die CD3/CD4 Streuung Diagramm vier Quadrant Türen. CD3 und CD4 sind CD4 + T-Lymphozyten, siehe Abbildung 3.

Abbildung 3: CD3/CD4 Streuungsdiagramm mit vier Quadranttüren

Schließlich wählen Sie die Anzeige aller Zellen, setzen Sie ein CD3 / CD8 Streuungsdiagramm und kreisen Sie die absolute Anzahl der Mikrosphären, siehe Abbildung 4.

Abbildung 4: CD3/CD8 Streuungsdiagramm zur absoluten Zählung von Mikrosphären

Wenn keine automatische Software zur absoluten Zählung verwendet wird, können Sie die folgenden Gleichungen manuell zählen:
Absolute Anzahl der Lymphzellen (Cells/uL) = (Anzahl der Lymphzellen in der Region x Mikrosphären) / (Absolute Anzahl der Mikrosphären in der Region x Probenvolumen)

Speicherung/Speichermethode

2-30 ° C aufbewahren, nicht gefriert, gültig für 5 Jahre.

Technische Indikatoren

Bestandteil	Multi-fluoreszierende Färbung Polystyren Mikrosphere
Mikrokugelgröße	5 µm
Farbe	Grüne Fluoreszenz (488/525 nm)
	Rotfluoreszenz (535/575 nm)
	Nahinfrarotfluoreszenz (635/660 nm)
Konzentration	6.4×107Partikel/ml ± 5 %
Dichte	1,05 g/cm³
Gleichmäßig	CV von 3%
Zusatzstoffe	0,05% tween-20 Dispersionsmittel / Oberflächenaktiv, 2mM Konservierungsmittel

Hinweise

1. Nicht einfrieren.
2, vor der Verwendung der Ultraschallschockung 10S Effekt zuijia.

Forschungsbereiche
Forschungsbereiche	Drug EntdeckungKleinmolekulares MedikamentBlei Compound Entdeckung

Absolute Zählung von MikrokugelnHinweis: Dieses Produkt wird nur für wissenschaftliche Studien verwendet und unterstützt keine klinischen Studien.

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