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IMR-90 Embryogene Lungenfibrozyten

VerhandlungsfähigAktualisieren am05/06
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IMR-90 humane Embryoplumogen IMR-90 Zellen, humane Embryoplumogen Protozellen | Zelllinien | Zellstämme | Bakterien, Spezifikationen für die Verwaltung der Zellbank, die Bereitstellung von klaren Hintergründen für Zellstämme, die Bereitstellung von Referenzen und * Kulturbedingungen!

Produktdetails

IMR-90-Zellen (IMR-90-menschliche Embryophibrozyte) ATCC ® CCL-186 ™ Details

Grundlegende Informationen

  • ATCC-NummerDer CCL-186™
  • ​ BezeichnungDer IMR-90
  • ​ Einlegervon WW Nichols (W. W. Nichols)
  • BiosicherheitsklasseStufe 1 (BSL-1)
  • TransportartGefriert (Trockeneis)
  • WachstumsmerkmaleWachstum (adherent)
  • GattungMenschen (Homo sapiens
  • FormFibroblasten (Fibroblasten)
  • OrganisationsquellenLungen (Lunge)
  • KrankheitsstatusNormal (Normal)
  • ZelltypenFibroblasten (Fibroblasten)

Lizenzen und Vorschriften

Zusätzlich zu den oben erwähnten Materialübertragungsvereinbarungen (MTAs) kann die Übertragung dieses ATCC-Materials eine zusätzliche ATCC- und / oder regulatorische Genehmigung erfordern. Der Benutzer, der das ATCC-Material erworben hat, ist letztlich für die Erlaubnis verantwortlich. Um die spezifischen Anforderungen für den Versand in Ihre Region zu erfahren, klicken Sie hier.

Anwendung

  • Transfektion des Wirtes (für die Nucleofection-Technologie von Lonza).

Virus Empfindlichkeit

Diese Zelle ist empfindlich gegen folgende Viren:
  • Menschliche Poliovirus 1 (Human Poliovirus 1)
  • Menschliche Poliovirus 2 (Human Poliovirus 2)
  • Wasserpocken - Bandherpes-Virus (Varicella-Zoster)
  • Herpes simplex virus 1 (Herpes simplex virus 1)
  • Herpes simplex virus 2 (Herpes simplex virus 2)
  • Menschliche Poliovirus 3 (Human Poliovirus 3)
  • Impfstoff (Vaccinia Virus)
  • Humanes Herpesvirus 5 (CMV)
  • Das Vesicular Stomatitis Virus

Molekuläre Eigenschaften

  • Reverse Transkription AktivitätUmkehrtes Transkript: negativ
  • STR DNA Spektrum(kurze wiederholte Reihenfolge):
    • Amelogenin (Geschlechtstelle): X
    • CSF1PO: 11,13
    • D13S317:11,13
    • D16S539:10,13
    • D5S818:12,13
    • D7S820:9,12
    • THO1: 8,9,3
    • Tpox: 8, 9
    • vWA: 16,19
  • Zellgenetische AnalyseNormale weibliche Diplosome (46, XX), Chromosomenstabile (normal menschliche weibliche; diploid; stabil)
  • Homogene EnzymeGlucose-6-Phosphat-Dehydrogenase (G6PD) Typ B (Isoenzyme: G6PD, B)

Quellen und Hintergrund

Die IMR-90-Zelllinie wurde von W. W. Nichols und Kollegen entwickelt.16-wöchiges weibliches FötusNormales Lungengewebe wird isoliert und ist eine doppelte menschliche Fibrozelle.
Das Teilungspotenzial, die Empfindlichkeit für Viren und andere Eigenschaften dieser Zelle wurden eingehend untersucht und können als Alternative zu WI-38 (einem anderen häufig verwendeten humanen Lungenfibrozytenstamm) und anderen Standard-humanen Lungenzellenstamms verwendet werden.
IMR-90-Zellen werden vor dem AlternPopulationsvervielfachung (PDL) von etwa 58

Aufbaubedingungen

1. Vollständiges Wachstumsmedium
Das Grundmedium ist Eagle's Minimum Essential Medium (ATCC), Artikelnummer 30-2003.
Bei der Herstellung eines vollständigen Mediums muss das Basismedium hinzugefügt werden10% Rinderserum (FBS)
2. Pflege der Umwelt
  • GasatmosphäreLuft (95 %) + Kohlendioxid (CO₂, 5 %)
  • Temperatur:37.0°C
Subkulturierung (Subkulturing)
Betriebsschritte
  1. Entfernen und Entfernen der alten Kultur.
  2. Spülen Sie die Zellschicht kurzzeitig mit einer 0,25% (w/v) Panprotease-0,53 mM EDTA-Lösung, um Serumreste mit Pansenzyminhibitoren zu entfernen.
  3. Fügen Sie 2,0-3,0 ml Panprotease-EDTA-Lösung in die Kultivflasche und beobachten Sie sie unter einem umgekehrten Mikroskop, bis die Zellschicht sich ausbreitet (in der Regel dauert es 5-15 Minuten).
    Hinweis: Vermeiden Sie das Schütteln oder Klopfen der Kulturflasche, um eine Zellbindung zu verhindern. Schwer verteilte Zellen können in einem 37 ° C-Kühlraum platziert werden, um die Auflösung zu beschleunigen.
  4. Fügen Sie 6,0-8,0 ml vollständiges Wachstumsmedium hinzu und schlagen Sie die Zellen sanft, um die Verdauung des Panenzyms zu beenden.
  5. Verteilen Sie die Zellsuspension in einen neuen Kulturbehälter (z. B. Kulturflaschen oder Petrischalen).
  6. In einer 37°C, 5% CO₂-Ausdehnung kultiviert.
VermittlungsverhältnisEmpfehlung: 1: 2 bis 1: 8 (d.h. 1 Portion Zellsuspension in 2-8 neue Behälter aufgeteilt).
Wechselfrequenz des MediumsWechseln Sie alle 3-4 Tage ein frisches vollständiges Medium aus.
Einfrieren (Preservation)
  • GefrierflüssigkeitVollständiges Wachstumsmedium (95%) + Dimethyl-Acid (DMSO, 5%).
  • LagertemperaturFlüssige Stickstoffdampfphase (liquid nitrogen vapor phase).

Verwandte Produkte

  • Empfohlenes Grundmedium(ohne zusätzliche Ergänzungen oder Serum): ATCC 30-2003 (Eagle's Minimum Essential Medium).
  • Empfohlenes SerumATCC 30-2020 (Rinderserum).

Referenzen

  1. Nichols WW, et al. Charakterisierung eines neuen humanen diploiden Zellstamms, IMR-90.Wissenschaft196: 60-63, 1977.(PubMed: 841339)
  2. Human Rad50 ist physikalisch mit humanem Mre11 assoziiert: Identifizierung eines konservierten Multiprotein-Komplexes, der bei der rekombinanten DNA-Reparatur involviert ist.Molzell Biol16: 4832-4841, 1996.(PubMed: 8756642)
  3. Ostlund RE Jr., et al. Ein stereospezifischer Myo-Inositol/D-Chiro-Inositol-Transporter in HepG2-Leberzellen.J Biol Chem271: 10073-10078, 1996.(PubMed: 8626564)

Weitere Informationen

  • Zellbank InformationenDie Zellbank des Ausschusses für die Konservierung typischer Kulturen der chinesischen Akademie der Wissenschaften (GNHu32) liefert diese Zelle, die Tests für Bronze, Bakterien und Pilze sind alle negativ und durch STR-Identifizierung fehlerfrei.
  • LieferbeschränkungenNur für Forschungszwecke (For research use only)

IMR-90 Zellen, Human Embryogene Lungenfibrozyten

ATCC®-Nummer: CCL-186™

Bezeichnungen: IMR-90

Einleger: WW Nichols

Biosicherheitsstufe: 1

Versand: gefroren

Medium & Serum: Siehe Propagation

Wachstumseigenschaften: anhaltend

Organismus: Homo sapiens (Mensch)

Morphologie: Fibroblast

Quelle: Organ: Lunge

Krankheit: normal

Zelltyp: Fibroblast

Genehmigungen/Formulare: Neben der oben genannten MTA können für die Übertragung dieses ATCC-Materials weitere ATCC- und/oder behördliche Genehmigungen erforderlich sein. Jeder, der ATCC-Material kauft, ist letztlich für den Erhalt der Genehmigungen verantwortlich. Bitte klicken Sie hier, um Informationen zu den spezifischen Anforderungen für den Versand an Ihren Standort zu erhalten.

Anwendungen: Transfektionsgastgeber (Nukleofektionstechnologie von Lonza)

Virusempfindlichkeit: Humanes Poliovirus 1

Humanes Poliovirus 2

Varicella-Zoster

Herpes simplex Virus 1

Herpes simplex Virus 2

Humanes Poliovirus 3

Vaccinia-Virus

Humanes Herpesvirus 5

Vesikuläre Stomatitis-Virus

Reverse Transcript: negativ

DNA-Profil (STR): Amelogenin: X

CSF1PO: 11,13

D13S317: 11,13

D16S539: 10,13

D5S818: 12,13

D7S820: 9,12

THO1: 8,9.3

Tpox: 8, 9

vWA: 16,19

Zytogenetische Analyse: normale menschliche Frau; diploid; stabil

Isoenzyme: G6PD, B

Alter: 16 Wochen Schwangerschaft

Geschlecht: weiblich

Ethnische Herkunft: Kaukasisch

Kommentare: Der humane diploide Fibroblaststamm IMR-90 wurde von W.W. Nichols und Mitarbeitern aus den Lungen eines 16-wöchigen weiblichen Fötus abgeleitet. [22381]

Das Teilungspotential, virale Empfindlichkeiten und andere Eigenschaften wurden gründlich so untersucht, dass die Linie als Alternative zu WI-38 und anderen Standard-humanen Lungenzellstämmen betrachtet werden kann.

Es wurde berichtet, dass die Zellen in der Lage sind, 58 Bevölkerungsverdoppelungen vor dem Beginn der Seneszenz zu erreichen. [22381]

Vermehrung: ATCC komplettes Wachstumsmedium: Das Basismedium für diese Zelllinie ist das ATCC-formulierte Eagle's Minimum Essential Medium, Katalognummer 30-2003. Um das komplette Wachstumsmedium herzustellen, fügen Sie dem Basismedium folgende Komponenten hinzu: Fetales Rinderserum auf eine Endkonzentration von 10%.

Atmosphäre: Luft, 95%; Kohlendioxid (CO2), 5%

Temperatur: 37.0°C

Subkulturierung: Protokoll:

Entfernen und wegwerfen Sie das Kulturmedium.

Spülen Sie die Zellschicht kurz mit 0,25% (w/v) Trypsin-0,53 mM EDTA-Lösung, um alle Spuren von Serum zu entfernen, das einen Trypsinhihibitor enthält.

Fügen Sie 2,0 bis 3,0 ml Trypsin-EDTA-Lösung in den Kolben und beobachten Sie die Zellen unter einem invertierten Mikroskop, bis die Zellschicht dispergiert ist (normalerweise innerhalb von 5 bis 15 Minuten).

Hinweis: Um Klumpen zu vermeiden, rühren Sie die Zellen nicht, indem Sie den Kolben schlagen oder schütteln, während Sie darauf warten, dass sich die Zellen lösen. Schwierig lösbare Zellen können bei 37°C platziert werden, um die Dispersion zu erleichtern.

Fügen Sie 6,0 bis 8,0 ml vollständiges Wachstumsmedium hinzu und aspirieren Sie die Zellen durch sanfte Pipettierung.

Entsprechende Aliquoten der Zellsuspension zu neuen Kulturgefäßen hinzufügen.

Inkubieren Sie die Kulturen bei 37°C.

Unterteilungsverhältnis: Ein Unterteilungsverhältnis von 1:2 bis 1:8 wird empfohlen

Durchschnittliche Erneuerung: Alle 3 bis 4 Tage

Konservierung: Gefriermedium: Vollständiges Wachstumsmedium 95%; DMSO, 5 %

Lagertemperatur: flüssige Stickstoffdampfphase

Verwandte Produkte: Empfohlenes Medium (ohne die zusätzlichen Ergänzungen oder Serum unter ATCC Medium beschrieben):ATCC 30-2003

Empfohlenes Serum: ATCC 30-2020

Referenzen: 22381: Nichols WW, et al. Charakterisierung eines neuen humanen diploiden Zellstamms, IMR-90. Science 196: 60-63, 1977. PubMed: 841339

32932: Dolganov GM, et al. Human Rad50 ist physikalisch mit humanem Mre11 assoziiert: Identifizierung eines konservierten Multiprotein-Komplexes, der bei der rekombinanten DNA-Reparatur involviert ist. Mol. Zelle. Biol. 16: 4832-4841, 1996. PubMed: 8756642

33041: Ostlund RE Jr., et al. Ein sterospezifischer Myo-Inositol/D-Chiro-Inositol-Transporter in HepG2-Leberzellen. J. Biol. Chemie. 271: 10073-10078, 1996. PubMed: 8626564

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