Spezifikationen menschlicher Lungenmikrovaskulärer Endotelzellen

Grundeigenschaften der Zelle

Quelle: Lungengewebe

Herkunft: Mensch

Zellen Einführung:Menschliche Lungenmikrovaskuläre EndotelzellenIsolierung von Lungengewebe; Die Lunge ist das Atemorgan des Körpers, das sich in der Brust befindet, links und rechts, oberhalb des Herzens bedeckt. Die Lunge hat fünf Blätter, zwei links und drei rechts. Das Lungen-Lungensystem (bezieht sich auf die Atemrohre, Bronchen usw.) ist mit der Kehle und der Nase verbunden, daher wird die Kehle als das Tor der Lunge bezeichnet und die Nase als das außere Tor der Lunge. Mikrovaskuläre Endotelzellen sind eng an einer Reihe physiologischer und entzündlicher Reaktionen beteiligt, darunter Regeneration, Entwicklung und Wundheilung. Die Zellen sind schiebelförmig oder mehreckig, nach der Bildung einer Schicht sind sie kieselsteinartig oder asfaltsteinartig angeordnet. Lungenmikrovaskuläre Endotelzellen bilden eine semiselektive Barriere, die für den Austausch von Lungengasen und die Regulierung des Flusses von Flüssigkeiten und löslichen Lösungen zwischen Blut und Lungenmittel wichtig ist.

Verpackungsbedingungen: PLL (0,1 mg / ml), Gelatine (0,1%)

Kulturmedium: Enthält FBS, Wachstumsadditive, Penicillin, Streptomycin usw.

Frequenz des Wechsels: alle 2-3 Tage

Wachstumsmerkmale: Wandkleber

Zellmorma: Endotelzellart

Eigenschaften: 2-3 Generationen übertragen

Verhältnis: 1:2

Verdauungsflüssigkeit: 0,25%

Kulturbedingungen Gasphase: Luft, 95%; CO2，5%

II. Zellkulturzustand

Zellelektronische Fotos beim Versand senden

III. Verwendung

Menschliche Lungenmikrovaskuläre EndotelzellenEs ist eine klebende Zelle, die Zellmorm ist endotelial-ähnlich, unter dem Standard-Betriebsprozess des Technologieministeriums können die Zellen 2-3 Generationen übertragen werden; Es wird empfohlen, so schnell wie möglich nach Erhalt der Zellen entsprechende Experimente durchzuführen.

Wenn der Kunde die Zelle erhalten hat, befolgen Sie bitte die folgenden Methoden.

Entfernen Sie die T25-Zellkulturflasche, desinfizieren Sie den Flaschenkörper mit 75% Alkohol, entfernen Sie die Mundhülle und legen Sie sie 3-4 Stunden in eine Zellkulturflasche mit 37 ° C, 5% CO2 und gesättigter Feuchtigkeit, um den Zellzustand zu stabilisieren.

2. Wandzellverdauung

1) Absaugen Sie das Medium aus der T25-Zellkulturflasche und waschen Sie die Zellen einmal mit PBS;

2) fügen Sie 0,25% Verdauungsflüssigkeit 1mL in die T25-Kulturflasche hinzu, drehen Sie die Kulturflasche leicht, um die Verdauungsflüssigkeit, die den gesamten Boden der Kulturflasche abdeckt, und saugen Sie die überschüssige Verdauungsflüssigkeit aus, 37 ° C-Bad 1-3 min; Beobachtet unter umgekehrtem Mikroskop, bis die Zellen zurückziehen, um zu kreisen, dann 5 ml Medium hinzufügen, um die Verdauung zu beenden;

3) Mischen Sie sanft mit einer Sauge, impfen Sie die T25-Kulturflasche nach dem Übertragungsverhältnis und fügen Sie das frische Medium auf 5 ml hinzu und setzen Sie es in einer Zellkultur mit 37 ° C, 5% CO2 und gesättigter Feuchtigkeit;

4) nach dem Aufkleben der Zellen, Kulturbeobachtung; Anschließend wird das frische Medium entsprechend der Frequenz des Wechsels ersetzt.

3. Zellen entfallen

1) Sammeln Sie alle Zellsuspension, 1000rpm, Zentrifuge 5min, Aufbewahrung der Niederlage;

2) 0,25% Verdauungsflüssigkeit 0,5 ml in das Zentrifugerrohr hinzufügen, die Fällung wieder suspendieren und bei 37 ° C verdauen 3 min (oder 4 ° C Kühlschrank 5-7 min); 5 ml Medium zur Beendigung der Verdauung im Zentrifugerrohr;

3) nach 1000 Umdrehungen pro Minute, Zentrifugieren 5min, werfen Sie das Oberwasser, suspendieren Sie mit 5ml Kulturmedium und impfen Sie in einer neuen Kulturflasche;

4) nach dem Aufkleben der Zellen, Kulturbeobachtung; Anschließend wird das frische Medium (37 ° C Vorwärmung) entsprechend der Flüssigkeitsaustauschfrequenz ersetzt.

5) Die Wandzellen in der ursprünglichen Flasche werden nach der normalen Verdauung behandelt.

4. Zellversuche

Aufgrund der Spezialität der Originalzellkleber müssen die Originalzellen nach der Verdauung auf andere Experimentsgeräte (wie Glas-Reptilien, Kulturplatten, Kofokuss-Petrischalen usw.) übertragen werden, um das Experimentsgerät zu verpacken, um die Zellklebigkeit zu verbessern und zu vermeiden, dass die Zellen das Experiment nicht gut beeinflussen; Pakete werden häufig mit Mausschwanzkollagen I (2-5 μg / cm2), Polylysin PLL (0,1 mg / ml), Gelatine (0,1%) abhängig von der Zelltyp gewählt. Suspendierte / halbsuspendierte Zellen müssen nicht verpackt werden.

IV. Hinweise

1. Kultivierung basierend auf 4 ° C kann 3-6 Monate aufbewahrt werden.

2. Achten Sie während der Zellkultur darauf, dass Sie steril arbeiten.

3. Die Verdauungszeit sollte nicht zu lang sein, sonst wird es die Zellwand und ihren Wachstumszustand beeinflussen.

4. empfiehlt dem Kunden, in den ersten 3 Tagen nach Erhalt der Zelle mehrere Zellfotos zu machen, um den Zellstand aufzuzeichnen und die Kommunikation mit der Technik zu erleichtern; Aufgrund des Transports können einzelne empfindliche Zellen instabil sein, kontaktieren Sie uns bitte rechtzeitig und informieren Sie uns über die spezifische Situation der Zelle, damit unsere Techniker nachverfolgen und zurückkehren können, bis das Problem gelöst ist.

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