Gelatinase Spektrum MMP (2/9) Testversuch

Gelatinase Spektrum MMP (2/9) Testversuch

Enzymspektrographie (Zymography) Protease-Testmethoden basierend auf SDS-PAGE Elektrophoresis und Gegenphase-Gel-Färbung erkennen MMP-2 und MMP-9-Aktivität mit einer Empfindlichkeit von bis zu 10 pg, höher als ELISA-Methoden.

Grundprinzipien und Verfahren sind: Isolierung der Protease-enthaltenden Proben mit einem SDS-PAGE-Gel mit Collagenase-Substrat, Entfernung des Gels mit dem Enzymreaktionspuffer nach dem Ende der Elektrophorese, Inkubation, Gelfärbung und Entfärbung. Gel aufgrund des Substratproteins ist tief gefärbt und bildet einen dunklen Hintergrund, aber an der Stelle des Protease-Streifens wird die Protease das Substratprotein im Gel abbauen, so dass es nicht gefärbt wird und eine transparente Region bildet, die gleichzeitig die Position von MMP-2, MMP-9 (Enzymspektrum) anzeigen kann, kann die Probe Blut, Fluid, Zellextrakt usw. erkennen.

Laufzeit: 10 Werktage

Die Ergebnisse liefern: Ergebnisberichte, repräsentative Bilder, Betriebsprozesse und entsprechende Reagenzinstrumentinformationen.

Gelatinase Spektrum MMP (2/9) TestversuchProben zur Verfügung stellen Wissen:

1) Der Kunde informiert die experimentelle Gruppierung, Nummerierung und Hintergrunddesign-Daten, spezifische Anforderungen bitte im Voraus erklären;

2) Sammlung, Aufbewahrung und Transport der Proben:

1 Gewebeprobe: frisches Gewebe in flüssigen Stickstoff oder -70 Grad aufbewahren, Gewebe nicht weniger als 100 mg;

② Kulturzellen: Nehmen Sie nicht weniger als 2x106 Zellen in einem EP-Röhrchen durch die Zellzahl, fügen Sie 0,5 ml physiologisches Salzwasser hinzu und bewahren Sie es im Kühlschrank (-70 ° C, um wiederholtes Gefrierschmelzen zu vermeiden);

3. Blutzellproben: 0,5 ml physiologisches Salzwasser hinzufügen, um Blutproben mit Antikoagulationsmitteln zu bewahren oder Zellen mit Lymphozyten-Isolation zu isolieren, um zu bewahren (-70 ° C kann langfristig aufbewahrt werden, um wiederholtes Gefrierschmelzen zu vermeiden)

Serum- oder Zellkulturflüssigkeitsproben: nach der Entfernung von Verunreinigungen durch Zentrifuge in ein EP-Röhrchen aufgenommen und aufbewahrt (49 ° C kann 15-20 Tage aufbewahrt werden, -70 ° C kann langfristig aufbewahrt werden, um wiederholtes Gefrierschmelzen zu vermeiden)

4) Probentransport:

① Gewebeproben, Zellproben durch Trockeneis transportiert;

② Zellproben können auch direkt in Kulturflaschen gesendet werden (Dichtung garantiert keine Verschmutzung, Kulturflüssigkeit leckt nicht);

Serum oder Oberserum werden direkt mit Eisbeutel versendet (die Sendewege kann in fast 2 bis 3 Tagen erreicht werden).

Hinweis des Kunden:

Detektionssystem mit positiver Referenz oder Introseng, Quote-Proteinextraktion

Experimentale Hinweise:

1. Bei der Herstellung von Polyacrylamid sollten Sie darauf achten, Blasen auszuschließen.

2. Die Aktivität des Gelatinase-Spektrums wird von Faktoren wie Kalziumionen, Zinkionen und pH-Werten beeinflusst, daher sollte die Pufferzusammensetzung streng genau sein, versuchen Sie, ultrareines Wasser zu verwenden und die Inkubationstemperatur auch gut zu beherrschen.

3. Mit einem großen Kamm

Der pH der Inkubationsflüssigkeit liegt bei 7,5-7,6 und die Multiplikation von TRITON wird länger Flocken haben, so dass beim Experiment frisch konfiguriert werden kann.

5. 37 Grad Inkubation nicht in der CO2-Kultur, da der pH-Wert der Inkubationsflüssigkeit verändert wird, kann in der normalen Inkubation.

Gelatine 4 Grad aufbewahren und innerhalb einer Woche nach der Herstellung verwenden

Experimente im Dienst: