Glukoseoxidase (GOD) Testbox Spurmethode

Glukoseoxidase (GOD) Testbox
Spurmethode
Warennummer:BC0695
Spezifikationen:100T/96S

Produktinhalt:
Extraktion:Flüssigkeit 100 ml x 1 Flasche, 4 ° C aufbewahren;
Reagenz 1:Flüssigkeit 15mL x 1 Flasche, 4 ° C aufbewahren;
Reagenz 2:Flüssigkeit 3mL x 1 Flasche, 4 ° C aufbewahren;
Reagenz 3:Flüssigkeit 1mL x 1 Stück, -20 ° C aufbewahren, nach dem Schmelzen kann aufgeteilt werden.

Produktbeschreibung:
GOD (EC 1.1.3.4) ist weit verbreitet in Tieren und Pflanzen und katalysiert die Oxidation von Glukose zur Herstellung von Glukosesäure und zur Herstellung von H 2 O 2, einer der Stoffwechselwege für die Produktion von lebendem Sauerstoff im Organismus.
GOD katalysiert Glukose, um H 2 O 2 zu erzeugen, Peroxidase katalysiert den Sauerstoff, der durch den Abbau von H 2 O 2 erzeugt wird, wenn sie aerob anwesend ist, und oxidiert das benachbarte Anisamin, um farbige Substanzen zu erzeugen.

Eigene Ausrüstung und Instrumente erforderlich
Sichtbares Spektrophotometer/Enzym-Calibrator, Wasserwanne, Tischzentrifuge, verstellbare Pipette, Spurplatte/96-Loch-Platte, Grinder, Eis und Destillationswasser

Betriebsschritte
1. Vorbereitung der Probenmessung
1, Gewebebehandlung: Wiegen Sie etwa 0,1 g Gewebe, fügen Sie 1 ml Extrakt zur Eisbad Homogenisierung hinzu; 8000g 4 ° C 10min zentrifugieren, entfernen und auf dem Eis testen.
Serum (Plasma): Direkte Prüfung.
II. Bestimmungsschritte
1, Spektrophotometer oder Enzym-Calibrator Vorwärmung von mehr als 30 Minuten, die Wellenlänge 500 nm, destilliertes Wasser Null einstellen.
Zubereitung der GOD-Arbeitsflüssigkeit: Nehmen Sie 15 ml Reagenz ein und 3 ml Reagenz zwei und mischen Sie den PH 5,1 (jetzt verfügbar).
3. Prüftabellen:
Reagenznetzung (μL) Messrohr
Gottes Werk 174
Reagenz 3 6
Mischen, 37 ° C (Säugetiere) oder 25 ° C (andere Arten) Wasserbad 5min
Muster 20
Die GOD-Arbeitsflüssigkeit und das Reagenz 3 werden vor der Probenmessung in ein 37 ° C-Wasserbad isoliert und die oben genannten Reagenze in der Reihenfolge in das Spurverhältnis hinzugefügt.
Scheiben / 96 Loch Platte, während die Probe gleichzeitig beginnen Timing; Erfassen Sie die anfängliche Absorption A1 bei 20 Sekunden und die Absorption A2 bei 1 Minute und 20 Sekunden bei 500 nm Wellenlängen. Berechnen Sie ΔA=A2-A1.
Berechnung der Energieeinheit Gottes
a. Die Berechnungsformel, die mit Spuren-Quarzschalen gemessen wird, ist wie folgt:
Berechnung der Vitalität des Tiergewebes GOTT
1) Berechnung nach Proteinkonzentration
Definition der Einheit: Pro mg Histoprotein im Reaktionssystem katalysiert pro Minute zur Herstellung von 1 μmol oxidativ benachbarter Anisamin definiert als eine Einheit der Enzymdynamik.
GOD(U/mg prot)=ΔA÷(ε×d)×V Gegensumme÷(wie Cpr×V)÷T=1333×ΔA÷Cpr
(2) Berechnung nach Probengewicht
Definition der Einheit: Jedes g Gewebe in einem Reaktionssystem katalysiert pro Minute zur Herstellung von 1 μmol oxidativ benachbarter Fenisamin definiert als eine Einheit der Enzymdynamik.
GOD (U / g frisches Gewicht) = ΔA ÷ (ε × d) × V Gegensumme ÷ (W ÷ V Extraktion × V-Muster) ÷ T = 1333 × ΔA ÷ W
Berechnung der Serum (Plasma) GOTTES Vitalität
Definition der Einheit: Jede ml Serum (Plasma) im Reaktionssystem katalysiert pro Minute zur Herstellung von 1 μmol oxidativ benachbarter Anisamine definiert als eine Einheit der Enzymaktivität.
GOD(U/mL) = ΔA÷d÷ε×V Anti-Total÷T÷V Probe = 1333×ΔA
V Anti-Summe: Gesamtvolumen der Reaktion, 0,2 mL; V-Probe: Probenvolumen hinzufügen, 0,02 mL; V-Extraktion, Extraktionsflüssigkeitsvolumen hinzufügen,
1 ml; cpr: Proteinkonzentration der Probe, mg/mL； W: frisches Gewicht der Probe, g; d: Lichtdurchmesser, 1 cm; ε: oxidativ benachbarter Fenisamid-Dämpfungskoeffizient, 7,5 x 10 -3 mL / μmol / cm; T: Reaktionszeit, 1 min.
b. Die Berechnungsformel, die mit einer 96-Loch-Platte gemessen wurde, ist wie folgt:
Berechnung der Vitalität des Tiergewebes GOTT
1) Berechnung nach Proteinkonzentration
Definition der Einheit: Pro mg Histoprotein im Reaktionssystem katalysiert pro Minute zur Herstellung von 1 μmol oxidativ benachbarter Anisamin definiert als eine Einheit der Enzymdynamik.
GOD(U/mg prot)=ΔA÷(ε×d)×V Gegensumme÷(wie Cpr×V)÷T=2222×ΔA÷Cpr
(2) Berechnung nach Probengewicht
Definition der Einheit: Jedes g Gewebe in einem Reaktionssystem katalysiert pro Minute zur Herstellung von 1 μmol oxidativ benachbarter Fenisamin definiert als eine Einheit der Enzymdynamik.
GOD (U / g frisches Gewicht) = ΔA ÷ (ε × d) × V Gegensumme ÷ (W ÷ V Extraktion × V-Muster) ÷ T = 2222 × ΔA ÷ W
Berechnung der Serum (Plasma) GOTTES Vitalität
Definition der Einheit: Jede ml Serum (Plasma) im Reaktionssystem katalysiert pro Minute zur Herstellung von 1 μmol oxidativ benachbarter Anisamine definiert als eine Einheit der Enzymaktivität.
GOD(U/mL) = ΔA÷d÷ε×V Anti-Total÷T÷V Probe = 2222×ΔA
V Anti-Summe: Gesamtvolumen der Reaktion, 0,2 mL; V-Probe: Zusatzvolumen der Probe, 0,02 mL; cpr: Proteinkonzentration der Probe, mg/mL；
W: frisches Gewicht der Probe, g; d: Lichtdurchmesser, 0,6 cm; ε: oxidativ benachbarter Anisamin-Dämpfungskoeffizient, 7,5 x 10 -3 mL / μmol / cm; T: Reaktionszeit, 1 min.
1, die Vitalität von GOTT in verschiedenen homogenen Geweben ist anders, machen Sie bitte 1-2 Vorversuche vor dem formellen Test, wenn A2-A1 > 1,
Es zeigt, dass die Gewebedynamik zu hoch ist, muss mit der Extraktflüssigkeit in einer geeigneten Konzentration verdünnt werden, so dass A2-A1 <1,
zur Verbesserung der Erkennungsempfindlichkeit.
Wenn A1 > A2 während des Experiments auftritt, verdünnen Sie die Probe mit Extraktflüssigkeit auf eine geeignete Konzentration.
2, gute zwei Menschen gleichzeitig tun dieses Experiment, eine Person vergleicht die Farbe, eine Person zählt die Zeit, um die Genauigkeit der Ergebnisse des Experiments zu gewährleisten.
Dieses Kit ist nur für tierisches Gewebe und tierische Sera (Plasma) geeignet.

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