Was ist LC-MS Molekulargewichtsanalyse? Anwendbares Objekt

Was ist LC-MS Molekulargewichtsanalyse? Anwendbares ObjektDetaillierte Beschreibung der Methode und ihrer Vorteile und Nachteile

Das Molekulargewicht ist einer der grundlegenden und wichtigsten physikalischen Parameter des Biomolekulars zuì. In vielen Bereichen der Biowissenschaften wie der dànbáizhì-Technik, der Entwicklung von Antikörpern, der Validierung von synthetischen Verbindungen und der metabolischen Analyse ist der genaue Zugang zu Informationen über das Molekulargewicht nicht nur eine Voraussetzung für die strukturelle Analyse, sondern auch die Grundlage für die Qualitätskontrolle und die funktionelle Forschung. Die Flüssigchromatographie-Massenspektrometrie (LC-MS) als hochempfindliches, leistungsstarkes und analysierbares Werkzeug für die Analyse verschiedener Molekulargewichtskomponenten in komplexen Proben wird zunehmend zur Hauptwahl in der wissenschaftlichen und biopharmazeutischen Forschung.

Was ist die LC-MS Molekulargewichtanalyse?

Die LC-MS-Molekulargewichtanalyse wird durch Flüssigchromatografische Trennung und Massenspektrometrie verwendet, um die Trennung, Detektion und Bestimmung der relativen Molekulargewicht von Zielmolekülen in komplexen Proben zu erreichen. Insbesondere:

• Flüssigchromatografie (LC) wird verwendet, um die Komponenten einer Probe nach physiochemischen Eigenschaften zu trennen.

• Die Massenspektrometrie (MS) ionisiert jede Trennkomponente und misst ihr Massenlastverhältnis (m/z), wodurch ihr jīngquè-Molekulargewicht zurückgedrückt wird.

Im Vergleich zu herkömmlichen UV-Testmethoden oder Gelelektrophoresismethoden ist LC-MS nicht auf bestimmte Farbstoffe oder Standardprodukte angewiesen und kann unbekannte Strukturen oder Spurproben jīngzhǔn charakterisieren.

LC-MS Molekulargewichtsanalyse

LC-MS ist für nahezu alle molekularen Massen im Bereich von 100 Da bis mehrere hundert kDa geeignet, und folgende Anwendungen sind häufig:

1. Rekombinative Proteine und Antikörper

• Stellen Sie sicher, dass das Molekulargewicht des ausgedrückten Produkts korrekt ist.

• Überprüfen Sie, ob nach der Übersetzung Modifikationen (z. B. Glykoxylierung, Acetylierung usw.) auftreten.

• Überwachen Sie Isomere, Abbauprodukte oder Aggregate.

Synthese kleiner Moleküle oder Verbindungen

• Bestätigung der Integrität der molekularen Struktursynthese.

• Nachweis von Nebenprodukten oder Zwischenprodukten.

• Qualitative / semi-quantitative Analysen durchführen.

3. Polypeptide und Nukleinsäuren

• Polypeptide mit weniger als 10 kDa eignen sich für die schnelle Molekulargewichtsbestätigung mit ESI-MS oder MALDI-MS.

• Antisense-Oligonukleotide, siRNA usw. können auch durch LC-MS jīngzhǔn ihre Integrität und ihren modifizierten Zustand nachweisen.

4, Metabolomik und Lipid zhìzǔxué

• Messung von Tausenden von Metaboliten / Lipidmolekülen mit hohem Durchsatz.

• Genaue molekulare Formelinformationen zur Identifizierung und Funktionsanalyse von Verbindungen.

LC-MS Molekulargewichtsanalyse

Abhängig von Analysezwecken und Probentypen werden unterschiedliche LC-MS-Prozesse verwendet. Hier sind einige der derzeitigen Mainstream-Strategien:

1, Entsalzung + ESI-MS-Analyse (geeignet für Proteine, Polypeptide)

• Oft kombiniert mit Online- oder Offline-Entsalzung (z. B. Vorbehandlung von C4/C18-Proben).

• Elektrosprühionisierung (ESI) ist für die Eigenschaften von Makromolekülen mit mehreren Ladungen geeignet.

• Verwenden Sie einen Software-Dekonvolutionsalgorithmus, um das einzelne Molekulargewicht eines Proteins zu ermitteln.

Vorteile: hohe Empfindlichkeit, Molekulargewichtsanalyse jīngqué.

Einschränkungen: Empfindlich für Salzkonzentrationen, muss der Probenpuffer optimiert werden.

LC-MS Vollständige Scananalyse (für komplexe Mischproben)

• Die Komponentenenttrennung erfolgt mithilfe eines Gradientenspülsystems.

• Kombiniert mit hochauflösenden Massenspektrometern wie TOF, Orbitrap oder Q-Exactive.

• Geeignet für das Screening von Spitzen der Molekulargewichtscharakteristik in komplexen Hintergründen.

Vorteile: Hoher Durchsatz, geeignet für die Analyse unbekannter Proben.

Einschränkung: Eine Datenbankübereinstimmung ist erforderlich und die Analyse dauert etwas länger.

MALDI-TOF Molekulargewichtsanalyse (für kleine Moleküle, Polypeptide)

• Testen Sie die Proben direkt mit der Methode der Matrix-Assisted Laser Absorption Ionization (MALDI).

• Geeignet für schnelle, hohe Durchflussbestätigung des Molekulargewichts.

Vorteile: Schnelle Analysegeschwindigkeit und hohe Salzbeständigkeit der Probe.

Einschränkungen: Nicht geeignet für Polymolekuläre Proteine, ungleichmäßige Ionisierungseffizienz beeinflusst die Quantifizierung.

LC-MS Molekulargewichtsanalyse vs. andere Molekulargewichtsanalysemethoden

Im Folgenden finden Sie einen Überblick über die üblichen Molekulargewicht-Testmethoden im Vergleich zu LC-MS:

Es ist ersichtlich, dass LC-MS nicht für alle Szenarien geeignet ist, aber es hat die Vorteile von bùkětìdài bei der Molekulargewichtsbestätigung, der komplexen Probenanalyse, der hochauflösenden Analyse usw.

5. Wie führt Biotech den LC-MS-Molekulargewichtsanalysedienst durch?

Bei Biotech integrieren wir die hochauflösende Orbitrap-Massenspektrumplattform (Q-Exactive HF-X, Exploris 480 usw.) mit einer Vielzahl von Probenverarbeitungsprozessen, um Forschungskunden und biomedizinischen Unternehmen eine hochempfindliche, schnelle und anpassbare Molekulargewichtsanalyse zu bieten:

• Unterstützt eine Vielzahl von Probenarten wie Proteine, Polypeptide, synthetische Moleküle, Oligonukleotide und andere.

• Entsalzung von Proben, Austausch von Puffern und Dekonvolutionsdatenverarbeitung im gesamten Prozess unterstützt.

• Standardisierte Berichte, einschließlich TIC-Diagramme, m/z-Spektren, Dekonvolutionsergebnisse usw.

• Kann Protein N-End/C-Duāncèxù, Glykoxylationsmodifikationsanalyse und andere Dienste binden.

Wir sind bestrebt, unseren Kunden nicht nur "nützliche", sondern auch "nützliche" Massenspektrometrie zu liefern, um Ihre Forschung und Produktentwicklung effizienter voranzutreiben.

Die LC-MS-Molekulargewichtanalyse ist ein präzises, effizientes und skalierbares Werkzeug in der aktuellen Biowissenschaftliche Forschung und Industrieanwendung. Seine Leistung im Kontext vieler Molekültypen und komplexer Proben übertrifft die Grenzen herkömmlicher Methoden. Ob für die wissenschaftliche Validierung oder die Qualitätskontrolle bei der Entwicklung neuer Medikamente, LC-MS ist eine wichtige Garantie für die Zuverlässigkeit der Daten und die Effizienz der Experimente. Wenn Sie auf der Suche nach einem hochleistungsfähigen Molekulargewichtsanalysedienst sind, wenden Sie sich herzlich an PT Biotech. Wir begleiten Ihre Forschung mit einer hochwertigen Technologieplattform und Dateninterpretationsfähigkeit.

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Besondere Biotechnologieprojekte von Betypake

1. Protein Sequenzierung

Mit dem neu eingeführten Obitrap Fusion Lumos Massenspektrometer von Thermo und dem Edman Degradation Sequencing System von Shimazu bietet PT Biotech eine Protein-Sequenzierungsanalyse auf Basis von Massenspektrum, einschließlich der Analyse der Aminosäure-Zusammensetzung von dànbáizhì, der Nduāncèxù-, Cduāncèxù- und Vollsequenzanalyse sowie der dànbáizhì-N-End-Sequenzanalyse auf Basis von Edman Degradation. Für die dànbáizhì unbekannter theoretischer Sequenzen wird ein dànbáizhì-Sequenzierungsdienst auf der Grundlage der Zero-Sequenzierung zur Analyse der Proteinsequenzen angeboten.

*Vorteile:

1. Mit dem weltweit fortschrittlichen Massenspektrometer Obitrap Fusion Lumos;

100% Abdeckung der ermittelten Zielproteinsequenz;

Bestimmbar Protein N-End bis zu 70 Aminosäuresequenzen;

Proben in verschiedenen Formen bestimmbar: Proteinlösung, PVDF-Proteinband;

5. Niedrige Probenverbrauchung: Proteinproben benötigen nur 5-10ug, um den Test abzuschließen;

Sequenzierung ist nicht von N-End-Modifikationen wie N-End-Schließung, PEC und Glykoxylierung beeinflusst.

II. dànbáizhì Gruppenlehre

Die Orbitrap Fusion Lumos-Plattform von Thermo Fisher wird mit Nano-LC kombiniert, um eine Vielzahl von analytischen Diensten für Quantitative dànbáizhì-Omik, Targeted dànbáizhì-Omik, Polypeptide-Omik und post-translationale modifizierte Proteomik bereitzustellen. Darüber hinaus hat PT Biotech einen neuen 4D dànbáizhì-Omik-Dienst auf der Grundlage von timsTOF Pro eingeführt, der Forschungsarbeiten in den Bereichen Spurprobenproteomik, Medizin mit großen Probenpopulationen und Hochdurchflussmodifikationsomik unterstützt.

*Vorteile:

1 . Quantitative Proteinanalyse mit hohem Durchsatz: Massenversuchungsanalyse in mehreren Kontrollgruppen zur Entdeckung neuer Biomarker;

2. in vivo und in vitro verschiedene dànbáizhì-Markierungsmethoden, die für die Analyse von Gewebe, Zellen, Blut und anderen Proben geeignet sind;

3. hohe Empfindlichkeit der Massenspektrumanalyse und hohe Wiederholbarkeit der Experimentergebnisse;

4. kann niedrigere Fülle von Proteinen erkennen, breiter linearer Bereich;

5. zhuānyè bioinformatische Analyse, die Analyse ist systematisch genauer.

Technische Analyse des Einzelzell-Massenspektroms

Prototype Biotechnology verwendet das Fluidigm-Massenspektromsystem für die einzellige Massenspektromtechnikanalyse, die die Zelloberfläche und das Innere der Moleküle mit Metallelementmarkern (in der Regel spezifischen Antikörpern, die mit Metallelementen gekennzeichnet sind) kennzeichnet, anschließend einzelne Zellen mit dem Stream-Zellprinzip trennt und anschließend das Atommassenspektrum einzelner Zellen mit der induktiv gekoppelten Plasma-Massenspektrometrie (ICP-MS) analysiert, zuì konvertiert die Atommassenspektromdaten in den signalisierenden molekularen Ausdruck auf der Zelloberfläche und im Inneren.

*Vorteile:

Technologiefortschritt, um technische Lücken zu füllen

Durch die Verwendung von Metall-markierten Antikörper-Technologien wird das Problem vermieden, dass herkömmliche Fluoreszenzkanale wenig und leicht miteinander beeinflusst werden. Mit der gleichzeitigen Charakterisierung mehrerer Indikatoren auf Einzelzellebene können 51 Zielproteine gleichzeitig nachgewiesen werden.

2. Große Anzahl von Analysen, niedrigere Kosten

Einzellige RNAseq ist durch Kosten und andere Faktoren eingeschränkt, die Anzahl der Analysen aller Probenzellen ist in der Regel etwa 2x10 ^ 4, während die Stream-Massenspektrometrie auf einmal (eine einzige Probe) mindestens 10 ^ 5 Zellen analysieren kann, um eine quantitative Verbesserung zu erzielen, und die Kosten sind nicht höher als die Einzellige RNAseq.

3. Große Anwendungsaussichten

① Die Ergebnisse des Stream-Massenspektrums können Veränderungen in der Zelltubpopulation geben und haben große Forschungsaussichten in Bezug auf die klinische Diagnose und die Erkrankungsmechanismusforschung;

Die Kombination von Metalletikettentechnologie mit anderen Technologien wird eine neue Anwendungsrichtung geben. Neben herkömmlichen Proteinen kann die Massenspektromzelltechnik auch für die Proteinmodifikation nach der Translation verwendet werden;

Sie können die Überlebensrate der Zellen, die Zellgröße, die mRNA-Transkriptor-Expression, die Geschwindigkeit der DNA-Synthese und die Protease-Aktivität erkennen.

Immunopeptidomische Analyse basierend auf hochpräzisem Massenspektrum und Entdeckung neuer Antigene

Die One-Stop-Lösung für die Immunopolypeptidomik-Analyse und die Entdeckung neuer Antigene auf der Grundlage eines hochpräzisen Massenspektrums von PT Biotech umfasst unsere patentierte, hochempfindliche Lösung zur Anreicherung und Identifizierung von Immunpeptiden. Wir unterstützen Sie bei der Identifizierung und Identifizierung von mehr als 10.000 Polypeptiden Typ I und 10.000 Polypeptiden Typ II. Immunpeptidomische Analysen mit unserer optimierten Hochdurchfluss-Immunpeptidomischen Analyseplattform ermöglichen wiederholbare Identifizierung und Quantifizierung aus zuì-kleinem Probenmaterial. Der Dienst kann auf großflächige Forschungen angewendet werden und soll Forschern helfen, Lösungen für Krebs, Immunerkrankheiten und Infektionskrankheiten zu finden und unbekannte Ziele zu erforschen.

V. Biologische Charakterisierung

Batepack basiert auf der hochauflösenden Massenspektrometrie-Technologie, MALDI TOF， Hocheffiziente chromatografische Trennungstechnologie, die eine Reihe von wánshàns Biopharmazeutische Analyse-Lösungen bietet, von der Aminosäure-Zusammensetzung und Strukturanalyse von Bioprodukten wie dànbáizhì, Polypeptiden, Antikörpern und Impfstoffen bis hin zur Analyse der Produktvariabilität und Reinheit. Ziel ist es, qualitativ hochwertige biopharmazeutische Analysedienste zur Verfügung zu stellen, um den Herstellern von Biopharmazeutika zu helfen, die Qualität von Biopharmazeutika zu verbessern.

Die sieben Testplattformen von Biotech

Biotech - Bioproduktcharakterisierung, Biomassenspektrometrie

Beijing Baitai Pak Biotechnology Co., Ltd. widmet sich der Bereitstellung von Zhuānyè-Dienstleistungen wie Qualitätskontrolle-Prüfung und Projektvalidierung für die Bio- / Pharma- und Medizingeräteindustrie. Das Labor des Unternehmens folgt den Vorschriften und Leitlinien der NMPA, ICH, FDA und EMA und hat durch die Zertifizierung des doppelten Qualitätssystems CNAS / ISO9001 ein vollständiges Qualitätssystem eingerichtet, Daten kalt-heiß / außerhalb des Ortes sichern, Geräte regelmäßig messen / während der Überprüfung, Software-Audit-Tracking, um Kunden integrierte Lösungen und technische Dienstleistungen zur Unterstützung der Forschung und Entwicklung neuer Arzneimittel, der Registrierung von Arzneimitteldeklarationen und der Freigabe der Produktion.

1. Das Unternehmen nimmt das Qualitätskontrollsystem ISO9001 an, zhuānyè bietet CRO-Testanalysedienste auf der Basis von Massenspektrum an;

2. durch das nationale CNAS-Labor anerkannt, um Kunden medizinische Qualitätsforschungsdienstleistungen zu bieten, die den globalen pharmazeutischen Vorschriften entsprechen;

3. Die Geschäftsbereiche umfassen dànbáizhì-Omik, Polypeptidomik, Metabolomik, Biopharmazeutische Charakterisierung, Einzelzellanalyse, Einzelzellmassenspektrometrie, Bio-Cloud-Analyse und Multi-Student-Massenspektrometrie-Integrationsanalyse;

4. sieben Qualitätskontrolle-Prüfplattformen, um Ihre One-Stop-Service-Anforderungen zu erfüllen;

5. Service 3000 + Unternehmen, 10000 + Kunden Auswahl;

6. Engagiert, Ihnen qualitativ hochwertige Biomasse-Spektrum-Analyse-Services zu bieten!

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