Brongen Test Kit

Brongen Test Kit

Verpackungsspezifikationen) 25T/Box & 50T/Box

[Prüfprinzip]

Dieser Kit ist spezifisch für dieses Gen entworfen und enthält in der zu prüfenden Probe dieDie DNADer Fall,PCRDie Reaktion erfolgt und das Fluoreszenzsignal wird freigegeben. Gebrauch von InstrumentenPCRDie entsprechenden Fluoreszenzsignale werden während des Prozesses in Echtzeit überwacht und ausgegeben, um die qualitative Analyse der Testergebnisse zu ermöglichen.

[Hauptbestandteile]

[Lagerbedingungen und Gültigkeitsdauer]Lichtschutz-20℃Folgende Aufbewahrung, um wiederholtes Einfrieren zu vermeiden, Gültigkeitsdauer12Monat.

[Anwendungsgeräte]ABISerie,Bio-RadSerie,Agilent Stratagene MXSerie,Roche LightCycler R480、Cepheid SmartCycler、Rotor-GenSerie, Hangzhou Bogie-Serie und andere Multikanal-Echtzeit-Fluoreszenz-QuantifizierungPCRInstrument.

[Musteranforderungen]

1. Bei der Verwendung von Originalproben. Proben (Gehirn- und Wirbelsäulenflüssigkeit, Venenblut, Gelenkflüssigkeit des Patienten, Venenblut von kranken Tieren, Milch, Kolonien, Müsse usw.) sollten frisch gesammelt werden und Originalproben mit doppeltem Sterilisierungswasser oder physiologischer Salzsuspension für Sterilisierung verwenden.

2. Wenn nach der Sterilisation durchgeführt werden mussPCRBei der Prüfung sollte die Originalprobe mit selektiver Sterilization sterilisiert werden.

3. Wenn die Probe nicht sofort nachgewiesen werden kann, kann sie2～8℃Übernachtung gekühlt aufbewahren; Für eine langfristige Aufbewahrung sollten die Proben gefroren werden.-20℃～-80℃。

[Prüfmethode]

1. Reagenzverbereitung (Reagenzverbereitungsbereich)

（1Entfernen Sie das Kit aus dem Kühlschrank,Entfernen Sie das für das Experiment erforderliche Reagenz aus dem Kit, schmelzen Sie vollständig und mischen Sie es und zentrifizieren Sie es sofort, um die an der Rohrwand befestigte Flüssigkeit zu entfernen.

（2Berechnung der für das Experiment erforderlichen Reaktionen (n), und berechnet die verschiedenen Dosen, die für das Experiment erforderlich sind, anhand des in der folgenden Tabelle dargestellten Reaktionssystems.

n =Negative Kontrollzahl (1T）+Positive Kontrollzahlen (1T）+Fehlerreserve (1T）+Anzahl der Proben

（3Die oben genannten Reagenzien in sterile Zentrifugerrohre hinzufügen und sofort nach vollständiger Mischung zentrifugieren. nach20 μL/Die Rohrverteilung verteilt das Reagenz aufPCRReaktionsröhre.

（4(Decken Sie fest)PCRNach der Reaktion wirdPCRDie Reaktionsrohre werden in den Probenbehandlungsbereich übertragen. Reste Reagenzien zurückgegeben-20℃Im folgenden Kühlschrank gefriert aufbewahren.

2.Probenvorbereitung (Probenbehandlungsbereich)

VerwendenDNA und RNAExtrahieren Sie die Nukleinsäure aus dem Kit, die spezifische Operation folgt den Anweisungen des Kits

3.Zum Beispiel

Vorbereitet in den oben genanntenPCRDie behandelten Proben werden jeweils in die Reaktionsprobenröhre hinzugefügtDie DNAJedes5 μlEndvolumen25 μl/Rohr, decken Sie es ab.PCRNach dem Mischen der Reaktionsdeckel sofort niedrige Drehzahl Zentrifuge, übertragen zuPCRauf dem Instrument. Negative Kontrolle und positive Kontrolle5 μLNegative oder positive Kontrolle im Kit, Endvolumen25 μl/Rohr, decken Sie es ab.PCRNach dem Mischen der Reaktionsdeckel sofort niedrige Drehzahl Zentrifuge, übertragen zuPCRauf dem Instrument.

4.PCR（PCRErweiterte Zone)

（1Probenbehandlungsbereich bereitPCRReaktionsröhre, die in Echtzeit fluoreszierende Quantifizierung platziertPCRProbenschlitz entsprechende Position und Aufzeichnung der Platzierungsreihenfolge.

（21) Die folgenden Parameter für die Nukleensäure-Verstärkung des Instruments festlegenPCRErweiterung.

Hinweis:ABISerie FluoreszenzPCRGerät bei der Einstellung nicht ausgewähltROXKorrektur, Einstellung der Löschgruppe AuswahlKeine。

Referenzwert (Referenzbereich)

1.Wirksamkeitsbestimmung der Kit:

（1Positive Kontrolle: typischSVergrößerungskurve oderCtWerte≤35。

（2Negative Kontrolle:CtWert>38Oder keineCtWerte, die geradlinig oder leicht schräg sind und keine exponentielle Wachstumsperiode haben.

2.Probenergebnisse bestimmen:

（1Positiv: ProbentestsCtWerte≤35Es gibt eine deutliche exponentielle Wachstumsperiode.

（2Verdächtig: TestergebnisseCtWert in35～38im Rahmen. Die Proben sollten wiederholt untersucht werden, z. B. wiederholte Testergebnisse.CtDer Wert bleibt35～38Im Bereich gibt es eine offensichtliche exponentielle Wachstumsperiode, die als positiv oder sonst als negativ bestimmt wird.

（3Negativ: Testergebnis der ProbeCtWert>38Oder keineCtWert.

[Erklärung der Testergebnisse]

(Einschränkungen der Prüfmethode)

1. Fälschungsnegative Ergebnisse können auftreten, wenn die Nukleinsäurekonzentration in der Testprobe niedriger als in diesem Kit nachgewiesen wird.

2. Die falsche Handhabung der untersuchten Probe während der Sammlung, des Transports, der Lagerung und der Verarbeitung kann leicht verursacht werdenDNADer Abbau führt zu falschen negativen Ergebnissen.

Eine Kreuzkontamination der Probe während der Entnahme, des Transports, der Lagerung und der Verarbeitung kann gefälschte positive Ergebnisse erzielen.

[Produktleistungsindikatoren] Produkterkennung beschränkt sich auf10³Kopien/mlProdukteLebenslaufWerte≤3%。

[Achtung]

1. Die Labore, die diese Kit verwenden, werden streng in Übereinstimmung mit den in den betreffenden Teilen des Landes erlassenen Normen für die Verwaltung von Laboren für Genamplifikationsprüfungen verwaltet;

2. Um zu vermeidendie RNAAbbau, die Probenbehandlung sollte0-4℃Betrieb unter Bedingungen und unmittelbar nach Abschluss des Experiments an Bord zu prüfen; Geräteverbrauchsmaterialien, die bei der Probenbehandlung verwendet werden, müssen nukleazyfrei behandelt werden;

3. Alle regionalen Gegenstände sind speziell bestimmt und dürfen nicht kreuzverwendet werden, um Verschmutzung zu vermeiden; Nach Abschluss der Prüfung sollte der Arbeitstisch sofort gereinigt werden;

4. Bei der Absorption der Reaktionsflüssigkeit sollte die Erzeugung von Blasen so weit wie möglich vermieden werden; aufPCR Vor dem Instrument sollte beachtet werden, ob die einzelnen Reaktionsrohre dicht abgedeckt sind, um zu vermeiden, dass die Flüssigkeit verdampft, was zu ungenauen Ergebnissen führt;

5. Alle Reagenzien in der Kit sollten vor der Verwendung bei normaler Temperatur vollständig geschmolzen und umgehend zentrifugiert werden;

Die in der Kit enthaltenen negativen und positiven Kontrollen müssen vor der ersten Verwendung vollständig in den Probenvorbereitungsbereich übertragen und getrennt aufbewahrt werden.

7. Um Fluoreszenzstörungen zu verhindern, sollte direkter Kontakt mit nackten Händen vermieden werdenPCRReaktionsröhre und sollte vermieden werdenPCRKennzeichnung auf der Reaktionsröhre;

8. Der Saugkopf, der während der Prüfung verwendet wurde, sollte direkt auf den10%Hypochlorsäure im Abfallbehälter, das Ende der PrüfungPCR Reaktionsrohre, Tabu-Deckel geöffnet und nach Sterilisation mit anderen Abfällen verworfen; Arbeitstisch und verschiedene Versuchsmittel sollten regelmäßig verwendet werden 10%Hypochlorsäure,75%Alkohol oder UV-Licht zur Desinfektion;

Die Parameter für die Verstärkung des Instruments müssen gemäß den einschlägigen Anforderungen dieser Anweisung festgelegt werden; Verschiedene Chargennummern können nicht gemischt werden; und während der Gültigkeitsdauer verwendet werden.Produkte nur für wissenschaftliche Zwecke。