pU6-Ets2(Maus)-sgRNA3-Cas9-EGFP

VerhandlungsfähigAktualisieren am05/06

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名称 pU6-Ets2(Maus)-sgRNA3-Cas9-EGFP$r$n 别称 CGACTCCAGAGAACGGTG$r$n 质粒宿主哺乳细胞$r$n质粒用途基因编辑

Produktdetails

Name	pU6-Ets2(Maus)-sgRNA3-Cas9-EGFP
Nicht nennen.	CGACTCTCCAGAGAACGGTG
Plasmidenwirt	Säugezellen
Plasmidenverwendung	Genbearbeitung
Typ des Segments	CRISPR
Teile der Arten	Mäuse
Protonuklearer Widerstand	Verstärker
fluoreszierende Kennzeichnung	Grün
Starter	U6
Kopierer	pUC
Gefühle	Stbl3
Temperatur	37 Grad.
Hintergrundträger	Der pX458
正向引物	U6-F

Hinweis: Suchen Sie vor der Umsetzung genau nach dem entsprechenden Antibiotikanamen, der Antibiotikakonzentration, dem Empfindungszustandsnamen und der Kultivierungstemperatur des Plasmides.

1Bitte nach Erhalt des Trockenpulvers5000rpmZentrifugieren1minSchließen Sie sich wieder an.20μl bis 50μlsteriles Wasser oderpH 8,0der1*TEPuffer zur Auflösung von Plasmiden, Raumtemperatur1min；

2von-80℃Entfernen Sie den entsprechenden Gefühlszustand aus dem Kühlschrank, legen Sie ihn auf die Eisbox auftauen und markieren;

3、取2 μlPlasma hinzugefügt100 μlGefühle, Eisbad30 Minuten；

4、42℃Hitze90er JahreNoch ein Eisbad.2 Minuten；

5Beitritt900 μlUnwiderstehlichLBflüssiges Kulturmedium,180 U/minSchockkultur45 Minuten；

6、6000rpmZentrifugieren5 MinutenNur bleiben.100ulMischung von Bakterien;

7Die vermischten Bakterien werden zur entsprechenden Resistenz hinzugefügt.LBAuf die Platte, gießen Sie die angemessene Menge an Glasperlen und beschichten Sie die Flüssigkeit;

8Platten direkt kultivieren1 StundeWieder umgekehrt kultiviert.12h~16h；

9Auswahl der Monoklone-Kolonien zur GegenresistenzLBSchüttelkultur im flüssigen Medium12h~16hEntfernung von Plasmiden nach Experimenten

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