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Gebäude 26, 1299 East Road, Rainhua District, Changsha, Hunan
Hunan Zhongcheng Weikang Biotechnology Co., Ltd.
Gebäude 26, 1299 East Road, Rainhua District, Changsha, Hunan
Diese Kit ist AnwendungELISATechnisch entwickelte Arzneimittelrückstandsprüfprodukte,Im Vergleich zur Instrumentanalyse können Muskeln kostengünstig und schnell erkannt werdenOrganisation、Futter, Urin und andere ProbenderLectopamingehalt。
3. Kreuzreaktionsrate
Kreuzreaktionsrate mit Analogen:
Lectopamin…………………………………100%
Sardinianol……………………………………﹤1%
Toban-Salzsäure………………………………﹤1%
Clenbuterol ………………………………﹤1%
4. Zusammensetzung der Kits
Enzymetiketten1Blöcke,96Löcher/Brett
Standardflüssigkeit5Flasche (1im ml/Flaschen):
0 ppb、0. 1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb
Enzymmarker ………………………………………7mL
Antikörper Arbeitsflüssigkeit ………………………………………10 mL
SubstratflüssigkeitA ………………………………………7mL
SubstratflüssigkeitB………………………………………7mL
Endflüssigkeit……………………. .…………………7mL
10×Konzentrierte Waschflüssigkeit………………………………40mL
2×KonzentrationMehrfachlösung………………………………50mL
Bedienungsanleitung……………………. .………………1Portion
Fünf,Eigene Geräte und Reagenzien
(1)Geräte
Mikroporenzyme-Calibrator(450 im nm)Stickstofftrockner;Oszillator;Zentrifuge• Wirbelsystem; Elektronische Waage (Sensor)0.01 g)。
(2)Ausrüstung
Kapazität Flasche:100 ml,500 ml,1000 mL
EinwegSpuren Pipette:20 μL~200 μL,100 μL~1000 μL
MehrwegigSpuren Pipette:30 μL~300 μL
(3(Reagenzien)
Methanol, Acenitril, Ortohexan, *, konzentrierte Salzsäure, deionisiertes Wasser
6. Herstellung der Lösung
Vorbearbeitung der Probe:
Flüssigkeitsverteilung1:1M NaOHLösung
Berufung4.0 g NaOHplusIonisches Wasseraufgelöst,Anpassung an100 ml。
Flüssigkeitsverteilung2:0.1M HCl
Messung0.83 mLKonzentrierte Salzsäure in deionisiertes Wasser hinzugefügtAnpassung an100 ml。
Flüssigkeitsverteilung3:25%Methanol
Messung25 mlMethanol, hinzugefügt75 mlIn Ionenwasser gehen und vollständig vermischen.
Flüssigkeitsverteilung4:25%Methanol-0,1 MHCLLösung
Messung20 ml 0,1 mSalzsäureLösungHinzufügen80mL 25%MethanolIn der Lösung und vollständig vermischen.
Flüssigkeitsverteilung5:Probenlösung
2×KonzentrationMehrfachlösungBitte drücken Sie vor der Verwendung1:1Verdünnung (1PortionKonzentrationProbenlösung+ 1Deionisiertes Wasser)。
Flüssigkeitsverteilung6:Waschflüssigkeit
10×Die konzentrierte Waschflüssigkeit drücken Sie vor der Verwendung1:9Verdünnung (1KonzentrationWaschenFlüssigkeit + 9Deionisiertes Wasser (nach Bedarf konfigurierbar)。
7. Vorbehandlungsverfahren für Proben
Hinweis vor der Probenbehandlung:
(1Einmal-Saugköpfe müssen im Experiment verwendet werden und beim Absaugen verschiedener Reagenzien die Saugköpfe ersetzt werden.
(2Vor dem Versuch müssen verschiedene Versuchsgeräte überprüft werden, ob sie sauber sind, und saubere Versuchsgeräte müssen verwendet werden, um zu vermeiden, dass Verschmutzung die Versuchsergebnisse stört.
ProbenvorBearbeitungsschritte:
(A)Gruppen Gewebebehandlung (Hühner, Ente, Schweinemuskel)/Leber, Eier, Fisch, Garnelen usw.)
Behandlungsmethode 1:
1GenaueBerufung2.0±0.02 gGleichmäßigProbe in50 mLim Zentrifugerrohr;
2Beitritt0,5 mlVerdünnte Probenlösung (Dosierung)5Vollständige Oscillation2 MinutenSchließen Sie sich an8 ml AcenitrilGenau.Wirbelschwingung3 bis 5 MinutenRaumtemperatur.4000 U/minZentrifugieren10 Minuten;
3、 取2,5 mlOberflüssigkeit bisIn einem anderen Zentrifugerrohr,50~60℃ Stickstoff trocknen;
4Beitritt1 mL Ortohexan-gelöste Rückstände, hinzugefügt1 mlProbenlösung (Dosierlösung)5vollständig gemischt).30 sRaumtemperatur.4000 U/minZentrifugieren10 Minuten;
5Entfernen Sie das obere Hexan und nehmen Sie20 μLUnterflüssigkeit zur Analyse。
Behandlungsmethode 2:
1GenaueBerufung2.0±0.02 gGleichmäßigProbe in50 mLim Zentrifugerrohr;
2Beitritt6 ml25%Methanol-0,1 MHCLLösung,OszillationMischen3 ~ 5 Minuten,Raumtemperatur4000 U/minobenZentrifugieren10 Minuten(Hinweis: Wenn der Fettgehalt in der Gewebeprobe hoch ist, kann er nach der Oszillation eingesetzt werden.85Wasserbad nach 10 min);
3、取1 mlOberflüssigkeit bisDer andere2 mlZentrifugerrohr,beitreten20μL 1M* Lösung und vollständige Mischung (nach Mischung bestimmt)pH-WertWert, etwa7-8);
4、4000 U/minZentrifugieren3 bis 5 Minuten• Entfernen der Flüssigkeit20 μLZur Analyse。
(B)Urin, Serum
取20 μLDirekte Messung von klaren Urinproben oder Serum (z. B. Urinproben oder Serumstrübungen)
Filtern oder4000 U/minauf15℃Zentrifugieren10 MinutenBis klar
hellNicht verwendete Proben sollten gefriert aufbewahrt werden.
8. Schritte zur enzymbundenen Immundetection
Hinweis vor der Messung:
1、 Alle Reagenzien und die benötigten Mikroporenplatten werden vor der Verwendung auf Raumtemperatur erhoben.
2、 Alle Reagenzien sofort nach der Verwendung zurücksetzen2~8 ℃。
3、 Lassen Sie die Mikroporen während der Verwendung nicht trocknen.
4、 inELISADie Wiederholbarkeit in der Analyse hängt weitgehend von der Konsistenz der Platte ab, und der richtige Plattenbetrieb istELISABestimmung der Punkte im Verfahren.
5、 Vermeiden Sie bei allen thermostatischen Inkubationsprozessen die Beleuchtung mitAbdeckungDie Platte deckt die Mikroporenplatte ab.
Schritte zur Bestimmung:
1、Die erforderlichen Reagenzienund MikroporplattenEntnommen aus der Kühlumgebung und ausgeglichen bei Raumtemperatur30 MinJede Flüssigkeit muss vor der Verwendung geschüttelt werden. Achtung auf Standardflüssigkeiten2Ein paralleler Versuch.
2、Standardprodukte hinzufügen/Proben:plusEinenStandardprodukte/Proben20 μL/Löcher,beitretenEnzymeMarkierungen50 μL/Loch, wieder hinzufügenAntikörper Arbeitsflüssigkeit80 μL/Löcher,Leichte Schwingung vermischt,VerwendenAbdeckungAbdeckung gut,Raumtemperatur25℃Unterlichtreaktion30 Minuten。
3、Wäsche:Vorsichtig die Abdeckfolie öffnen und die Flüssigkeit im Loch trocknen,Reinigungsmittel hinzufügen 250 μL/Löcher, jedes MalEinweichen15~30 sVollständig waschen4~5Zweitens mit Wasser-Absorbierpapier.Machen.
4、Anzeige:Zuerst jedes Loch hinzufügenSubstratflüssigkeitA 50 μLJeder anschließen.SubstratflüssigkeitB 50 μLLeicht.OszillationMischen und inRaumtemperatur25℃untenLichtschutzreaktion10~15 Minuten。
5、Messung:Jedes Loch50 μLEndflüssigkeit,Leichte Schwingung vermischtIn der enzymatischen450 nmOrtsbestimmungODWert (empfohlen)450/630 nmDoppelte Wellenlänge-Prüfung, in5 MinDaten lesen).
neun,Ergebnisanalyse
Durchschnittswert der gemessenen Standardflüssigkeit oder Probenabsorption (B(Teilung durch die
Standardflüssigkeit (0Absorptionsgrad der Standardflüssigkeit (B0Wert wiederum multipliziert100%,
Erhalten Sie einen Prozentsabsorptionswert.
Prozentsabsorptionswert (%)=![]()
In der Standardkonzentration10Die untere Logarithmus istXAchse, AbsorptionsprozentYAchsen, zeichnen Sie eine Standardkurve. Ersetzen Sie den Prozentsabsorptionswert der Probe durch die Standardkurve und lesen Sie den entsprechenden Wert der Probe aus der Standardkurve als10die Potenz, multipliziert mit dem Verdünnungsvermöglichten, d.h. der in der Probe enthaltenenLectopaminMenge.
Berechnungen mit spezialisierter Analysesoftware für Reagenzketten ermöglichen eine genaue und schnelle Analyse großer Probenmengen.
zehn,Probeverdünnungsmehrfach
Tierorganisation:2mehrfach (Methode 1),4Zweimal (Methode 2)
Urin- und Serumproben:1doppelt
zehneinsEmpfindlichkeit, Genauigkeit und Präzision
Empfindlichkeit der Kit:0. 1ppb
Probentestgrenzen:
Gewebeprobe (Methode I)…………………0.2ppb
Gewebeproben (Methode II)…………………0.4 ppb
Urin- und Serumproben………………………0.1ppb
Recyclingquote:
OrganisationProben …………………………75±20%
Urin- und Serumproben………………………95±20%
PräzisionDer Variationskoeffizient der Kits ist kleiner als10%
zehnzweiAchtung
1Raumtemperatur unter20 ℃Oder das Reagenz und die Probe sind nicht auf Raumtemperatur zurückgekehrt.(20~25 ℃)Es führt zu allen Standards.ODDer Wert ist niedrig.
2Wenn die Platte während des Waschprozesses trocknet, wird die Standardkurve nicht linear und die Wiederholbarkeit schlecht sein.,Daher sollte der nächste Schritt sofort nach dem Trocknen durchgeführt werden.
3Verwenden Sie keine Kits mit einem Ablaufdatum; Verwenden Sie auch keine Reagenzien in einem Ablauf der Gültigkeitsdauer Kit, Doping mit einem Ablauf der Gültigkeitsdauer Kit kann zu einer Verringerung der Empfindlichkeit führen; Kein Austausch von Reagenzien mit einer anderen Chargennummer.
4Aufbewahrung der Kiste in2~8 ℃Nicht einfrieren, unbenutzte Mikroporplatten in selbstverschließende Beutel wieder versiegeln;Standardstoffe und farblose Haarfarbstoffe sind lichtempfindlich und sollten daher nicht direkt Licht ausgesetzt werden.
5FarbwerkstoffeEs gibt jede Farbe, die darauf hindeutet, dass das Haarfarbmittel verschlechtert ist, sollte aufgegeben werdenDas.
6、BeitrittSubstratflüssigkeitAnschließend die allgemeine Farbe15 MinGanz gut. Bei heller Farbe kann die Reaktionszeit verlängert werden.20 Min(oder länger), aber nicht mehr als30 Min;Im Gegensatz dazu wird die Reaktionszeit verkürzt.
zehnDrei.Lagerbedingungen und Aufbewahrungsdauer
Lagerbedingungen: In2~8 ℃Speichern der Kit。
Haltbarkeit: Diese Kit ist für12Monat.