Milchsäuredehydrogenase-Aktivität (WST-8-Methode)

Milchsäuredehydrogenase-Aktivität (WST-8-Methode)Bestimmte PrinzipienDurch den Test.LDHKatalyse der Reduktion von Acetonsäure in MilchsäureNADHIndirekte Erzeugung bestimmtLDHAktivitäten.

Der konkrete Prozess ist wie folgt:

Reaktionsprinzip:inLDHunter der Rolle,NAD+Erzeugt wurde wiederhergestelltNADH。NADHundWST-8Die Wechselwirkung erzeugt eine Farbe, wodurch eine farbvergleichende Messung erfolgt (λ).max = 450 nm).

Reaktionsbedingungen:LDHgebenNADZurücksetzen alsNADH，NADHundWST-8Wechselwirkungen erzeugen Farben. Diese Reaktion wird auf Eis durchgeführt, wobei die Komponenten (z.B.Assay-Puffer、Lactat、NAD、WST-8、VerstärkerEs muss vor dem Experiment aus dem Kühlschrank entnommen und auf Raumtemperatur ausgeglichen werden, während der gesamte Prozess mit Lichtschutz betrieben wird.

Absorptionsmessung:in450 nmMessung der Absorption, Absorption undLDHDie Aktivität ist proportional und kann durch Farbvergleich bestimmt werdenLDHAktivitäten.

Experimentelle Schritte und notwendige Ausrüstung:

Experimentelle Schritte:Arbeitsflüssigkeit vorbereiten (1×Assay-Puffer、NAD、WST-8、VerstärkerundLactatGleichmäßig vermischen), Arbeitsflüssigkeit hinzufügen96Bohrplatten oder Spuren Glas Coloring Scheiben, fügen Sie Proben zu testen,37Die Absorption wird nach einer bestimmten Zeit gemessen.

Benötigte Ausrüstung:Enzymmetrie oder sichtbares Spektrophotometer450 nmAbsorption), Thermostat, Eismaschine, Tieftemperaturzentrifuge,96Bohrplatten oder Glasspüren, verstellbare Pipetten und Pistolenkopfe, deionisiertes Wasser, Homogenizer (wenn Gewebeprobe).

Experimentelle Hinweise‌：

Aufbewahrung des Reagents:Komponenten (z.B.Assay-Puffer、Lactat、NAD、WST-8、VerstärkerAuf dem Eis aufbewahren, um wiederholtes Einfrieren zu vermeiden.

Betriebsmaßnahmen:Der gesamte Versuchsprozess muss auf Eis durchgeführt werden, um zu vermeiden, dass das Licht das Ergebnis beeinflusst..

Milchsäuredehydrogenase-Aktivität (WST-8-Methode)Produkte, die das Unternehmen betreibt:

1 x 10^6 Zellen/DurchstechflaschePremenschliche Fettzellen - UnterhautHPAs

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflascheMikrovaskuläre Endotelzellen des menschlichen EierstocksHOMEC

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflascheEpiteliale Zellen der menschlichen OvarieoberflächeHOSEpiC

5 x 10^5 Zellen/Durchstechflaschemenschliche EierstöckenfibrozytenHOF

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflascheInterepitheliale menschliche MatrixzellenHAMSC

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflascheInterepidermale menschliche MatrixzelleHCMSC

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflascheInterhumane KnochenmarkstammzellenHMSC-bm

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflascheInterfette StammzellenHMSC-Ad

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflascheInterhepatische StammzellenHMSC-Hp

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflascheHumane Nabelschnur-StammzellenHUMSC

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflascheMenschliche InterlungenstammzellenHPMSC

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflascheInterspinale StammzellenHVMSC

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflascheMenschliche Brustmikrovaskuläre EndotelzellenHMMEC

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflascheMenschliche BrustepitelzellenHMEpiC

5 x 10^5 Zellen/Durchstechflaschemenschliche BrustfibrozytenHMF

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflascheEndotelzellen der menschlichen NabelveneHUVEC

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflascheEndotelzellen der menschlichen NabelarterieHUAEC

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflascheMenschliche Nabelvenen glatten MuskelzellenHUVSMC

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflascheMenschliche Nabelarterien glatten MuskelzellenHUASMC

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflascheHypophysenzellen von RattenRPC

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflascheMeninginzellen von RattenRMC

1 x 10^6 Zellen/DurchstechflascheGehirnwirbelneuronen von RattenRN-R

1 x 10^6 Zellen/DurchstechflascheRatten KortikalneuronenRN-c

1 x 10^6 Zellen/DurchstechflaschePartikelzellen von RattenRGC

1 x 10^6 Zellen/DurchstechflascheRatten-Hippocampus-NeuronenRN-H

1 x 10^6 Zellen/DurchstechflascheSchwarze Materie Neuronen von RattenRN-sn

1 x 10^6 Zellen/DurchstechflascheRatteneuronenRNs

1 x 10^6 Zellen/DurchstechflascheNeuronen des abdominalen Rückenmarks bei RattenRN-VSC

1 x 10^6 Zellen/DurchstechflascheNeuronen des Rückenmarks bei RattenRN-DSC

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflascheRatten mit weniger dendrialen VorläuferzellenROPC

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflascheRatten SchneezellenRSC

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflaschePerineurogenese Fibrozellen bei RattenRpnf

5 x 10^5 Zellen/DurchstechflascheRattenastrozytenRA