Maus Mustasäure ELISA Test Kit

Maus Mustasäure ELISA Test Kit

Gebrauchsanweisung

Prüfprinzip

Kit mit Dual-Antikörper-Schritt-Klempfase-Verbindung-Immunabsorptionstest (ELISA).Zur Vorverpackungvon肉豆蔻酸（Myristicacid）Antikörper werden in Mikroporen verpackt, nachfolgend Proben, Standardprodukte,HRP-gekennzeichnete Antikörper werden nachgewiesen, nachdem sie erwärmt und gewaschen werden. Mit dem Substrat TMB wird TMB durch Peroxidase-Katalyse in Blau und unter der Wirkung der Säure in das endgültige Gelb umgewandelt. Farbe und Licht in der Probe肉豆蔻酸（Myristicacid）präsentierenGenau relevant. Verwenden Sie das Enzym inMessung der Absorption (OD-Wert) bei einer Wellenlänge von 450 nm und Berechnung der Probenkonzentration.

Verfahren zur Sammlung, Verarbeitung und Aufbewahrung von Proben

1. Serum: Verwenden Sie ein Thermogen- und Endotoxinfreies Röhrchen, vermeiden Sie jede zelluläre Stimulation während des Betriebs und trennen Sie das Serum und die roten Blutkörperchen schnell und vorsichtig für 10 Minuten nach der Sammlung von Blut mit 3000 Wendungen.

2. Plasma: EDTA, Zitrate oder Hepatin Antikoagulation. 3.000 Drehungen 30 Minuten Entfernen.

3. Zellreinigung: 3000 Drehungen Zentrifuge für 10 Minuten, um Partikel und Polymere zu entfernen.

4. Gewebe homogenisieren: Gewebe in ausreichender Menge physiologisches Salzwasser massieren. 3.000 Drehungen in 10 Minuten entfernen.

5. Aufbewahrung: Wenn die Probe nach der Sammlung nicht rechtzeitig erkannt wird, verteilen Sie sie bitte nach einer Dosis, einfrieren Sie sie bei -20 ° C, vermeiden Sie wiederholtes Gefrierschmelzen, auffrieren Sie sie bei Raumtemperatur und stellen Sie sicher, dass die Probe gleichmäßig und vollständig aufgefroren ist.

Eigentümer

1. Enzyme (von 450 nm)

2. Präzisionsproben und Pistolenkopfe:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37 ° C Thermostat

Betriebsmaßnahmen

1. Die Kits werden aufbewahrt2-8 ° C, vor der Verwendung der Raumtemperatur Gleichgewicht für 20 Minuten. Aus dem Kühlschrank entnommene konzentrierte Waschflüssigkeit wird kristallisiert werden, was zu einem normalen Phänomen gehört, wodurch das Wasserbad nach der Auflösung des Kristalls erhitzt wird.

2. Die im Experiment nicht verwendeten Platten sollten sofort in die selbstverschlossene Beutel zurückgelegt und versiegelt (bei niedriger Temperatur getrocknet) aufbewahrt werden.

3. Konzentration fürDie S0-Norm von 0 kann als negative Kontrolle oder Leere betrachtet werden. Die Probe wurde nach der Anleitung fünfmal verdünnt und das Endergebnis wurde mit 5 multipliziert, um die tatsächliche Konzentration der Probe zu erreichen.

4. Wärmerüstung in strikter Übereinstimmung mit der Zeit, der Menge und der Reihenfolge, die in der Anleitung angegeben sind.

5. Alle flüssigen Bestandteile vor dem Gebrauch ausreichend schütteln.

Zusammensetzung des Kits

Hinweis: Standardprodukte (S0-S5) KonzentrationenFür:0、50、100、200、400、800 pg/ml

Vorbereitung von Reagenzien

20-fache Verdünnung des Waschpuffers: Destillationswasser wird 1: 20 verdünnt, d. h. 1 Anteil 20-fache Waschpuffer plus 19 Anteile destilliertes Wasser.

Plattenwaschmethode

1. Handwäsche: Entfernen Sie die Flüssigkeit im Loch, füllen Sie jedes Loch mit Waschflüssigkeit und lassen Sie es stehenNach 1 Minute die Flüssigkeit im Loch loslassen, auf dem Absorptionspapier trocknen und so die Platte 5 mal waschen.

2. Automatische Spülmaschine: Injektionslösung pro Loch350μL， 1 min einweichen und die Platte 5 mal waschen.

Betriebsschritte

1. Ausgleich von RaumtemperaturEntfernen Sie nach 20 Minuten die gewünschten Platten aus der Aluminiumfoliebeutel und legen Sie die restlichen Platten mit einer selbstdichtenden Beutel bei 4 ° C zurück.

2. Setzen von Standardlöchern und Probenlöchern mit Standardlöchern und Standardprodukten mit unterschiedlichen Konzentrationen50 μL;

3. Probenlöcher zunächst Proben hinzufügen10μL， 40 μL Verdünnung hinzufügen; Keine leeren Löcher.

4. Abgesehen von leeren Löchern, Standard-Probe-Löcher und Probe-Löcher jedes Loch mit Moringa Peroxidase (HRP) gekennzeichnete Detektion von Antikörpern 100 μL, das Reaktionsloch mit einer dichten Membran versiegelt, 37 ° C Wasserbad oder Thermostat für 60 min.

5. Entfernen Sie die Flüssigkeit, saugen Sie das Wasser auf dem Papier trocknen, füllen Sie jedes Loch mit Waschflüssigkeit, lassen Sie1min， Entfernen Sie die Waschflüssigkeit, saugen Sie das Wasser auf dem Papier trocknen, so wiederholen Sie die Platte 5 Mal (auch mit einer Plattenwaschmaschine).

6. Untergrund für jedes LochA, B jeweils 50 μL, 37 ° C Lichtschutz inkubieren 15 min.

7. Zu jedem Loch die Endflüssigkeit hinzufügenMessung der OD-Werte der einzelnen Löcher bei einer Wellenlänge von 450 nm innerhalb von 50 μL und 15 min.

Ergebnis Urteil

Zeichnen Sie eine Standardkurve: inIn einem Excel-Arbeitsblatt werden die Standardkonzentrationen als Querkoordinaten und die OD-Werte als Längskoordinaten verwendet, die Standardlineare Regressionskurve gezogen und die Konzentrationswerte der Proben nach der Gleichung berechnet.
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