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Fischtechnische Dienstleistungen

VerhandlungsfähigAktualisieren am05/06
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Fish Technology Service kann die Positionierung der Expression von Nukleinsäuren in Dutzenden oder Hunderten von Proben kennen und kann verwendet werden, um die Unterschiede in der Expression von Nukleinsäuren bei Krebs und Krebs, die Korrelation der Nukleinsäureexpression mit der Überlebensdauer, die Beziehung der Nukleinsäureexpression mit der Entwicklung des Tumors und vieles mehr zu analysieren.

Produktdetails

Fish-Technologie-Dienstleistungen werden in der Regel in den frühen Phasen verwendet, um die Gene oder Chromosomen zu verstehen, die sich vergrößern, fehlen, fusionieren oder brechen, und eignen sich für: pränatale Diagnose, nachgeburtliche genetische Erkrankungen, Tumordiagnose und prognostische Bewertung. Eine breite Palette von Probenquellen: Gewebe, entfallene Zellen, Salzwasser, Blut, Knochenmark können getestet werden, und nicht nur auf frische Proben beschränkt, können 2-3 Jahre lang Paraffinproben getestet werden.

FISH kann auch Nukleinsäuren in Gewebechips erkennen (derzeit häufig verwendet, um ncRNA zu erkennen: microRNA, lncRNA, circRNA), kann die Positionierung der Expression von Nukleinsäuren in Dutzenden oder Hunderten von Proben kennen, kann verwendet werden, um die Unterschiede in der Expression von Nukleinsäuren neben Krebs zu analysieren, die Korrelation der Nukleinsäureexpression mit der Überlebensdauer, die Beziehung der Nukleinsäureexpression mit der Entwicklung des Tumors und vieles mehr.

Experimentelle Prozesse der technischen Dienstleistungen von Fish:

fish技术服务


Fischtechnische DienstleistungenFloreszenz-In-Situ-Hybridisierung (FISH) ist eine Technik, die nicht radioaktive Fluoreszenzsignale verwendet, um in-situ-Hybridproben zu erkennen. Es kombiniert die hohe Empfindlichkeit, Sicherheit des Fluoreszenzsignals, die Intuitivität des Fluoreszenzsignals und die hohe Genauigkeit der in-situ-Hybridisierung, die in-situ-Hybridisierung durch eine fluoreszierend gekennzeichnete DNA-Sonde mit der DNA einer zu prüfenden Probe, die Unterscheidung und Zählung des Fluoreszenzsignals unter dem Fluoreszenzmikroskop, um Zellen und Gewebeproben mit Chromosomen oder genetischen Anomalien zu erkennen und zu diagnostizieren, um eine genaue Grundlage für die Klassifizierung, Vorhersage und Prognose einer Vielzahl von genetischen Erkrankungen zu bieten. Seit der Einführung der FISH-Technologie durch Pinkel und Heiles in den späten 1980er Jahren in den Bereich der Chromosomenprüfung ist die FISH-Technologie weit verbreitet in der klinischen Diagnose und der wissenschaftlichen Forschung und zeigt einen deutlichen Vorteil gegenüber einigen herkömmlichen Techniken.


Fluoreszenz-in-situ-HybridtechnologieFischtechnische DienstleistungenIm Vergleich zur herkömmlichen Immohistochemischen Methode (IHC) weist FISH eine gute Stabilität und Wiederholbarkeit auf. Derzeit wird die Immunhistochemie weit verbreitet in der klinischen Diagnose in verschiedenen Bereichen wie Tumoren. Die Immunhymose wird auf krankheitsbezogene Proteine getestet. Da die Proteinexpression und die Konfiguration selbst stark von verschiedenen Faktoren beeinflusst werden (z. B. Säuren, Alkalinen und Verfälschungsmittel), ist die Stabilität der Testbedingungen für die Ergebnisse von entscheidender Bedeutung. Darüber hinaus hängt die Beurteilung der Immunhistochemischen Testergebnisse von der subjektiven Beurteilung des Testers über die Farbgebung ab, und bei einigen schwach positiven Ergebnissen können sich verschiedene Tester leicht unterscheiden. Alle oben genannten Faktoren können die endgültige Diagnose des Arztes beeinflussen.


Fluoreszenz-in-situ-HybridtechnologieFischtechnische DienstleistungenDas Objekt ist die DNA in der Zelle, die dichte Doppelspiralstruktur ermöglicht es, dass die DNA über Millionen von Jahren gut bleiben kann, ihre Struktur ist stabil und nicht leicht von Umweltbedingungen beeinflusst wird, was eine gute Grundlage für die Stabilität der Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierungstechnologie bietet. Darüber hinaus wurde die Bestimmung der Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierungsergebnisse mit Hilfe der Farbeurteilung der Fluoreszenz und der Signalzählung objektiv quantifiziert. Wenn mit entsprechenden FISH-Betriebssystemen wie dem Hybrid-Hybrider von Abbott-Vysis und dem Probenvorbearbeitungssystem VP2000 und dem Chromosomebildsystem der gesamte FISH-Operation automatisiert wird, werden die subjektiven Faktoren für den Bediener und den Tester minimiert und die Genauigkeit der Ergebnisse gewährleistet.


PCR aufgrund der hohen Empfindlichkeit, die einfache und schnelle Bedienung ist in den letzten Jahren eine vergleichsweise große Anzahl von Gendiagnose-Techniken angewendet, aber der Anteil der falschen Negativitäten und falschen Positiven der PCR-Diagnostik ist höher, die gleiche Probe kann nur einmal analysiert werden und die Ergebnisse des Experiments können nicht wiederholt werden. Mit der kontinuierlichen Entwicklung der Probentechnologie ist die Empfindlichkeit von FISH derzeit nahe oder erreicht das Niveau der PCR und kann die Grenzen der PCR-Technologie gut ausgleichen. Die Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung ermöglicht nicht nur einen sehr niedrigen Anteil von Fälschungspositiven und Fälschungsnegativen (mit der pränatalen Diagnosesonde von Abbott-Vysis zum Beispiel bestätigten 29.000 Anwendungsergebnisse eine Genauigkeit von bis zu 99,9%), sondern ermöglicht auch mehrfache FISH-Operationen auf derselben Probe und die Erkennung mehrerer Anomalien von Chromosomen oder Genen gleichzeitig mit einer Fluoreszenzsonde in verschiedenen Farben, was die Testzeit erheblich einspart. Darüber hinaus passiertFischtechnische DienstleistungenDiagnostische Untersuchungen können zur Anomalie der Anzahl von Chromosomen oder bestimmten Genen, Fehlen, Verschiebungen und Neuordnungen bestimmter Teile durchgeführt werden.


Die Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH) ist eine Methode, bei der nicht-radioaktive Fluoreszenzstoffe anhand des Nukleinsäuresonde-Hybridisierungsprinzips die Position der DNA-Sequenz im Kern oder auf dem Chromosom anzeigen. Diese Technologie verfügt über schnelle, sichere, empfindliche und langfristige Aufbewahrung der Sonden und wird in den Bereichen Zellgenetik, Tumorbiologie, Genlokalisierung, Genkartierung, Genamplifikation, pränatale Diagnose und Evolutionsforschung der Chromosomen von Säugetieren weit verbreitet.


Fischtechnische DienstleistungenGrundprinzipien

Einfach gesagt, das Prinzip der Basiskomplementären Paarung ist, dass wir die exogene Nukleinsäure (das heißt, die oft molekulare Sonde genannt wird) mit der DNA oder der RNA, die auf dem Gewebe oder der Zelle zu erkennen ist, paaren, um ein Nukleinsäurehybride zu bilden, und dann nach einem bestimmten Mittel die Position dieses Hybridmoleküls anzuzeigen.


Klassifizierung der Sonden
DNA-Sonden: Die doppelkettige recombinante DNA-Sonde (cDNA) ist derzeit die am häufigsten verwendete Sondenart. Eigenschaften hohe Empfindlichkeit, gleicher Betrieb und höhere Kosten.
● RNA-Sonde: In diesem Jahr wird die Anwendung von RNA-Sonden zunehmend, was aufgrund des kleinen Moleküls der einkettigen RNA-Sonde, der guten Durchlässigkeit im Gewebe, der keine Degeneration vor dem Gebrauch erfordert, und es gibt keine Hybridisierung, die alle mit der Zielnukleinsäure gepaart werden können.
● Oligonukleotidsonde: Diese Art von Sonden verwendet meist einen DNA-Synthesizer, um einkettige DNA-Oligonukleotide auf unlöslichen Siliciumstrahmen zu synthetisieren.
Die Stabilität der Nukleensäurehybriden lautet:

RNA > DNARNA > DNADNA


Anwendung

  Fischtechnische DienstleistungenEs wurde in den Bereichen der Zellgenetik, der Tumorbiologie, der Genlokalisierung, der Genkartierung, der Genamplifikation, der pränatalen Diagnose und der Evolutionsforschung der Säugetierchromosomen weit verbreitet.


Untersuchung von Chromosomenstrukturvariationen und Nicht-Ganzheitlichen

Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung vereinfacht die Erkennung von Chromosomenstrukturvariationen. Wenn ein nicht-ganzheitliches Chromosom eines Pflanzenchromosoms auf abnormes Verhalten des Chromosoms zurückzuführen ist, kann dies durch Faktoren wie die Anzahl und Strukturunterschiede in der Anzahl und Strukturunterschiede der beiden Eltern oder eine weitere Verwandtschaft zwischen den Chromosomen verursacht werden. In-situ-Hybridisierung ermöglicht die Erkennung fehlender, hinzugefügter oder ersetzter Chromosomen.


Ermittlung von Gen-Amplifikation und -Fehlen

Die räumliche Auflösung und Empfindlichkeit von FISH ermöglichen die Positionierung von Eltern- und Amplifikationsgenen in krankheitshemmenden Schädlingszellen. Das amplifizierte Gen befindet sich hauptsächlich auf dem gleichen Chromosomarm, ist jedoch in gewisser Entfernung vom ursprünglichen Elterngen und befindet sich oft unabhängig von den Telomeren des Chromosoms. Die FISH-Analyse deutet darauf hin, dass die Zellbrucht möglicherweise auf eine strukturelle Neuordnung der Chromosomen zurückzuführen ist, die die Vergrößerungsbereiche enthalten. Außerdem kann FISH die Position und die Anzahl der exotischen Gene in gentechnisch veränderten Pflanzen lokalisieren, was bereits bei Pflanzen wie Tomaten, Tabak, Gerste, Weizen und Gerste erfolgreich ist. Mit der FISH-Technologie können auch einige genetische Fehler im Zusammenhang mit erblichen Erkrankungen nachgewiesen werden, wie z. B. fehlende Gene bei Patienten mit Aniridia.


3. Genetische Positionierung

Die Genlokalisierungstechnik der Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung ist weit verbreitet. Die PP2Ac-Mutation Lungenkrebs-assoziierte Gene in der Chromosomenregion wurde beobachtet unter einem Fluoreszenzmikroskop, um die Merkmale der hybriden Signale aufzunehmen und zu analysieren. Das Ergebnis zeigt offensichtliche Hybridsignale auf den Chromosomen 5q23-31 der normalen menschlichen Lymphozyten und stärkere Signale auf den Chromosomen 5 und 7 der GLC-82-Zellen. Beschreibung Punktmutationen verursachen Veränderungen in der PP2Ac-Aktivität und somit eine Gendisplacement, die zur Entwicklung von Lungentumoren führt. Die FISH-Technologie in Kombination mit Biochemie, Computer- und RekombinationsDNA-Technologien untersucht Alu-Stellen, was darauf hindeutet, dass die DNA-Sequenz mit dem Bandtyp verbunden ist. Eine Untersuchung der kodierenden Genverteilung im menschlichen Genom mit der FISH-Technik ergab, dass sich die Gene hauptsächlich auf den G + C-DNA-Abschnitt des Chromosoms konzentrieren (35% des gesamten Genoms). Die FISH-Technologie bietet ein wichtiges Instrument zur Untersuchung der Seidenstruktur. Die Anwendung der FISH-Technik ermöglicht die direkte Beobachtung von Chromosomentelomeren, was die Struktur und Funktionalität von Chromosomen im Kern vereinfacht.


4. Genetische Karte
verwendenFischtechnische DienstleistungenDie Position der DNA auf dem Chromosom kann direkt erkannt werden, wobei die Position der Gene auf dem Chromosom festgestellt wird. Da in situ-Hybridisierung nicht von in-situ-Variationen und der Anzahl der Kopien zwischen den Standorten beeinflusst wird, hat sich die FISH-Technologie zu einem wichtigen Werkzeug für die Kartierung wiederholter Sequenzen und multigenerischer Familien entwickelt. Mehrfarbige Sondenmarkierungen bieten einen einfacheren Weg zur Sondenpositionierung. Wenn bei der Detektion 2 Sonden rot und die dritte Sonde grün sind, ist die Position der grünen Stelle entweder außerhalb der 2 roten Stellen oder zwischen ihnen, so dass die Sondenreihenfolge bestimmt werden kann. Somit kann die Sonde durch eine Sequenz von mindestens 20 kbp getrennt werden, um sie mit der FISH-Technologie zu positionieren.