Multiple Immunochemie Färbung

VerhandlungsfähigAktualisieren am05/06

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Multiple-Immunhymose-Färbungsprinzip: Verwenden Sie das Prinzip der spezifischen Bindung von Antigenen und Antikörpern, um einen Antigen an das Zielantigen in Gewebe oder Zellen zu binden; Hinzufügen von HRP-gekennzeichneten Diodes, es kann mit einer Antispezifischkeit binden, um einen Komplex von "Antigen-Antianti-HRP-gekennzeichneten Diodes" zu bilden, fügen Sie Tyrosin-Fluoreszenzfarbstoff hinzu, in Anwesenheit von HRP und * wird Tyrosin aktiviert und covalent mit Proteinresten in der Nähe des Antigens gebunden, eine große Menge an Fluoreszen wird in dem Antigen-Antikörper-Bindungsbereich abgelegt, so dass das Signal verstärkt wird, indem Sie die oben genannten Schritte mehrmals wiederholen, jedes Mal mit einem anderen Antigen und dem entsprechenden Tyrosin-Fluoreszenzfarbstoff können Sie mehrere Ziele erreichen

Produktdetails

Multiple Immunochemie FärbungExperimentelle Schritte

Probenvorbereitung: einschließlich der Behandlung von Paraffinschneiden, Gefrierschneiden oder Zellreptilen, wie Fixierung, Antigenreparation, Blockierung endogener Peroxidase usw.

Eine Inkubation: Tropfen mit Antikörper-Verdünnung verdünnen Sie eine gute Inkubation, in der Lichtschutz-feuchte Box für eine gewisse Zeit.

Sekundäre Anti-Inkubation: Nach dem Waschen mit einem Anti-HRP-Marker Sekundäre Anti der entsprechenden Gattung, Lichtschutz Raumtemperatur inkubieren.

TSA Fluoreszenzfarbstoff Färbung: Tropfen Caesamin Fluoreszenzfarbstoff, nach einer Raumtemperatur-Reaktion für eine Weile gewaschen.

Antikörper-Waschen: Wäsche die Antikörper der vorherigen Runde mit Methoden wie thermischer Reparatur oder Antikörper-Entwaschung, um die nächste Runde zu markieren.

Wiederholte Markierung: Wiederholen Sie die oben genannten Schritte und verwenden Sie verschiedene Anti- und Fluoreszenzfarbstoffe, um mehrere Markierungen zu erreichen.

Reprofizierung des Zellkernes und des Dichtungsmittels: Reprofizierung des Zellkernes mit DAPI und anderen Kernfärbstoffen, Tropfen und Anti-Fluoreszenz-Auslöschdichtungsmittel.

Spiegelfotografie: Beobachten und erfassen Sie Bilder unter Geräten wie Fluoreszenzmikroskopen.

Multiple Immunochemie FärbungHinweise

Auswahl und Optimierung von Antikörpern: Auswahl von hochspezifischen, bewährten Antikörpern und Optimierung von Bedingungen wie Konzentration und Inkubationszeit von Antikörpern.

Epitopische Maskierungsprobleme: Achten Sie auf die Färbungsreihenfolge der Antikörper und vermeiden Sie Epitopische Maskierungen, die durch Anpassung der Reihenfolge der Antikörper oder andere Methoden gelöst werden können.

Experimentelle Kontrolleinstellungen: Setzen Sie positive und negative Kontrollen ein, um die Genauigkeit und Zuverlässigkeit der Experimentergebnisse zu gewährleisten.

Kontrolle der Signalverstärkungsmehrfache: Abhängig von den spezifischen experimentellen Anforderungen und der Fluoreszenzsignalintensität ist eine vernünftige Wahl, ob Mittel wie TSA-Verstärker zur Kontrolle der Signalverstärkungsmehrfache hinzugefügt werden.

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