Humane Gliomzellen U373

Humane GliomzellenU373

Einführung:Problematische Zelllinie: falsch identifiziert/kontaminiert. Es ist ein U-251MG-Derivat. Diese Zelllinie ist nicht die ursprüngliche Astrozytom-Zelllinie, die 1973 an der Universität von Uppsala gegründet wurde. Siehe U-373MG Uppsala (Cellosaurus=CVCL_2818) für die ursprüngliche Zelllinie U-373MG.

Warennummer：WS-S1465

Spezifikation：1 x 106 Zellen/T25 Kulturflasche

Grundlegende Zellinformationen

Quelle der Zellen: Gehirn

- Zellmorphologie: Epithelialzell-ähnlich, Adhesive Wachstum

- Zellgehalt: > 1 x 106 Zellen / Flasche

- Verpackung: T25 Kulturflasche / 1mL Gefrierrohr

Produktzweck: ausschließlich für wissenschaftliche Zwecke,Es darf nicht als Behandlungsmittel für Tier- oder menschliche Erkrankungen verwendet werden.

Zwei, Regeln zur Behandlung von Temperaturzellen am Tag der Lieferung

Schritt: Lieferung und Prüfung

Schritte 1 und 2 der Ausführung (allgemeiner Prozess).

Schritt 2: Ersatz des Mediums mit der Zellsammlung

· Desinfektieren Sie hinter der Flasche und öffnen Sie den Flaschendeckel im ultrareinen Arbeitstisch.

· Ersatz durch das mitgelieferte Medium.

· Besondere Hinweise: Wenn mehr Zellsuspension unter dem Mikroskop gefunden wird, müssen alle Medien in der Flasche in eine sterile Zentrifuge übertragen werden, um die Zellen zu sammeln und das alte Medium zu entfernen.

• Nach dem Austausch oder der Sammlung setzen Sie die Kultivflasche für 2-3 Stunden in den Kultivkasten.

Schritt 3: Nachbehandlung (je nach Zelldichte)

Drei, Zelltransmissionsschritte

A. Wandzellübertragung

1. Vorbereitung: Absorbieren des alten Mediums.

2. Spülen: Spüleflüssigkeit wie PBS langsam entlang der Seitenwand der Kultivflasche hinzufügen, nach sanftem Schütteln absaugen und das Restserum entfernen.

Verdauung: Fügen Sie vorerhitztes Yi-Enzym (wie T25 plus 1 ml) hinzu und schütteln Sie sanft, damit das Yi-Enzym alle Zellen abdeckt.

Inkubation: Verdauung bei Raumtemperatur ca. 2 Minuten (Zeit variiert je nach Zelle).

Beobachtung: Beobachten Sie unter dem Mikroskop, bis ≥ 90% der Zellen abgerundet und abgefallen sind. Wenn nicht erreicht, können Sie alle 30 Sekunden überprüfen.

6. Beendigung: Sobald die Zellen vollständig aufgelöst sind, fügen Sie sofort ein vorerhitztes Medium mit doppeltem Yi-Enzymvolumen zur Beendigung der Verdauung hinzu.

7. Blasen: Blasen Sie die Flaschenwand sanft mit einem Pipette, damit die Zellen abfallen und sich in eine Einzelzellsuspension verteilen.

8. Zentrifugieren: Übertragen Sie die Zellsuspension in ein Zentrifugerrohr und zentrifugieren Sie 200 × g für 3-5 Minuten.

9. Wiedersuspension und Impfung: Die Zellen werden mit einer kleinen Menge frischem Medium wiedersuspendiert und in entsprechenden Verhältnissen verdünnt und in eine neue Flasche eingeimpft.

10. Kultivierung: In den Kultivierungskasten legen. Wenn Sie einen normalen Flaschendeckel verwenden, müssen Sie den Flaschendeckel drehen, um den Gasaustausch zu erleichtern.

B. Suspendierte Zelltransmission

1. Sammeln und Zentrifugieren: Übertragen Sie die gesamte Zellsuspension in ein Zentrifugerrohr, 1000 U/min Zentrifugieren für 5 Minuten und entfernen.

2. Resuspension: Fügen Sie 1-2ml frisches Medium hinzu und suspendieren Sie die Zellen sanft.

3. Impfung: Die Zellsuspension in eine neue T25-Kulturflasche im Verhältnis von 1: 2 übertragen und das gesamte Medium auf 5-8 ml ergänzen.

4. Kultivierung: In die Kultivierungskammer setzen, um die Kultivierung fortzusetzen.

Vier, Besondere Problembehandlung: Abfallene Klebstoffzellen während des Transports

Einige Zellen, die nicht fest an die Wand kleben, fallen während des Transports ab, das ist ein normales Phänomen, und folgen Sie den folgenden Schritten:

1. Sammeln: Alle Medien in der Flasche in eine sterile Zentrifugerrohr übertragen und zentrifizieren (1200 U/min, 3-5 min).

2. Reinigen: Die Zellen mit PBS wieder suspendieren und PBS wieder zentrifugieren (1200 rpm, 3-5min).

3. Verdauung: Fügen Sie ca. 1 ml 0,25% Yi-Enzym hinzu, mischen Sie sanft (nicht stark schlagen) und legen Sie es in den Aufbaukasten, um 1-2 Minuten zu verdauen.

4. Beenden und Dispersion: nach dem Entfernen sanft blasen, um die Zellklumpen zu verteilen, schnell 3-5ml Medium hinzufügen, um die Verdauung zu beenden, Zentrifugieren (1200 rpm, 3-5min) auf die Reinigung zu werfen.

5. Resuspension und Impfung: 5 ml Medium-Resuspension hinzufügen und proportional in eine neue Kulturflasche / Schale impfen.

Beobachtung: Beobachtung unter dem Spiegel. Wenn die Zellen eine einzige oder nur 3-5 Zellen haben, können sie normal kultiviert werden, bis sie an der Wand wachsen. --

Fünf, Zusammenfassung der After-Sales-Politik

Wichtige HinweiseJedes ungewöhnliche Problem,Zeit zum FotografierenKontaktieren Sie uns ist der Schlüssel zum After-Sales-Support.