Lachsembryonale Zellen; CHSE-214

Lachsembryonale Zellen; Die CHSE-214-Basis wurde vom Team sorgfältig optimiert und nach langen Tests erhält dieses Produkt einen ausgezeichneten Wachstumszustand für die ursprünglichen Lungenmakrophagen von Ratten.

Dieses Produkt enthält bereits eine Vielzahl von Zutaten, die für das Wachstum von Lungenmakrophagen von Ratten erforderlich sind, ohne Zutaten hinzuzufügen und kann direkt für die Kultivierung von Lungenmakrophagen von Ratten verwendet werden.

Hinweise

Nur für wissenschaftliche Zwecke.

Einige Komponenten des Kultursystems sind für die menschliche Gesundheit schädliche Substanzen, bitte berühren Sie nicht die Flüssigkeit des Kultursystems und das Innere des Behälters mit Flüssigkeitsresten des Kultursystems mit der exponierten Haut; Dieser Teil der gefährlichen Substanzen ist sowohl konzentriert als auch gefährlich und kann bei Kontakt sofort mit Leitungswasser gespült werden.

Wiederbelebung

1) das Wasser in der thermostatischen Badewanne auf 37 ° C vorwärmen;

2) Vorbereiten Sie ein 15 ml Zentrifugerrohr, fügen Sie 5 ml des Mediums, das 10% FBS enthält, und geben Sie es in eine 37 ° C Wasserwanne vorwärmt;

3) Tragen Sie eine Schutzbrille auf, nach dicken Haarhandschuhen, entfernen Sie die Zellen aus dem flüssigen Stickstoff-Tank, um sich zu erholen, so schnell wie möglich in den 37 ° C thermostatischen Wasserbad

Erhärmungsschütteln Gefrierrohr, um die Erhärmungsrate zu erhöhen;

4) Atmen Sie die Zellen aus dem geschmolzenen Gefrierrohr in das vorzubereitete Zentrifugerrohr ein und zentrifugieren Sie nach 1000 Umdrehungen pro Minute für 5 Minuten;

5) Vorbereiten Sie eine T-25-Flasche, schreiben Sie den Zellnamen und das Datum auf und fügen Sie 4 ml Medium hinzu;

6) Nach Abschluss der Zentrifugation entfernen Sie das Oberwasser, suspendieren Sie die Zellen mit 1 ml Medium, übertragen Sie sie in die T-25-Zellkultur und mischen Sie sie in

CO2-Kultivierung in einer Kultivierungskammer.

Übertragung (Zell-Übertragung empfohlen 1-2)

1) Wenn die zelluläre Konvergenz über 85% erreicht, kann die Vermehrung durchgeführt werden.

2) Öffnen Sie die Kultivflaschenmünde im Biosicherheitsschrank und sammeln Sie das Kultivmedium in der Flasche;

3) 3 ml sterile 1 x PBS in die Kulturflasche hinzugefügt, die Kulturflasche horizontal platziert, so dass PBS in den gesamten Bereich auf dem Boden der Kulturflasche eindringen und PBS absaugen kann;

4) Fügen Sie 1 ml Verdauungsflüssigkeit in die Flasche hinzu und inkubieren Sie 1 ~ 2 min in einer 37 ° C CO2-Kulturkammer, nachdem Sie den Boden eingedrungen haben;

5) beobachten, ob die Zellen nach Inkubation unter dem umgekehrten Mikroskop runden und schweben, wenn alle verdaut werden, fügen Sie 2 ml des Mediums mit 10% FBS direkt in die Kulturflasche hinzu und inhalieren Sie die Suspension in eine 15 ml Zentrifuge;

① Vorbereiten Sie eine sterile 15 ml Zentrifuge und fügen Sie 2 ml des Mediums mit 10% FBS hinzu;

② Neutralisieren Sie die verdauten Zellen in einem Zentrifugerrohr in ① (vermeiden Sie das Blasen ②②); Fügen Sie 1 ml in die zuvor verdaute Kulturflasche hinzu, um die Verdauung für etwa 2 min fortzusetzen, schlagen Sie auf die Kulturflasche, um etwa 95% der Zellen zu entfernen.

6) 1000rpm Zentrifuge 5min;

7) Bereiten Sie zwei neue T-25-Flaschen vor, die jeweils mit 4 ml Medium hinzugefügt werden.

8) Nach Abschluss der Zentrifugierung, die Reinigung zu entfernen, die Zentrifugierung Zellen mit 2 ml Medium wieder suspendieren, die Zellen nach der Wiedersuspension in 2 T-25-Kulturflaschen mit jeweils 1 ml übertragen;

9) Horizontal die Kulturflasche platzieren, nach der Erschütterung und Mischung, die Kulturflasche auf 37 ° C, 5% CO2 in einer Kulturkammer zu setzen.

Gefrieren (Zellfrieren empfiehlt eine Flasche T25 gefriert)

1) bis 6) Übertragungsschritte

7) nach Abschluss der Zentrifugation, die Reinigung abzugeben, die Zellen mit 1 ml Gefrierflüssigkeit wieder zu suspendieren und dann in 1,8 ml Gefrierrohr zu übertragen;

8) Übertragen Sie das Gefrierrohr in eine mit Isopropanol gefüllte Prozesskühlbox und übernachten Sie in einen -80 ° C-Kühlschrank;

9) Am nächsten Tag nehmen Sie das Gefrierrohr aus der Sequenzkühlbox ab, die abgekühlt ist, und übertragen Sie es so schnell wie möglich in einen flüssigen Stickstofftank.

Rezeptoren für spät glykoxylierte Endprodukte(Alter)Rekombiniertes ProteinRecombinant Advanced Glycosylation Endproduktspezifischer Rezeptor (AGER)

EPCAM Protein MenschUmstrukturierenEpCAM / TROP-1 / TACSTD1Protein

NRP1UmstrukturierenNeuropilin-1 / NRP1ProteinFcEtikett(Protein)

HA-Protein H1N1Restrukturieren Sie Grippe AH1N1 (A/WSN/1933)BlutglötenHA1 (Hämagglutinin)Protein

TunUmstrukturierenLALBA / Alpha-LactalbuminProteinFcEtikett(Protein)

Makrophagen-Kollonien-Stimulatoren bei Ratten(GMCSF/CSF2)Reagenzkist Englischer Name:GMCSF/CSF2 ELISA Kit

Maus Keratinozyten Aokrin Faktor (KAF) ELISA Kit / Amphiregulin (AR) ELISA KitEndokrine Faktoren von Mäusen(KAF)Reagenzkist/Doppelmodulares Protein(AR)Reagenzkist

Mausmorphogenetische Proteine, BMPsELISAKitMaus Knochen bilden Protein(BMP)Reagenzkist96T/48TImportaufteilung

CLIAKitforHumanpaxillin, PaxELISAKitMenschliches Protein

Isotope[γ32P]ATPKinase-markierte Mikrosatelliten-Verstärkung-Kit20Nächster

ELISAKitPIAb-IgG/IgMRatten0AntikörperIgG und IgM

Mäuse Transenzyme-Kit Mäuse Transenzyme-Kit Spezifikationen:96T/48T Transfase-Kit für Mäuse, Spezifikationsmodell:96T/48TQuelle: Kit (Importaufteilung), Produktalias: Maus-Transfase-Kit, Maus-TransfaseeisaReagenzkist Aufbewahrungsbedingungen:2-8℃ Haltbarkeitsdauer:6Monat.

Transferase-Kit auf Mausbasis Transferase-Kit auf Mausbasis Spezifikationen:96T/48T Transferase-Kit auf Mausbasis, Spezifikationsmodell:96T/48TQuelle: Kit (Importaufteilung), Produktalias: Transferase-Kit auf Mausbasis, Transferase auf MausbasiseisaReagenzkist Aufbewahrungsbedingungen:2-8℃ Haltbarkeitsdauer:6Monat.

Maus Epidermis Wachstumsfaktor Kit Maus Epidermis Wachstumsfaktor Kit Spezifikationen:96T/48T Epidermale Wachstumsfaktor-Kit für Mäuse, Spezifikationsmodell:96T/48TQuelle: Kit (Importaufteilung), Produktalias: Epidermal-Wachstumsfaktor-Kit für Mäuse, Epidermal-Wachstumsfaktor für MäuseeisaReagenzkist Aufbewahrungsbedingungen:2-8℃ Haltbarkeitsdauer:6Monat.

Mouse Rod Bacteria Reagentkit Mouse Rod Bacteria Reagentkit Spezifikationen:96T/48T Mouse Rod Bacteria Kit, Spezifikationsmodell:96T/48TQuelle: Reaktionskitte (Importaufteilung), Produktalias: Mouse Rod Bacteria Reaktionskitte, Mouse Rod BacteriaeisaReagenzkist Aufbewahrungsbedingungen:2-8℃ Haltbarkeitsdauer:6Monat.

Zuckerkinase bei Mäusen(HK)ELISAReagenzkist96T/48T

Human Sorbitol Dehydrogenase (SDH) ELISA KitMenschliche Dehydrogenase(SDH)Reagenzkist

HumanDNABindierendes Protein, DBPELISAKitMenschDie DNABindungsproteine(DBP)Reagenzkist96T/48TImportaufteilung

HumanAi-Glukoprotein210, GP210Humanes Antinukleomembranglykoprotein210Antikörper(gp210)Spezifikationen des Reagenzkists:96T/48T

Pflanzenhidroxylase(Lysylhydroxylase)Aktivfarbvergleich Quantifizierungskit20Nächster

HumanVitamin A，VaelisattraktionMenschA(VA)Spezifikationen des Reagenzkists:96T/48T

PSubstanz Antikörper

Verbinden von Haftmolekülen2Antikörper

Lachsembryonale Zellen; CHSE-214NRP1UmstrukturierenNeuropilin-1 / NRP1ProteinFcEtikett(Protein)

Rezeptoren für spät glykoxylierte Endprodukte(Alter)Rekombiniertes ProteinRecombinant Advanced Glycosylation Endproduktspezifischer Rezeptor (AGER)

TunUmstrukturierenLALBA / Alpha-LactalbuminProteinFcEtikett(Protein)

EPCAM Protein MenschUmstrukturierenEpCAM / TROP-1 / TACSTD1Protein

HA-Protein H1N1Restrukturieren Sie Grippe AH1N1 (A/WSN/1933)BlutglötenHA1 (Hämagglutinin)Protein

Sterile Operation:Die Zellkultur muss in einer sterilen Umgebung durchgeführt werden, vor der Verwendung der ultravioletten Sterilisation des ultrareinen Arbeitstischs und regelmäßiger Reinigung der Kultivkammer. Die Experimentierenden müssen Arbeitskleidung, Schuhhüllen, Masken und Handschuhe austauschen.

Sterilisation der Ausrüstung:Glasgeräte, Metallgeräte usw. können mit Hochdruckdampf sterilisiert werden, Kunststoffprodukte wählen eher die Ethanoxidsterilisierung oder den Kauf sterilisierter Produkte.

Auswahl des Reagents:Die verwendeten Kulturflüssigkeiten, Seren, Puffer und andere Reagentien sollten steril und frei von Verschmutzung sein, vor der Verwendung müssen sterile Tests durchgeführt werden. Unterschiedliche Zellen haben unterschiedliche Anforderungen an die Zusammensetzung der Kulturflüssigkeit, die geeignete Kulturflüssigkeit sollte je nach Zelltyp ausgewählt werden.

Aufbaubedingungen:Die meisten Säugetierzellen sind geeignet, bei 37 ° C zu kultivieren, und die Abweichung sollte bei ± 0,5 ° C kontrolliert werden. Die Zellkultur sollte gut dicht bleiben, regelmäßig die Gaskonzentration und den Durchfluss überprüfen, und die Zellkultur benötigt in der Regel 5% CO2, um den pH-Wert der Kulturflüssigkeit stabil zu halten. Die Feuchtigkeit in der Anlage sollte bei etwa 95% bleiben.

‌Tägliche Beobachtung:Die Veränderungen der Zellmorm, des Wachstumszustands und der Farbe der Kulturflüssigkeit werden täglich unter dem Mikroskop beobachtet.

Regelmäßige Prüfung:Regelmäßig werden die Zellen von Branchen, Bakterien, Pilzen und anderen Verunreinigungen untersucht.