DH5a-empfindliche Zellen

DH5a-empfindliche Zellen

Produktname: DH5a Chemisch Kompetente Zelle

Artikelnummer: G6016

Lagerbedingungen: -80°C

Artikelnummer, Menge, Spezifikationen: G6016-20 (20 100u1), G6016-100 (100 100u1) |

pUC19 (Kontrollvektor) 10pg/μ1; 10μ 1

Gentyp

F-φ80 lac Z△M15△(lacZYA-arg F) U169 endAl recAl

hsdR17 (rk-, mk+) supE44 λ-thi -1 gyrA96 relAl phoA

Betriebsanweisungen.

1. CLBioDH5a-empfindliche ZellenLassen Sie das Eis schmelzen (oder lassen Sie die Hand oder Raumtemperatur für einen Moment, bis die Bakterien schnell in das Eis eingefügt werden, wenn sie sich in einer Mischung aus Eiswasser befinden), fügen Sie die ZielDNA (Plasmide oder Verbindungsprodukte) hinzu und schlagen Sie mit der HandDer EP-Grund wird vorsichtig vermischt und 25 Minuten auf Eis gelassen.

2,42 ° C Wasserbad heiß für 45 Sekunden, schnell wieder auf das Eis zu setzen und 2 Minuten zu ruhen, Schütteln verringert die Umwandlungseffizienz.

3. 700 μl steriles Medium (2YT oder LB) ohne Antibiotika in das Zentrifugerrohr zugegeben und bei 37 ° C bei 200 rpm für 60 Minuten erholt.

4.5000rpm Zentrifugieren Sie eine Minute für die Aufnahme von Bakterien, lassen Sie auf etwa 100 μ1 sanft blasen, um die Wiedersuspension zu schlagen und auf ein 2YT- oder LB-Medium mit entsprechenden Antibiotika zu beschichten.

5. Legen Sie die Platte umgekehrt in einem 37 ° C-Koffer über Nacht kultivieren. Bei blauen und weißen Flecken wird die Platte mindestens 17 h bei 37 ° C kultiviert.

Hinweise

1. CLBio-empfindliche ZellenVorschlagSchmelzen auf Eis. Auf Eis für etwa 5 Minuten platziert, kann schmelzen und Plasmide innerhalb von 8 Minuten nach der Schmelze hinzugefügt werden, sonst beeinflusst die Umwandlungseffizienz.

2. Bei der Mischung von Plasmiden oder Verbindungsprodukten sollte sanft bedient werden.

3. Die Umwandlung von hohen Konzentrationen von Plasmiden oder hocheffizienten Verbindungsprodukten kann die Menge an Bakterien, die am Ende für die Beschichtung verwendet werden, entsprechend reduzieren.