Immunhistochemische Prüfung

Immunhistochemische PrüfungExperimentelle Schritte:

1. verpackte Probe mit Paraffin Slicer Schnitt 3um

1 Stunde bei 60°C

3. Diphenyl I 10 Minuten abwachsen

4. Diphenyl II 10 Minuten abwachsen

5. Gradienter Alkohol: 100% Alkohol 5 Minuten, 100% Alkohol 5 Minuten, 95% Alkohol 5 Minuten, 80% Alkohol 5 Minuten, Leitungswasser 5 Minuten spülen

6. Durchführen Antigen Reparatur: Stellen Sie die Scheiben in 0,1 mol / L und ph = 6,0 Zitronsäure Reparatur, kochendes Wasser Bad für 20 Minuten, natürliche Abkühlung nach dem Aufhören der Erwärmung für 20-30 Minuten

7. 3mal mit PBS für 3 Minuten, Gruppierung Pinsel, Tropfen Sie Peroxid hinzu und inkubieren Sie 20min

8. 3 Minuten 3 Mal mit PBS, Tropfen und geschlossenes Serum geschlossen 1h

9. Trocknen, Tropfen und eine geeignete Konzentration in einer resistenten nassen Box 4 ° über Nacht inkubieren

3 Minuten x 5 Mal mit PBS abwaschen

11. Trocknen, Tropfen und inkubieren Sie in der Inkubationsbox bei Raumtemperatur für 1 Stunde (beachten Sie, dass die zweite Antirasse, Sommer 30min, Winter 1h)

3 Minuten x 5 Mal mit PBS abwaschen

13. Trocknen, Tropfen und DAB-Anzeige, Wasser

14. Sumucin-Färbung 5min (neu konfigurierte Sumucin je nach Verfügbarkeit)

15. Flußwasser spülen Sie das überschüssige Sumucin, Differenzierung in der Differenzierungsflüssigkeit für 1 Sekunde

16. Flußwasser spülen 5min

Gradienten Alkohol: 80% Alkohol 5 Minuten, 95% Alkohol 5 Minuten, 100% Alkohol 5 Minuten, 100% Alkohol 5 Minuten, Dimethyl II transparent 5min, Dimethyl I transparent 5min (wenn es vollständig transparent ist, kann die Zeit angemessen verlängert werden)

18. Neutrale Baumklebe

19. Spiegelung