Was sind die beiden Massenspektromethoden für die Identifizierung von Proteinen?

Was sind die beiden Massenspektromethoden für die Identifizierung von Proteinen?Biotechnologie Prüftechnik Service Details

Die dànbáizhì-Identifizierung ist ein Teil der dànbáizhì-Omik und die Massenspektrometrie (MS) ist eine der Kerntechniken der dànbáizhì-Identifizierung. Durch die Analyse des Massenlastverhältnisses von dànbáizhì-Molekülen kann die Massenspektrometrie detaillierte Informationen über dànbáizhì liefern, die weit verbreitet in der dànbáizhì-Identifizierung verwendet werden. Im Folgenden sind zwei häufig verwendete Massenspektromethoden aufgeführt.

Massenspektrum der Matrix-Assisted Laser-Desorption Ionization Flight Time (MALDI-TOF MS)

1. Prinzip: Diese Methode vermischt zunächst die dànbáizhì-Probe mit einer Matrix und bildet dann durch Laserbestrahlung gasförmige Ionen aus der Probe und der Matrix, die anschließend im elektrischen Feld fliegen, wobei sich die Flugzeit abhängig von ihrem Massenverhältnis (m / z) unterscheidet, um dànbáizhì zu identifizieren.

2. Eigenschaften: MALDI-TOF MS eignet sich für die dànbáizhì-Analyse mit größerem Molekulargewicht, einfache Bedienung, schnelle Analysegeschwindigkeit und ist die häufig verwendete Technik für die dànbáizhì-Identifizierung.

Elektrosprühionisierungsmassenspektrum (ESI-MS)

1. Prinzip: Elektrospray-Ionisierungs-Massenspektrum ist, indem die Lösungsprobe in einem hohen elektrischen Feld zu kleinen, geladenen Tropfen bildet, die immer kleiner werden, wenn das Lösungsmittel verdampft, zuì führt schließlich zur Ionisierung der Probenmoleküle und wird in das Massenspektrometer zur Qualitätsanalyse eingeführt, um die Identifizierung von dànbáizhì zu erreichen.

2. Eigenschaften: ESI-MS eignet sich für die Analyse von polaren Verbindungen und Bio-Makromolekülen, insbesondere der Sequenzanalyse von dànbáizhì und Polypeptiden, und kann in Verbindung mit der Flüssigchromatografie (LC) verwendet werden, um ein wichtiges Werkzeug für die Identifizierung von dànbáizhì zu sein.

Vorteile und Nachteile von MALDI-TOF MS und ESI-MS

Vorteile von MALDI-TOF MS

(1) Einfache Bedienung: Die Probenvorbereitung ist relativ einfach, die Anforderungen an die Probe sind geringer und eignet sich für die hohe Durchflussanalyse in der dànbáizhì-Identifizierung.

(2) Schnelle Analysegeschwindigkeit: in der Lage, die Identifizierung von dànbáizhì schnell durchzuführen, geeignet für das große Screening.

(3) hohe Empfindlichkeit: für ein größeres Molekulargewicht von dànbáizhì hat eine hohe Erkennungsempfindlichkeit, insbesondere in der dànbáizhì Identifizierung hervorragend.

(4) breiter Anwendungsbereich: Viele Biomoleküle wie dànbáizhì, Polypeptide, Nukleinsäuren usw. können analysiert werden.

Nachteile von MALDI-TOF MS

(1) Niedrige Auflösung: Im Vergleich zu ESI-MS hat MALDI-TOF MS eine niedrigere Auflösung und eine begrenzte molekulare Auflösungsfähigkeit für die Massennahe.

(2) Beschränkter Massenbereich: Nicht geeignet für die Analyse von sehr kleinen oder sehr großen Molekülen.

(3) Matrix-Effekt: Die Auswahl der Matrix hat einen großen Einfluss auf das Ergebnis und das Verhältnis von Matrix und Probe muss optimiert werden.

Vorteile von ESI-MS

(1) hohe Empfindlichkeit: Fähigkeit, Proben in sehr niedrigen Konzentrationen zu erkennen, geeignet für die Identifizierung von Jīngquè dànbáizhì.

(2) hohe Auflösung: in der Lage, Moleküle zu unterscheiden, die sehr nahe an der Masse liegen, eignet sich für eine detaillierte Massenanalyse.

(3) breiter Anwendungsbereich: kann in Verbindung mit Trennungstechniken wie Flüssigchromatografie (LC) verwendet werden, um die Komplexitätsbehandlungsfähigkeit der dànbáizhì-Identifizierung zu verbessern.

(4) Sequenzanalyse möglich: Die Aminosäuresequenz von dànbáizhì kann durch die serielle Massenspektrometrie (MS / MS) -Technologie analysiert werden.

Nachteile von ESI-MS

(1) Betriebskomplexität: Die Probenvorbereitung und der Instrumentenbetrieb sind relativ komplex und erfordern ein hohes technisches Niveau.

(2) Längere Analysezeit: Im Vergleich zu MALDI-TOF MS ist die Analysezeit länger und nicht geeignet für eine schnelle Hochdurchflussanalyse.

(3) Höhere Anforderungen an die Probe: Die Probe erfordert eine bessere Reinheit und Stabilität.

Die Kombination von MALDI-TOF MS und ESI-MS ermöglicht ein umfassenderes Verständnis der Struktur und Funktion von dànbáizhì durch umfassende Informationen zur Identifizierung von dànbáizhì, einschließlich des Molekulargewichts von dànbáizhì, der Aminosäuresequenz und der post-translationalen Modifikation.

Besondere Biotechnologieprojekte von Betypake

1. Protein Sequenzierung

Mit dem neu eingeführten Obitrap Fusion Lumos Massenspektrometer von Thermo und dem Edman Degradation Sequencing System von Shimazu bietet PT Biotech eine Protein-Sequenzierungsanalyse auf Basis von Massenspektrum, einschließlich der Analyse der Aminosäure-Zusammensetzung von dànbáizhì, der Nduāncèxù-, Cduāncèxù- und Vollsequenzanalyse sowie der dànbáizhì-N-End-Sequenzanalyse auf Basis von Edman Degradation. Für die dànbáizhì unbekannter theoretischer Sequenzen wird ein dànbáizhì-Sequenzierungsdienst auf der Grundlage der Zero-Sequenzierung zur Analyse der Proteinsequenzen angeboten.

*Vorteile:

1. Mit dem weltweit fortschrittlichen Massenspektrometer Obitrap Fusion Lumos;

100% Abdeckung der ermittelten Zielproteinsequenz;

Bestimmbar Protein N-End bis zu 70 Aminosäuresequenzen;

Proben in verschiedenen Formen bestimmbar: Proteinlösung, PVDF-Proteinband;

5. Niedrige Probenverbrauchung: Proteinproben benötigen nur 5-10ug, um den Test abzuschließen;

Sequenzierung ist nicht von N-End-Modifikationen wie N-End-Schließung, PEC und Glykoxylierung beeinflusst.

II. dànbáizhì Gruppenlehre

Die Orbitrap Fusion Lumos-Plattform von Thermo Fisher wird mit Nano-LC kombiniert, um eine Vielzahl von analytischen Diensten für Quantitative dànbáizhì-Omik, Targeted dànbáizhì-Omik, Polypeptide-Omik und post-translationale modifizierte Proteomik bereitzustellen. Darüber hinaus hat PT Biotech einen neuen 4D dànbáizhì-Omik-Dienst auf der Grundlage von timsTOF Pro eingeführt, der Forschungsarbeiten in den Bereichen Spurprobenproteomik, Medizin mit großen Probenpopulationen und Hochdurchflussmodifikationsomik unterstützt.

*Vorteile:

1 . Quantitative Proteinanalyse mit hohem Durchsatz: Massenversuchungsanalyse in mehreren Kontrollgruppen zur Entdeckung neuer Biomarker;

2. in vivo und in vitro verschiedene dànbáizhì-Markierungsmethoden, die für die Analyse von Gewebe, Zellen, Blut und anderen Proben geeignet sind;

3. hohe Empfindlichkeit der Massenspektrumanalyse und hohe Wiederholbarkeit der Experimentergebnisse;

4. kann niedrigere Fülle von Proteinen erkennen, breiter linearer Bereich;

5. zhuānyè bioinformatische Analyse, die Analyse ist systematisch genauer.

Technische Analyse des Einzelzell-Massenspektroms

Prototype Biotechnology verwendet das Fluidigm-Massenspektromsystem für die einzellige Massenspektromtechnikanalyse, die die Zelloberfläche und das Innere der Moleküle mit Metallelementmarkern (in der Regel spezifischen Antikörpern, die mit Metallelementen gekennzeichnet sind) kennzeichnet, anschließend einzelne Zellen mit dem Stream-Zellprinzip trennt und anschließend das Atommassenspektrum einzelner Zellen mit der induktiv gekoppelten Plasma-Massenspektrometrie (ICP-MS) analysiert, zuì konvertiert die Atommassenspektromdaten in den signalisierenden molekularen Ausdruck auf der Zelloberfläche und im Inneren.

*Vorteile:

Technologiefortschritt, um technische Lücken zu füllen

Durch die Verwendung von Metall-markierten Antikörper-Technologien wird das Problem vermieden, dass herkömmliche Fluoreszenzkanale wenig und leicht miteinander beeinflusst werden. Mit der gleichzeitigen Charakterisierung mehrerer Indikatoren auf Einzelzellebene können 51 Zielproteine gleichzeitig nachgewiesen werden.

2. Große Anzahl von Analysen, niedrigere Kosten

Einzellige RNAseq ist durch Kosten und andere Faktoren eingeschränkt, die Anzahl der Analysen aller Probenzellen ist in der Regel etwa 2x10 ^ 4, während die Stream-Massenspektrometrie auf einmal (eine einzige Probe) mindestens 10 ^ 5 Zellen analysieren kann, um eine quantitative Verbesserung zu erzielen, und die Kosten sind nicht höher als die Einzellige RNAseq.

3. Große Anwendungsaussichten

① Die Ergebnisse des Stream-Massenspektrums können Veränderungen in der Zelltubpopulation geben und haben große Forschungsaussichten in Bezug auf die klinische Diagnose und die Erkrankungsmechanismusforschung;

Die Kombination von Metalletikettentechnologie mit anderen Technologien wird eine neue Anwendungsrichtung geben. Neben herkömmlichen Proteinen kann die Massenspektromzelltechnik auch für die Proteinmodifikation nach der Translation verwendet werden;

Sie können die Überlebensrate der Zellen, die Zellgröße, die mRNA-Transkriptor-Expression, die Geschwindigkeit der DNA-Synthese und die Protease-Aktivität erkennen.

Immunopeptidomische Analyse basierend auf hochpräzisem Massenspektrum und Entdeckung neuer Antigene

Die One-Stop-Lösung für die Immunopolypeptidomik-Analyse und die Entdeckung neuer Antigene auf der Grundlage eines hochpräzisen Massenspektrums von PT Biotech umfasst unsere patentierte, hochempfindliche Lösung zur Anreicherung und Identifizierung von Immunpeptiden. Wir unterstützen Sie bei der Identifizierung und Identifizierung von mehr als 10.000 Polypeptiden Typ I und 10.000 Polypeptiden Typ II. Immunpeptidomische Analysen mit unserer optimierten Hochdurchfluss-Immunpeptidomischen Analyseplattform ermöglichen wiederholbare Identifizierung und Quantifizierung aus zuì-kleinem Probenmaterial. Der Dienst kann auf großflächige Forschungen angewendet werden und soll Forschern helfen, Lösungen für Krebs, Immunerkrankheiten und Infektionskrankheiten zu finden und unbekannte Ziele zu erforschen.

V. Biologische Charakterisierung

Batepack basiert auf der hochauflösenden Massenspektrometrie-Technologie, MALDI TOF， Hocheffiziente chromatografische Trennungstechnologie, die eine Reihe von wánshàns Biopharmazeutische Analyse-Lösungen bietet, von der Aminosäure-Zusammensetzung und Strukturanalyse von Bioprodukten wie dànbáizhì, Polypeptiden, Antikörpern und Impfstoffen bis hin zur Analyse der Produktvariabilität und Reinheit. Ziel ist es, qualitativ hochwertige biopharmazeutische Analysedienste zur Verfügung zu stellen, um den Herstellern von Biopharmazeutika zu helfen, die Qualität von Biopharmazeutika zu verbessern.

Die sieben Testplattformen von Biotech

Biotech - Bioproduktcharakterisierung, Biomassenspektrometrie

Beijing Baitai Pak Biotechnology Co., Ltd. widmet sich der Bereitstellung von Zhuānyè-Dienstleistungen wie Qualitätskontrolle-Prüfung und Projektvalidierung für die Bio- / Pharma- und Medizingeräteindustrie. Das Labor des Unternehmens folgt den Vorschriften und Leitlinien der NMPA, ICH, FDA und EMA und hat durch die Zertifizierung des doppelten Qualitätssystems CNAS / ISO9001 ein vollständiges Qualitätssystem eingerichtet, Daten kalt-heiß / außerhalb des Ortes sichern, Geräte regelmäßig messen / während der Überprüfung, Software-Audit-Tracking, um Kunden integrierte Lösungen und technische Dienstleistungen zur Unterstützung der Forschung und Entwicklung neuer Arzneimittel, der Registrierung von Arzneimitteldeklarationen und der Freigabe der Produktion.

1. Das Unternehmen nimmt das Qualitätskontrollsystem ISO9001 an, zhuānyè bietet CRO-Testanalysedienste auf der Basis von Massenspektrum an;

2. durch das nationale CNAS-Labor anerkannt, um Kunden medizinische Qualitätsforschungsdienstleistungen zu bieten, die den globalen pharmazeutischen Vorschriften entsprechen;

3. Die Geschäftsbereiche umfassen dànbáizhì-Omik, Polypeptidomik, Metabolomik, Biopharmazeutische Charakterisierung, Einzelzellanalyse, Einzelzellmassenspektrometrie, Bio-Cloud-Analyse und Multi-Student-Massenspektrometrie-Integrationsanalyse;

4. sieben Qualitätskontrolle-Prüfplattformen, um Ihre One-Stop-Service-Anforderungen zu erfüllen;

5. Service 3000 + Unternehmen, 10000 + Kunden Auswahl;

6. Engagiert, Ihnen qualitativ hochwertige Biomasse-Spektrum-Analyse-Services zu bieten!

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