Leishman AB Antikörper ELISA Diagnostik Kit

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Leishman AB Antikörper ELISA Diagnostik Kit

Guangzhou Jinlun Biotechnologie Co., Ltd.

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Leishman AB Antikörper ELISA Diagnostik Kit

Prüfprinzipien

Indirekte Pharase-kombinierte Immunabsorption-Experimente (ELISA). Standards für bekannte LSM-Ab-Konzentrationen, Proben mit unbekannten Konzentrationen werden in Mikroporose-Labels getestet. Zunächst werden LSM-Ab und markierte Antikörper gleichzeitig erwärmt. Nach dem Waschen mit der Familie

Markierte HRP. Nach Warmung und Waschen entfernen Sie die nicht gebundenen Enzymverbindungen und fügen Sie Substrate A, B und die Enzymverbindungen gleichzeitig hinzu.

Verwenden. Farbe erzeugen. Die Farbe ist proportional zur Konzentration von LSM-Ab in der Probe.

Eigenes Material

destilliertes Wasser.

加样器： 5ul, 10ul, 50ul, 100ul, 200, 500ul und 1000ul.

Oszillatoren und Magnetmischer etc.

Sicherheit

Vermeiden Sie den direkten Kontakt mit der Endflüssigkeit und dem Substrat A und B. Spülen Sie diese Flüssigkeiten so schnell wie möglich mit Wasser ab.

Nicht essen, trinken, rauchen oder Kosmetik während des Experiments verwenden.

Absaugen Sie keine Inhaltsstoffe aus dem Kit mit dem Mund.

Betriebsmaßnahmen

Das Reagenz sollte gemäß der Etikettenanleitung gelagert und vor der Verwendung auf Raumtemperatur zurückgesetzt werden. Überverdünnte Standardprodukte sollten weggeworfen und nicht aufbewahrt werden.

Die im Experiment nicht verwendeten Platten sollten sofort wieder in die Beutel gelegt und versiegelt aufbewahrt werden, um eine Verschlechterung zu vermeiden.

Andere nicht verwendete Reagenzien sollten verpackt oder abgedeckt sein. Mischen Sie Reagenzien mit unterschiedlichen Chargennummern nicht. Vor der Verwendung.

Verwenden Sie einen einmaligen Saugkopf, um Kreuzverschmutzung zu vermeiden, und vermeiden Sie die Verwendung eines Probenmessars mit Metallteilen, wenn Sie die Endflüssigkeit und die Substratflüssigkeiten A und B absaugen.

Konfigurieren Sie die Waschflüssigkeit mit einem sauberen Kunststoffbehälter. Die verschiedenen Zutaten und Proben in der Kit werden vor dem Gebrauch vollständig vermischt.

Beim Waschen der Enzym-Markierungsplatte sollte vollständig getrocknet werden, nicht das Wasser absorbierende Papier direkt in das Enzym-Markierungsreaktionsloch setzen.

Substrat A sollte flüchtig sein, um den Deckel nicht lange zu öffnen. Substrat B ist empfindlich für Licht und vermeidet langfristige Exposition. Vermeiden Sie Kontakt mit den Händen, es ist giftig. Wirklich

Der OD-Wert sollte sofort nach Abschluss der Prüfung gelesen werden.

Die Reihenfolge, in der das Reagenz hinzugefügt wird, sollte konsistent sein, um sicherzustellen, dass alle Reaktionsplatten gleich wärmen.

Die Temperaturzucht erfolgt nach dem in der Anleitung angegebenen Zeitpunkt, der Menge und der Reihenfolge.

Verfahren zur Sammlung, Verarbeitung und Aufbewahrung von Proben

Serum - Vermeiden Sie jede zelluläre Stimulation während der Operation. Verwenden Sie Testrohre, die keine Thermogene und Endotoxine enthalten. Nach der Sammlung von Blut 1000 x g Zentrifugieren für 10 Minuten

Das Serum und die roten Blutkörperchen werden schnell und vorsichtig getrennt.

Plasma --- EDTA, Zitrate, Hepatin Plasma können zur Detektion verwendet werden. 1000 x g Zentrifugieren, um die Partikel für 30 Minuten zu entfernen.

Zellreinigung - 1000 x g Zentrifuge für 10 Minuten, um Partikel und Polymere zu entfernen.

Aufbewahrung - Wenn die Probe nicht sofort verwendet wird, sollte sie in kleine Teile unterteilt werden, um wiederholtes Gefrieren zu vermeiden. Verwenden Sie möglichst kein Blut oder Hyperblut.

Fettblut. Wenn es eine große Menge an Partikeln im Serum gibt, müssen Sie vor der Detektion zentrifizieren oder filtrieren. Nicht auf 37 ° C oder höher aufheizen. Es sollte bei Raumtemperatur aufgefroren werden und

Stellen Sie sicher, dass die Probe gleichmäßig und vollständig aufgefroren ist.

Vorbereitung von Reagenzien

Standardprodukte: Serienverdünnungen von Standardprodukten sollten während des Experiments vorbereitet werden und können nicht gelagert werden. Vor der Verdünnung wird das Standardprodukt vermischt.

Verdünnung des Waschpuffers (50 x): 50 mal verdünnt mit destilliertem Wasser.

Betriebsschritte

Vor der Verwendung werden alle Reagenzien vollständig vermischt. Lassen Sie die Flüssigkeit nicht eine große Menge an Schaum erzeugen, um zu vermeiden, dass eine große Menge an Blasen bei der Probenahme hinzugefügt wird, um Fehler bei der Probenahme zu erzeugen

Schlecht.

Bestimmen Sie die Anzahl der gewünschten Platten basierend auf der Anzahl der zu messenden Proben plus der Anzahl der Standardprodukte. Jedes Standard und leere Loch wird empfohlen, ein Verbundloch zu machen. Jede Probe basiert auf

Abhängig von Ihrer Anzahl können Sie möglichst viele Löcher verwenden.

50 µl verdünntes Standardprodukt in das Reaktionsboch und 50 µl zu prüfende Probe in das Reaktionsboch hinzufügen. Fügen Sie sofort 50 µl des markierten Antikörpers hinzu.

Abdecken Sie die Folie, schwingen Sie leicht und mischen Sie sie bei 37 ° C für 1 Stunde.

Entfernen Sie die Flüssigkeit im Loch, füllen Sie jedes Loch mit Waschflüssigkeit, schwingen Sie für 30 Sekunden, entfernen Sie die Waschflüssigkeit und trocknen Sie sie mit absorbierendem Papier. Wiederholen Sie diesen Vorgang dreimal. Wenn Sie eine Spülmaschine verwenden

Die Anzahl der Wäsche wird einmal erhöht.

Zu jedem Loch werden 80 µl von Affinitätsketenzym-HRP hinzugefügt, leicht oscilliert und 37 ° C für 30 Minuten gemischt.

Entfernen Sie die Flüssigkeit im Loch, füllen Sie jedes Loch mit Waschflüssigkeit, schwingen Sie für 30 Sekunden, entfernen Sie die Waschflüssigkeit und trocknen Sie sie mit absorbierendem Papier. Wiederholen Sie diesen Vorgang dreimal. Wenn Sie eine Spülmaschine verwenden

Die Anzahl der Wäsche wird einmal erhöht.

Fügen Sie die Substrate A und B je 50 µl zu jedem Loch hinzu, mischen Sie leicht und kühlen Sie bei 37 °C für 10 Minuten. Vermeiden Sie Licht.

Entfernen Sie die Enzymmarker und fügen Sie schnell 50 µl Termination hinzu, die Ergebnisse sollten sofort nach der Zugabe der Termination gemessen werden.

Messung der OD-Werte der Löcher bei einer Wellenlänge von 450 nm.

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