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SW 1990 Zellspezifisches Kulturmedium (L15)

VerhandlungsfähigAktualisieren am05/06
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Übersicht

SW 1990 Related Products for Cell-Specific Medium (L15): Human Bronchial Epithelial Cells Humane Esophageal Epithelial Cells JAR #160; Zellspezifisches Medium Humane Primäre Esophageal Fibromzellen U-2 OS Humane Osteotrophische Sarkom Zellen Spezifisches Medium Humane Primäre Retina Muller Zellen COLO205 Zellen Spezifisches Medium Humane Primäre Retina Chromatoepithelial Zellen NCI-H3122 Humaner Nicht-Kleiner Lungenkrebs Zellen Spezifisches Medium Humane Primäre Retina Mikrovaskuläre Endotelzellen

Produktdetails

Eigenschaften des Produktes:

Produktname

Spezifikation

Produktform

SW 1990 Zellspezifisches Kulturmedium (L15)

125ml × 4

Flüssigkeit

Produktbeschreibung:

Sorgfällig von dem technischen Team optimiert, nach langfristigen Tests kann dieses Produkt erhalten werdenSW 1990 Zellen mit optimalem Wachstumszustand. Dieses Produkt enthält bereits verschiedene Zutaten, die für das Wachstum von SW 1990-Zellen erforderlich sind, ohne Zutaten hinzuzufügen und kann direkt für die in vitro Kultivierung von SW 1990-Zellen verwendet werden. Dieses Produkt ist ausschließlich für weitere wissenschaftliche Zwecke bestimmt und darf nicht für diagnostische, therapeutische, klinische, häusliche oder andere Zwecke verwendet werden.

Produktbeschreibung

Produktform: Flüssigkeit

Produktkonzentration:1×

Produktspezifikation: 125ml × 4

Zutaten des Kulturmediums:Leibovitzs L-15+10% FBS+1% P/S

BakterientestNegativ:

PilzdetektionNegativ:

BranchenprüfungNegativ:

ZellwachstumsexperimenteDie Zellen wachsen gut und sind normal

Endotoxingehalt(EU/mL): ≤3

Lagerbedingungen2 ~ 8 ° C, Lichtschutz

TransportbedingungenEisbeutel Kühltransport

Gültigkeitsdauer3 Monate

1.png

Versuchsbericht:

Trennung und Kultivierung:

Immunfluorescenzprüfung:


1, unter sterilen Bedingungen, entfernen Sie das atriale Gewebe von Ratten im Alter von 1-3d SD, und waschen Sie diesen Gewebeblock zweimal mit PBS, und am Ende wird es etwa 1mm3 groß sein;
4 ml Enzymverdauung (0,1% und 0,1% Kollagen Typ I) in den Gewebeblöcken hinzufügen, 10s vermischen, 10 min unter 37 ° C verdauen lassen, anschließend mit einem Tropfenschlag zu einer Einzelzellsuspension geblasen, natürlich ausfällen und das Klar sammeln, nach 4 ° C mit 10% FBS-Medium zur Beendigung der Verdauung platziert;
3, das restliche Gewebe 3 bis 4 ml enzymatische Verdauungslösung hinzufügen, 10s mischen, 37 ° C nach 10 min Verdauung setzen, nach der oben genannten Methode sammeln und 4 ° C nach der Verdauung beenden, wiederholen Sie diesen Schritt 2-3 Mal, bis das Gewebe verdaut wird;
4, mit 200 Mesh Edelstahl Sieb Filter Zell Verdauungsflüssigkeit, 1200r / min Zentrifuge 10min, entfernen Sie die obere Reinigung, sedimentierte Zellen mit einem 10% FBS DMEM / F12-Medium gemischt, in einer 25cm2-Kulturflasche impft, in 37 ° C, 5% CO2-Kultivkammer platziert;
5, nach 1 Stunde der Differenz-Klebung, saugen Sie das Medium aus und impfen Sie in einer 6-Loch-Platte nach den experimentellen Bedürfnissen, um die Kultur fortzusetzen;

1, warten Sie auf das Wachstum der atrialen Muskelzellen auf 80% Fusion, entfernen Sie das Medium, spülen Sie die Zellen zweimal mit PBS, je 10 Minuten, und fixieren Sie die Zellen mit 4% Polyformaldehyde bei Raumtemperatur für 15 Minuten;
Spülen Sie die Zellen mit PBS zweimal, jeweils 10 min, und dann mit 0,1% Triton X-100-Membran für 15 min unter 4 ° C-Bedingungen;
Spülen Sie die Zellen mit PBS zweimal, jeweils 10 Minuten, und schließen Sie die Zellen mit 4% BSA für 30 Minuten bei Raumtemperatur;
Verdünnen Sie alpha-Actin im Verhältnis von 1: 100 und legen Sie es dann über Nacht in einem 4 ° C Kühlschrank, um die Zellen zu inkubieren;
5, PBS spülen Sie die Zellen dreimal, jeweils 10 min, verdünnen Sie die Anti-α-Aktin-Resistenz im Verhältnis von 1: 150, 1 h unter 37 ° C;
Spülen Sie 3 Mal mit PBS, jeweils 10 Minuten, und beobachten Sie schließlich das Bild unter dem umgekehrten Fluoreszenzmikroskop und fotografieren Sie es.

Betriebsprozess:
Vorbereitung von Kulturmitteln und Kultureinfrierungsbedingungen:
1) Vorbereitung des RPMI-1640-Mediums, 90%; Hochwertiges Rinderserum, 10%.
2) Kulturbedingungen: Gasphase: Luft, 95%; Kohlendioxid, 5 Prozent. Temperatur: 37 ° C, die Luftfeuchtigkeit im Ausbauraum beträgt 70% -80%.
3) Gefrierflüssigkeit: 90% Serum, 10% DMSO, jetzt verfügbar, flüssiger Stickstoff speichert.
2. Zellbehandlung:
1) Erholungszellen: Einfrierrohr mit 1 ml Zellsuspension schnell in ein 37 ° C-Wasserbad (die Oberfläche ist unterhalb des Gefrierrohrdeckels) schütteln, auftauen und in ein 15 ml Zentrifugerrohr mit 4 ml Medium, das zuvor vorbereitet ist, gleichmäßig mischen. Zentrifugieren Sie bei 1000 RPM für 4 Minuten, entfernen Sie die Oberflüssigkeit und blasen Sie nach Zugabe von 1 ml Medium. Alle Zellsuspensionen werden dann über Nacht in eine Kulturflasche mit 5 ml Medium kultiviert. Am nächsten Tag wechseln und die Zelldichte prüfen.
2) Zelltransplantation: Wenn die Zelldichte 80% -90% beträgt, kann eine Zelltransplantation durchgeführt werden.
Für suspendierte Zellen kann die Übertragung auf die folgenden Methoden verweisen:
Methode 1: Sammeln von Zellen1000RPM, Zentrifugieren Sie 5 Minuten unter normalen Temperaturbedingungen, entfernen Sie die Oberflüssigkeit, fügen Sie 1-2 ml Kultur hinzu und blasen Sie die Zellsuspension im Verhältnis von 1: 2 bis 1: 5 in eine neue Schale mit 8 ml Medium oder in eine Flasche.
Produkte des Unternehmens nur für wissenschaftliche Zwecke

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