RNAclean RNA Reinigungskit

PCRWelche Reagenzien und Geräte werden zur Reaktion verwendet?

Reagenzien:
VorlageDie DNA：PCRReaktion braucht VorlageDie DNAEntnommen aus Zellen, Gewebe und Blut.Die DNAwarten; Vorläufer:PCRDie Reaktion der beiden Vorläufer, jeweils mit der VorlageDie DNADas Paaren beider Enden erhöht die spezifischen Gebiete, die erforderlich sind, und die Vorläufer können auch synthetisiert werdenTAVorläufer, die beim Klonen verwendet werden;dNTPs：PCREs sind vier Reaktionen erforderlich.dNTPseinschließlich Deoxyadenoside (dATP(Deoxythymotid)dCTPDesoxy-Vogelpeptide (dGTP(Deoxycytosinsäure)dTTPzur Zellteilung,Die DNABiologische Prozesse wie die SynthesePCRErweiterte VorlagenDie DNAVerlängerung und Erweiterung der Kette;Taq DNAPolymerase:PCRReaktionsbedingte Polymerase, allgemeine VerwendungTaqPolymeren und andere Arten von Polymeren wiePFU、Phusionusw. zur VergrößerungDie DNAKetten;PCR-PufferLösung: JaPCRPuffert die Reaktion, reguliert die ReaktionpH-WertSulfidwasserstoffsalzSDSKleinmolekulare organische Verbindungen wie Formaldehyd können verstärkt werdenPCRReaktionsspezifizität, wodurch die Reaktionseffizienz verbessert wird; Enzymschneidsystem:PCRAmplifikation beinhaltet oft experimentelle Schritte wie Rekonstruktion, Konstruktion und Sequenzierung, die oft eine Enzymschnitt erfordern.Marke:Ein Molekulargewichtsstandard zur UnterscheidungDie DNAWerkzeuge der Stückgröße.Die DNAReinigungskit: zur ReinigungPCRReaktionsprodukte;
Ausrüstung:
PCRInstrument: zur Kontrolle der ReaktionstemperaturPCRStrenge Kontrolle der unterschiedlichen Temperaturen bei der Reaktion; Elektrophoresbecken: zur TrennungPCRErzeugnisse erweitern; Nukleinsäureextraktor: Nukleinsäure wird vollständig automatisch aus Gewebeproben extrahiert. Diese Reagenzien und Geräte sindPCRAlles in der molekularen Biologie ist nur auf einer geordneten Grundlage möglich.PCRReagieren und genaue Ergebnisse erzielen.

Die Produkte des Unternehmens sind ausschließlich zur Forschung bestimmt und dürfen nicht zur klinischen Diagnose verwendet werden!

PCRRelevante grundlegende Experimente:

PCRDie allgemeine Polymerase-Kettenreaktion besteht aus20zu35Jeder Zyklus besteht aus folgenden3Ein Schritt:

1. Transgender:

Die hohe Temperatur (93-98℃Doppelkette machenDie DNATrennung. Die hohe Temperatur verbindet die beidenDie DNADie Wasserstoffbindung der Kette ist unterbrochen. Vor dem ersten Zyklus wird in der Regel länger erhitzt, um sicherzustellen, dass die Schablone und das Vorbild getrennt sind und nur in Einzelkettenform vorhanden sind. Die Zeit der Schritte1-2Eine Minute. Als nächstes.PCRDas Gerät steuert die Temperatur in die Zyklusphase.

II. Brennen oder Verbinden,Wiederholung:

inDie DNANach der Trennung der Doppelkette lässt sich die Temperatur senken, sodass die Vorläufer in eine Einzelkette verbunden werden könnenDie DNAAuf. Die Temperatur in dieser Phase ist in der Regel niedriger als der Primärschmelzpunkt.5℃. Eine falsche Ausbrenntemperatur kann dazu führen, dass die Vorlage nicht oder falsch mit der Vorlage kombiniert wird. Die Zeit der Schritte1-2Minuten.

3. Erweiterung:

Die DNADie Polymerase beginnt entlang des Bindungsprimers beim AbkühlenDie DNAKettensynthese komplementärer Ketten. Die Temperatur in dieser Phase hängt vonDie DNAPolymerase. Die Schrittzeit hängt von der Polymerase und der Notwendigkeit der Synthese ab.Die DNAStücklänge. traditionellTaqSchätzung der Synthese1000 bp / minNeuerTbr(Aus Thermophile Bakterien)Der Thermus brockianus(etwa40Zweitens benötigen kommerzielle Unternehmen nur etwa10-15Sekunden.

Produkte, die das Unternehmen verkauft:Universal Probe Fluoreszenz Quantitative PCR Kit für EntenhepatitisvirusEntenhepatitisvirus (DHV)

Fluoreszenz-Quantifizierungs-PCR-Kit für Entenpest-VirussondeEntenpest-Virus (DPV)

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Fine-grained Spider-worm-Probe-Fluoreszenz-Quantitative-PCR-KitEchinococcus granulosus

Universal Probe Fluoreszenz Quantitative PCR KitEchinococcus spp.

Fluoreszenz Quantitative PCR KitEdwardsiella ictaluri

Quantitative PCR-Kit für Edwards Universal Probe FluoreszenzEdwardsiella spp.

Fluoreszenz-Quantifizierungs-PCR-Kit mit verzögerter Edwards-SondeEdwardsiella tarda

RT-1976 (RT-76) Hühner-Reduktions-Ei-Syndrom-Virus RT-1976 Fluoreszenz-Quantifizierungs-PCR-KitEitropfen-Syndrom-Virus-1976(EDSV-76)-1976

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Fluoreszenz-Quantifizierungs-PCR-Kit mit Schaffy Erich-SondeEhrlichia chaffeensis

Ferguson Erich Sonde Fluoreszenz Quantitative PCR KitEhrlichia fergusonii

Richter-Erichsel-Sonde-Fluoreszenz-Quantitative-PCR-KitEhrlichia risticii

Quantifizierungs-PCR-Kit mit Fluoreszenz-Sonde für Käufer ErichEhrlichia ruminantium

Fluoreszenz-Quantifizierungs-PCR-Kit für die allgemeine Sonde der Erich-GattungEhrlichiae spp.

Fluoreszenz Quantifizierung PCR KitEikenella korrodiert

Universal Probe Fluoreszenz Quantitative PCR KitEimeria spp.

Fluoreszenz-Quantifizierungs-PCR-KitElaeophora schneideri

Imon Microscopic Probe Fluoreszenz Quantitative PCR KitEmmonsia Parva

Intrzelluläre Protogen Universal · Sondenfluoreszenz Quantitative PCR-KitEncephalitozoon spp.

Quantifizierende PCR-Kit mit Amiba-Sonde in gelöstem GewebeEntamoeba histolytica

NeAmiba Universal Probe Fluoreszenz Quantitative PCR KitEntamoeba spp.

Intestinal Adenovirus Typ 41 Fluoreszenz Quantitative PCR KitEnterisches Adenovirus41

Intensive E. coli Sondemethode Fluoreszenz Quantitative PCR KitInvasive E.coli (EIEC)

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Fluoreszenz Quantifizierung PCR KitEnterobacter Aerogenese

Fluoreszenz Quantitative PCR KitEnterobacter cloacae

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Fluoreszenz-Quantifizierungs-PCR-Kit für E. enteriEnterobacter spp.

Blei-Enterococker-Sonde-Fluoreszenz-Quantifizierungs-PCR-KitDer Enterococcus casseliflavus

Dauerhafte Enterococker-Sonde Fluoreszenz-Quantifizierungs-PCR-KitDer Enterococcus durans

Fluoreszenz-Quantifizierungs-PCR-KitDer Enterococcus faecalis

Fluoreszenz-Quantifizierungs-PCR-KitDer Enterococcus faecium

Fluoreszenz-Quantifizierungs-PCR-Kit für Enterococker Universal ProbeEnterococcus spp.

Pigeon-Darm-Mikrosporen-Sonde Fluoreszenz-Quantifizierung PCR-KitEnterocytozoon bieneusi

Fluoreszenz Quantifizierung PCR KitEnterocytozoon hepatopeneei (EHP)

E. coli O104: H4 Serotyp Fluoreszenz-Quantifizierungs-PCR-KitEnterohemorrhagische E. coli (EHEC)

PCROptimierung der Reaktionsbedingungen:

1Temperatur und Zeit der Veränderung:

GarantievorlageDie DNADie Entkettung garantiert die gesamtePCRAusdehnung ist der Schlüssel zum Erfolg. erhitzen90~95°C, 30~60sKomplizierter.Die DNAMoleküle sind auch einkettig variabel. Zu hohe oder zu lange dauernde Temperaturen können korrigiert werdenTaqEnzymaktivität unddNTPMoleküle verursachen Schäden.

2Wiederholte Temperatur und Zeit:

PCRDie Vergrößerungsspezifizität hängt von der Kombination von Primären und Vorlagen während des Reproduktionsprozesses ab. Je höher die Temperatur ist, desto spezifischer ist das Produkt. Je niedriger die Temperatur ist, desto weniger ist die Produktspezifizität. Es muss auf Grundlage der VoraussetzungenTmWerte spezifisch festlegen.

3Temperatur und Zeit verlängern:

In der Regel gelegenTaqOptimale Temperatur des Enzyms70~75°CZwischen. Elemente kleiner als16Wenn ein Nukleotid, eine zu hohe Ausdehnungstemperatur ist nicht förderlich für die Bindung des Primärs und der Schablone, kann langsam erwärmt werden, um70~75°C. Erweiterte Reaktionszeit kann je nach Länge des zu vergrößernden Segments kleiner als1kb, 1minausreichend; größer als1kbDie Verlängerungszeit muss verlängert werden.TaqEnzyme basieren auf1kb/minZeit erhöhen. Es ist hier zu beachten, dass eine zu lange Verlängerung eine nicht spezifische Verstärkung auftreten kann. Daher muss die richtige Verlängerungszeit festgelegt werden.

4Anzahl der Zyklen:

Nach Auswahl der anderen ParameterPCRDie Anzahl der Zyklen hängt hauptsächlich von der Vorlage abDie DNAKonzentration. Theoretisch.20〜25Nach dem nächsten Zyklus,PCRDie Akkumulation des Produkts kann den maximalen Wert erreichen, die Ausbeute in der Praxis aufgrund der Reaktion pro Schritt nicht erreicht werden kann100%Unabhängig von der Konzentration der Schablone,20~30Eine vernünftigere Anzahl von Zyklen. Je mehr Zyklen, desto mehr nicht-spezifische Verstärkung.