Transfektionsgrade lineares Polyethylenamin (MW40,000)

Produkteinführung

Transfektionsgrade lineares Polyethylenamin (MW40000(1) ist ein Produkt auf der Basis von Polyethylenamin sofortige Transfektion Reagenz mit einer hohen Transfektionswirkung. Polyethylamid ist ein organisches Makromolekularpolymer mit hoher cation-ionischer Ladung, das sich leicht an negativ geladene Nukleinsäuremoleküle bindet und einen positiv geladenen Komplex bildet. Der Komplex bindet sich an die Anionen der Zelloberfläche und gelangt durch Intralusion in die Zelle. Das Transfektionsreagens hat eine geringe Zytotoxizität und eignet sich für eine Vielzahl von Zelllinien und wird weit verbreitet in Rekombinationsproteinen,AAVProduktion usw.

undMW25000Im Vergleich zu Transfektionsmitteln,MW40000Transfektionsreagens ist gut löslich, kann direkt in Wasser gelöst werden, ohne die Säure-Alkali-Hilfslösung zu regulieren; Die Bedienung ist einfacher und die Transfektion wirkt gut.

Grundlegende Informationen

Gebrauchsanweisung

Reagenzkonfiguration

Benötigte Materialien:

deionisiertes Wasser oder höheres biologisches Wasser,1 Mol/L*（NaOH(Einmal)0.1~0.2μm PESVakuum sterile Filter, sterilHDPEoder Polypropylen Lagerflaschen.

Speicherflüssigkeitskonfiguration:

⑴ geben1 gTransfektionsgrade lineares Polyethylenamin (MW40000(aufgelöst in900 mlDeionisiertes Wasser, gleichmäßig auf dem Magnetrührer bis zur Lösung rühren;

⑵ Verwenden1 Mol/L* AnpassungpH-Wertbis6.9~7.1(wiepH-Wertgrößer als7.1Mit Salzsäure wirdpH-WertWert anpassen auf6.9~7.1）；

⑶ Die Lösung in den Zylinder (oder in die Tasse) übertragenInnerhalb, Wasser hinzufügenAnpassung an1 L；

⑷ Einmal verwenden0.2 µmFilter Vakuumfilterung Desterialisierung, die1 mg/mlLagerflüssigkeit;

⑸ Lagerflüssigkeit kann nach Bedarf aufgeteilt und in4℃ aufbewahrbar1Monat.

Transfektionsprozess

Impfung von Zellen: Um die Effizienz der Transfektion zu verbessern, wird empfohlen, die Zellen einen Tag vor der Transfektion zu impfen, um die Zelldichte bei der Transfektion zu erhöhen.in70~80%Für geeignet；

vorbereitenDNA-Transfektionsreagenzkomplexe:

⑴ gebenDie DNATransfektionsmittel und Verdünnungsmittel werden zuerst auf Raumtemperatur zurückgekehrt;

⑵ Verdünnen Sie die angemessene Menge mit einem geeigneten serolosen MediumDie DNA；

⑶ In einem gewissen Verhältnis(Jeder1 μg DNABenötigt1 bis 5 μLTransfektionsreagens, empfehlen Sie, das Verhältnis selbst zu finden)Das verdünnte Transfektionsreagens wird in die Befüllung getropft.Die DNAPrüfrohre für Lösungen(Keine umgekehrte Reihenfolge hinzufügen)Auf der Seite.LeichtWirbeln, vollständig gemischtRaumtemperatur ruhig.10~25MinuteInkubieren。

Transfektierte Zellen:

⑴ Entfernen Sie das Zellkulturmedium bei Transfektion unter serolosen Bedingungen und ersetzen es durch seroloses Medium;

⑵ Zugabe ausreichender Mengen an ZellenDNA-TransfektionsreagenzkomplexeLeicht vermischen.Transfektion.6-8Nach einer Stunde das frisch vorerhitzte Medium ersetzen；

⑶ inGeeignete BedingungenMitteKultur nach Transfektion24StundenSo kann die Expression des transferierten Gens nachgewiesen werden (die geeignete Testzeit kann selbst festgelegt werden).

Transport- und Lagerbedingungen

Transportbedingungen: Raumtemperatur

Lagerbedingungen: Pulver bei Raumtemperatur oder4℃ Aufbewahrung, Gültigkeitsdauer2Jahr.

Hinweise

1. Für die meisten Zellen1 μg DNAverwenden3 μLTransfektionsreagenz kann eine höhere Transfektionseffizienz erzielen, kann auch versucht werden1 μg DNAverwenden1,5 bis 4 μLTransfektionsreagenzien optimiert werden.

2. Aus Gründen Ihrer Sicherheit und Gesundheit tragen Sie bitte experimentelle Anzüge und Einweg-Handschuhe.

3. Dieses Produkt dient ausschließlich wissenschaftlichen Zwecken.