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INS-1 Zell-spezifisches Medium

VerhandlungsfähigAktualisieren am05/06

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Natur des Herstellers: Hersteller

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Produktdetails

Eigenschaften des Produktes:

Produktname	Spezifikation	Produktform
INS-1 Zell-spezifisches Medium	125ml × 4	Flüssigkeit

Produktbeschreibung:

Sorgfällig von dem technischen Team optimiert, nach langfristigen Tests kann dieses Produkt erhalten werdenDer optimale Wachstumszustand der INS-1-Zellen. Dieses Produkt enthält bereits eine Vielzahl von Zutaten, die für das Wachstum von INS-1-Zellen erforderlich sind, ohne Zutaten hinzuzufügen und kann direkt für die in vitro Kultivierung von INS-1-Zellen verwendet werden. Dieses Produkt ist ausschließlich für weitere wissenschaftliche Zwecke bestimmt und darf nicht für diagnostische, therapeutische, klinische, häusliche oder andere Zwecke verwendet werden.

Produktbeschreibung

Produktform: Flüssigkeit

Produktkonzentration:1×

Produktspezifikation: 125ml × 4

Zutaten des KulturmediumsRPMI-1640 + 10% FBS + 50 μmol / L β-Mercaptoethanol + 1% P / S

BakterientestNegativ:

PilzdetektionNegativ:

BranchenprüfungNegativ:

ZellwachstumsexperimenteDie Zellen wachsen gut und sind normal

Endotoxingehalt(EU/mL): ≤3

Lagerbedingungen2 ~ 8 ° C, Lichtschutz

TransportbedingungenEisbeutel Kühltransport

Gültigkeitsdauer3 Monate

Versuchsbericht:

Trennung und Kultivierung:

Immunfluorescenzprüfung:

1, unter sterilen Bedingungen, entfernen Sie das atriale Gewebe von Ratten im Alter von 1-3d SD, und waschen Sie diesen Gewebeblock zweimal mit PBS, und am Ende wird es etwa 1mm3 groß sein;
4 ml Enzymverdauung (0,1% und 0,1% Kollagen Typ I) in den Gewebeblöcken hinzufügen, 10s vermischen, 10 min unter 37 ° C verdauen lassen, anschließend mit einem Tropfenschlag zu einer Einzelzellsuspension geblasen, natürlich ausfällen und das Klar sammeln, nach 4 ° C mit 10% FBS-Medium zur Beendigung der Verdauung platziert;
3, das restliche Gewebe 3 bis 4 ml enzymatische Verdauungslösung hinzufügen, 10s mischen, 37 ° C nach 10 min Verdauung setzen, nach der oben genannten Methode sammeln und 4 ° C nach der Verdauung beenden, wiederholen Sie diesen Schritt 2-3 Mal, bis das Gewebe verdaut wird;
4, mit 200 Mesh Edelstahl Sieb Filter Zell Verdauungsflüssigkeit, 1200r / min Zentrifuge 10min, entfernen Sie die obere Reinigung, sedimentierte Zellen mit einem 10% FBS DMEM / F12-Medium gemischt, in einer 25cm2-Kulturflasche impft, in 37 ° C, 5% CO2-Kultivkammer platziert;
5, nach 1 Stunde der Differenz-Klebung, saugen Sie das Medium aus und impfen Sie in einer 6-Loch-Platte nach den experimentellen Bedürfnissen, um die Kultur fortzusetzen;

1, warten Sie auf das Wachstum der atrialen Muskelzellen auf 80% Fusion, entfernen Sie das Medium, spülen Sie die Zellen zweimal mit PBS, je 10 Minuten, und fixieren Sie die Zellen mit 4% Polyformaldehyde bei Raumtemperatur für 15 Minuten;
Spülen Sie die Zellen mit PBS zweimal, jeweils 10 min, und dann mit 0,1% Triton X-100-Membran für 15 min unter 4 ° C-Bedingungen;
Spülen Sie die Zellen mit PBS zweimal, jeweils 10 Minuten, und schließen Sie die Zellen mit 4% BSA für 30 Minuten bei Raumtemperatur;
Verdünnen Sie alpha-Actin im Verhältnis von 1: 100 und legen Sie es dann über Nacht in einem 4 ° C Kühlschrank, um die Zellen zu inkubieren;
5, PBS spülen Sie die Zellen dreimal, jeweils 10 min, verdünnen Sie die Anti-α-Aktin-Resistenz im Verhältnis von 1: 150, 1 h unter 37 ° C;
Spülen Sie 3 Mal mit PBS, jeweils 10 Minuten, und beobachten Sie schließlich das Bild unter dem umgekehrten Fluoreszenzmikroskop und fotografieren Sie es.

Betriebsprozess:
Vorbereitung von Kulturmitteln und Kultureinfrierungsbedingungen:
1) Vorbereitung des RPMI-1640-Mediums, 90%; Hochwertiges Rinderserum, 10%.
2) Kulturbedingungen: Gasphase: Luft, 95%; Kohlendioxid, 5 Prozent. Temperatur: 37 ° C, die Luftfeuchtigkeit im Ausbauraum beträgt 70% -80%.
3) Gefrierflüssigkeit: 90% Serum, 10% DMSO, jetzt verfügbar, flüssiger Stickstoff speichert.
2. Zellbehandlung:
1) Erholungszellen: Einfrierrohr mit 1 ml Zellsuspension schnell in ein 37 ° C-Wasserbad (die Oberfläche ist unterhalb des Gefrierrohrdeckels) schütteln, auftauen und in ein 15 ml Zentrifugerrohr mit 4 ml Medium, das zuvor vorbereitet ist, gleichmäßig mischen. Zentrifugieren Sie bei 1000 RPM für 4 Minuten, entfernen Sie die Oberflüssigkeit und blasen Sie nach Zugabe von 1 ml Medium. Alle Zellsuspensionen werden dann über Nacht in eine Kulturflasche mit 5 ml Medium kultiviert. Am nächsten Tag wechseln und die Zelldichte prüfen.
2) Zelltransplantation: Wenn die Zelldichte 80% -90% beträgt, kann eine Zelltransplantation durchgeführt werden.
Für suspendierte Zellen kann die Übertragung auf die folgenden Methoden verweisen:
Methode 1: Sammeln von Zellen1000RPM， Zentrifugieren Sie 5 Minuten unter normalen Temperaturbedingungen, entfernen Sie die Oberflüssigkeit, fügen Sie 1-2 ml Kultur hinzu und blasen Sie die Zellsuspension im Verhältnis von 1: 2 bis 1: 5 in eine neue Schale mit 8 ml Medium oder in eine Flasche.
Produkte des Unternehmens nur für wissenschaftliche Zwecke

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GYPC Antibody Blocking Peptide (GYPC Antikörper blockierendes Peptid)

MGAT5 Antibody Blocking Peptide (MGAT5 Antikörper blockierendes Peptid)

Lrp2 Antibody Blocking Peptide GP330 geschlossenes Polypeptid

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