CTF-LTM 2D Fluoreszenzzellenvitalitätstest Kit

Es gibt eine Vielzahl von Methoden zur Erkennung der Zellvitalität, wie zum Beispiel die Erkennung der Exklusion von Farbstoffen, Änderungen der ATP-Konzentration, Änderungen der Enzymaktivität usw. Die Zelldetektion erfordert manchmal eine mechanische Untersuchung der Zytotoxizität und / oder die Einrichtung einer internen Kontrolle, wodurch die Anforderungen an eine Multiplex-Analyse entstehen, d. h. die gleiche Probe wird mit mehreren Analysemethoden getestet, wobei die Mechanismen der Untersuchung unterschiedlich sind und sich nicht untereinander stören, so dass es möglich ist, die Mechanismen der Zytotoxizität aufzudecken oder Systemunterschiede auszuschließen. Ausländische CellTiter Fluor (CTF) Produkte basieren auf diesem Prinzip. Das Unternehmen hat eigene Forschung entwickelt und ein ähnliches Fluorescent Cell Viability Assay Kit (Fluorescent Cell Viability Assay Kit) eingeführt, dessen Leistung keinen deutlichen Unterschied zu ausländischen Markenprodukten aufweist. Dieses Produkt basiert auf der Abbau von Protease in lebenden Zellen auf Polypeptid-Fluoreszenzgruppen-Substrat-Produkte, um Fluoreszenzsignale zu erzeugen. Wenn die Integrität der Zellmembran beeinträchtigt ist, verliert das Protease die abbaubare Aktivität des Substrats und erzeugt kein Fluoreszenzsignal. CTF-LTMIm Gegensatz zum Prüfprinzip der Fluorescenase-Kit ist die Detektionsmethode auch anders, ihre Detektionsempfindlichkeit ist zweiter als die Fluorescenase-Methode, aber frühere leichte Zellschäden können erkannt werden, beide Tests sind gut kompatibel und können Multiplex-Tests durchgeführt werden.
Eigenschaften:
1. Leistung
Signale erkennen, Window， Die Empfindlichkeit und Spezifizität sind ähnlich wie ähnliche Produkte ausländischer Marken.
2、 相容性
Kompatibel mit gängigen Analysemitteln wie CTG, ohne gegenseitige Auswirkungen.
3. Eigenschaften
Empfindlicher für frühe Zellmembranschäden.
4, bequem
"Hinzufügen - Mischung - Testen", der gesamte experimentelle Schritt ist einfach und einfach zu bedienen.
Produktzusammensetzung:
Protease-Substrat, nach der Mischung des Puffers in braunen Flaschen von 10 ml oder 100 ml und in 2 ml-Röhren gefüllt, wie folgt:

1. Vorbereitung der Zellen:
(1) Legen Sie die zu erkennenden Zellen in 96-Loch oder 384-Loch Zellkulturplatten mit einer geeigneten Dichte. Es wird empfohlen, schwarze Tafeln zu verwenden (z. B. in Kombination mit Leuchtmitteln können weiße Tafeln ausgewählt werden).
(2) Vorbereitung der Verbindungen zur Prüfung. Fügen Sie eine geeignete Konzentration der zu erkennenden Verbindungen in die Zellplatte. Die Konzentration des organischen Lösungsmittels in der Kulturflüssigkeit bleibt unter 1 bis 2%. Erstellen Sie eine Kontrollgruppe von nicht zugesetzten Verbindungen. Weitere Ausbildung der richtigen Zeit entsprechend den Projektanforderungen.
2. Testen der Zellen:
Entfernen Sie CTF-LTMNach der vollständigen Auflösung des Zellvitalitätstests-Reagents wird der CTF-Puffer auf Raumtemperatur ausgeglichen. Die CTF-Substrat-Wirbelschwillung vermischt den C-Boden und sammelt sofort das CTF-Substrat auf den Rohrboden.
(2) Zubereitung von CTF-Reaktionslösung: CTF-Substrat ist 100x, je nach der Menge mit CTF-Puffer 1x-Reaktionslösung zugeordnet, vollständig vermischt.
(3) Entfernen Sie die zu testende Zellkulturplatte und fügen Sie jedem Loch ein gleiches Volumen an CTF-Reaktionslösung hinzu, zum Beispiel 100 μl Kulturflüssigkeit zu 100 μl 1x CTF-Reaktionslösung.
(4) Niedrige Geschwindigkeit Schwingplatte 20 Sekunden vermischt, Lichtschutz 37 ℃ Reaktion nach 60 Minuten zur Fluoreszenz-Detektion. Unterschiedliche Zellen schneiden CTF-Substrate unterschiedlich schnell, und die optimale Lesezeit muss je nach Zelle optimiert werden. Die Platte kann spätestens 30 Minuten nach der Zugabe des Reagents gelesen werden. In der Regel ist das Signal-Rausch-Verhältnis höher nach 60 Minuten oder länger. Es wird empfohlen, dass die Lesezeit nicht länger als 3 Stunden ist.
(5) Lesen Sie das Fluoreszenzsignal auf dem Fluoreszenzplattenleser, stimulieren Sie das Licht Ex 380-400 nm und emittieren Sie Licht Em 505 nm.
(6) Weitere nachgelagerte Multiple-Analysen, wie z.B. Caspases 3/7 Apoptose-Tests, nach Bedarf durchführen.

Nach der ersten Verwendung wird empfohlen, den Substrat auf -20 ° C zu verteilen und die Reaktionsflüssigkeit jedes Mal frisch herzustellen.
2, ohne strenge Überprüfung, wird keine beliebige Änderung der Reaktionsmitteldosis empfohlen.

-20 ° C und unter Lichtschutz, Gültigkeitsdauer von 12 Monaten.