CytoFLEX Einsatzbereite tägliche QC Qualitätskontrolle Fluoreszenz Mikrosphäre Instrument Kalibrierung

Die Flow-Zytologie ist eine wichtige Zellanalysetechnik, die für die Zellzählung, die Phänotypanalyse und die Zellsequenzierung verwendet werden kann. Die Qualitätskontrolle vor der Durchführung der Flow-Zytologie ist sehr wichtig, um die Genauigkeit und Zuverlässigkeit der Experimente zu gewährleisten. Dieser Artikel beschreibt die Qualitätskontrollmethoden der Flow-Zytologie.

1. Kalibrierung von Flüssigkeitssystemen

Flüssigkeitssysteme umfassen Durchflussmesser und Drucksensoren. Zunächst werden Durchflussmesser und Drucksensoren kalibriert, indem sie die tatsächliche Durchflussgeschwindigkeit und den tatsächlichen Druck messen. Standardflüssigkeiten werden in das Durchflussmesser eingespritzt, um die Durchflussgeschwindigkeit zu messen und zu kalibrieren. Der Standarddruck wird in den Drucksensor eingespritzt und der Ausgangswert gemessen und kalibriert.

2. Kalibrierung des Lasersystems

Das Kalibrierungslasersystem wurde entwickelt, um die Position des Laserstrahls zu bestimmen, um eine korrekte optische Messung im Probenbehälter zu erhalten. Verwenden Sie die Kalibrierkurlen, um sie in einem Strömungszytometer-Probenrohr zu fixieren, verwenden Sie einen Laser, um die Kalibrierkurlen zu bestrahlen und die Position des Laserstrahls zu bestimmen.

Kalibrierung optischer Systeme

Die Kalibrierung des optischen Systems ist der Schlüssel, um sicherzustellen, dass die optischen Messwerte bei der Probenanalyse genau sind. Kalibrieroptische Systeme umfassen Detektoren und Synchronisatoren. Der Detektor ist für die Messung der Anzahl und Größe der immunfärbenden Partikel in der Probe verantwortlich. Der Synchronor ist dafür verantwortlich, dass der Detektor bei der Messung der Probe mit der richtigen Frequenz messt.

4. Standardpartikelkalibrierung

Der letzte Schritt bei der Stream-Zytometriekalibrierung besteht darin, die Probe mit einem Standard-Partikelkalibrator zu standardisieren. Testen Sie Standardpartikel bei unterschiedlichen Konzentrationen mit geräumigen Probenrohren. Nach der Kalibrierung der Standardkurve kann das Flow-Zytometer die Anzahl und die Eigenschaften spezifischer Immunfärbpartikel in der Probe genau berechnen.

Flow-Zytometer Kalibrierung

1. Reinigen Sie den Probenraum des Flow-Zytometers und überprüfen Sie, ob der Laser und das optische System ordnungsgemäß funktionieren.

2. Prüfen Sie die Genauigkeit der Streuungs-, Fluoreszenz- und Zeitparameter des Zytometers mit Partikelstandard-Substanzen.

3. Reinigen und kalibrieren Sie das Flüssigkeitssystem des Flusszellometers, um eine genaue Kontrolle der Durchflussgeschwindigkeit und der Probenvolumen zu gewährleisten.

Qualitätskontrolle der Flow-Zytometrie-Leistung

a. Regelmäßige Überprüfung der Leistungsparameter des Flusszellometers, einschließlich der Streuempfindlichkeit, der Fluoreszenzdetektionsempfindlichkeit und der zeitlichen Auflösung.

b. Prüfung der Genauigkeit und Konsistenz der Durchflussgeschwindigkeit mit kalibrierten Partikeln,

c. Anpassung der Auflösung und Intensität mit geeigneten Qualitätsprüfpartikeln nach den experimentellen Anforderungen

Probenvorbereitung

1. Gleichmäßig suspendieren Sie die Zellprobe, um die Zellreinigung und Ablagerung zu vermeiden. Dies kann durch Zentrifugierung und Wiedersuspension der Probe erreicht werden.

Verwenden Sie qualitativ zuverlässige Zellfärbungsmethoden, um die Genauigkeit und Konsistenz der Färbung zu gewährleisten.

3. Anpassen Sie die Konzentration der Probe, um zu vermeiden, dass übermäßige Konzentration und Zellen zu dünn und Signalverlust.

Qualitätskontrolle der Probenreinigkeit

a. Verwenden Sie geeignete negative und positive Kontrollen, um die Reinheit der Färbung zu bewerten. Zum Beispiel die Verwendung von unfärbten Zellen als negative Kontrolle und die Verwendung von positiv markierten Zellen als positive Kontrolle

b. Überprüfen Sie regelmäßig die Konsistenz der Färbungsergebnisse, um sicherzustellen, dass die negativen Kontrollzellen keine positiven Marker haben

CytoFLEX Einsatzbereite tägliche QC Qualitätskontrolle Fluoreszenz Mikrosphäre Instrument KalibrierungChinesisch Einführung

CytoFLEX Ready-to-Use Daily QC Fluorescence Microsphere ist eine Suspension von 3 μm Fluorescence Microsphere, die für die tägliche Validierung von Flow-Zytometrie-optischen Ausrichtungen und Fluid-Flow-Systemen verwendet werden kann. Das Produkt wird in vorverdünnter, gebrauchsfertiger Form erhältlich, die bei folgenden Wellenlängen zwischen 355 nm und 800 nm fluoreszierend emittiert: 355 nm, 375 nm, 405 nm, 488 nm, 561 nm und 638 nm. Die Mischung wird in einem wasserlichen Medium mit Oberflächenaktiven und Stabilisatoren suspendiert. Der C65719 ersetzt die tägliche CytoFLEX QC-Fluoreszenzkörper B53230 für die CytoFLEX-Zytometrieplattform.

CytoFLEX Einsatzbereite tägliche QC Qualitätskontrolle Fluoreszenz Mikrosphäre Instrument KalibrierungEnglisch

CytoFLEX Ready to Use Daily QC Fluorospheres ist eine Suspension von 3 µm fluoreszierenden Mikrosphären, die zur täglichen Überprüfung der optischen Ausrichtung und des Fluidiksystems des Strömungszytometers verwendet werden können. Dieses Produkt wird in einem vorverdünnten, gebrauchsfertigen Format mit einer Fluoreszenzmession zwischen 355 nm und 800 nm bei Anregung bei: 355 nm, 375 nm, 405 nm, 488 nm, 561 nm und 638 nm bereitgestellt. Die Mischung wird in einem wässrigen Medium suspendiert, das Tenside und Stabilisatoren enthält. Klicken Sie hier für CytoFLEX Ready to Use Daily QC Fluorospheres Gebrauchsanleitung. Dieses Produkt ersetzt die CytoFLEX Daily QC Fluorospheres, B53230 und sollte mit der CytoFLEX Zytometer Plattform verwendet werden.

CytoFLEX Einsatzbereite tägliche QC Qualitätskontrolle Fluoreszenz Mikrosphäre Instrument KalibrierungBetriebsprozesse

1Verwenden Sie den vom Hersteller empfohlenen Filtersatz zur Erfassung der entsprechenden Fluoreszenzparameter (siehe CytoFLEX Platform IFU).

2Stellen Sie sicher, dass die Zielwertdatei für die spezifische Menge CytoFLEX Ready to Use Daily QC Fluorospheres in die Flow-Zytometer-Software geladen wurde. Anweisungen zum Importieren Ihrer losspezifischen Zielwertdatei finden Sie in Ihrer CytoFLEX Platform IFU.

3Die CytoFLEX Ready to Use Daily QC Fluorospheres-Flasche mit einem Vortexmixer für 2-3 Sekunden kräftig mischen.

4Hinzufügen:

4. 10 Tropfen Fluorosphären in eine Röhre, wenn Sie den Semi-Automatischen (Röhre) Probeninjektionsmodus verwenden.

b. 3-4 Tropfen Fluorosphären in einen Brunnen entweder für Standard 96-Brunnen-Platte oder Deep-Brunnen-Platte für den Plattenlader-Injektionsmodus.

5Führen Sie das Qualitätskontrollprotokoll (QC) gemäß den Anweisungen in Ihrer CytoFLEX Plattform (IFU) aus.

CytoFLEX Einsatzbereite tägliche QC Qualitätskontrolle Fluoreszenz Mikrosphäre Instrument KalibrierungHinweise

1. Das Produkt ist ein fertiges Produkt, das keine zusätzliche Formulierung erfordert und direkt verwendet wird.

2. Wenn aufgeteilt, gut versiegelt, innerhalb von 5 Tagen fertig.

3. Die fluoreszierende Mikrokugel bleibt lange still und setzt sich natürlich ab. Stellen Sie sicher, dass die Fluoreszenzkugel vor der Verwendung ausreichend schwer und gut geschüttelt wird.

4. Verwenden Sie keine fluoreszierenden Kugeln, die die Gültigkeitsdauer auf dem Etikett der Probenflasche überschreiten.

5. Das Produkt soll nicht gefriert werden.

Verwenden Sie bei der Behandlung dieses Reagents gute Laborpraktiken (GLP).

7. Dieses Reagenz enthält Konservierungsmittel, wenn Haut oder Augenkontakt auftritt, waschen Sie es bitte rechtzeitig tief mit Wasser.

Der Stream-Zytometer-Kalibrierungsbericht soll alle Details des Stream-Zytometer-Kalibrierungsprozesses aufzeichnen. Der Bericht sollte folgende Informationen enthalten:

1. Datum und Uhrzeit

2. Kalibrierungsdaten für Flüssigkeitssysteme

3. Kalibrierungsdaten des Lasersystems

4. Kalibrierungsdaten des optischen Systems

5. Standardpartikelkalibrierungsdaten

6. Kalibrierung von Kalibrierungsdaten

7. Probleme oder Anomalien, die während der Kalibrierung festgestellt wurden

8. Name und Unterschrift des Technikers, der die Kalibrierung durchführt