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Hochleistungs-DSF-Analyzer

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Der High-Flow-DSF-Analyzer (Differential Scanning Fluorescence) ist ein fortschrittliches Instrument, das weit verbreitet in der Biopharmazeutischen Forschung, der Proteinstabilitätsanalyse und anderen Bereichen verwendet wird. Es kann Veränderungen in der Proteinkonstruktion während des Erwärmungsprozesses durch fluoreszierende Farbstoffe oder endogene Protein-Fluoreszenzsignale überwachen und die Schmelztemperatur Tm (die Temperatur, wenn das Faltprotein gleich ist mit dem Entfaltprotein) berechnen.

Produktdetails

I. Grundprinzipien

DSF (Differential Scanning Fluorimetry) ist eine Methode zur Beurteilung der thermischen Stabilität eines Proteins, indem eine Probe langsam auf einem fluoreszierenden quantitativen PCR-Gerät erhitzt wird, um die Menge an fluoreszierenden Farbstoffen zu erkennen, die sich während der Erhitzung an ein strukturverändertes Protein binden. Es kann Veränderungen in der Proteinkonstruktion während des Erwärmungsprozesses durch fluoreszierende Farbstoffe oder endogene Protein-Fluoreszenzsignale überwachen und die Schmelztemperatur Tm (die Temperatur, wenn das Faltprotein gleich ist mit dem Entfaltprotein) berechnen.

II. Hauptmerkmale

Hoher Durchsatz: Der DSF-Analyzer mit hohem Durchsatz erfasst möglichst viele Informationen in sehr kurzer Zeit. Zum Beispiel kann der Analysator des Modells SUPR-DSF 384 Proben in 60 bis 80 Minuten zur Stabilitätsanalyse und -screening durchführen.

Niedrige Kosten: Verwenden Sie eine Standard-384-Loch-Platte, keine speziellen Verbrauchsmaterialien und Kapillären, die nur etwa 100 Yuan auf einmal kosten.

Breiter Temperatur-Scanbereich: Mit einem breiten Temperatur-Scanbereich von 10 ° C bis 105 ° C kann mehrere Protein-Domänen abdeckt werden.

Hohe Empfindlichkeit: Mit einem hochempfindlichen CMOS-Detektor können Fluoreszenzveränderungen genau erkannt werden.

Kleine Probenverbrauchung: Die Probenverbrauchung beträgt nur 1020 μL und der Konzentrationsbereich von 0,05 mg/ml bis 250 mg/ml ist für die Stabilitätsanalyse in mehreren Phasen geeignet.

III. Komposition des Instruments

Der Hochdurchsatz-DSF-Analyzer besteht hauptsächlich aus folgenden Teilen:

Plattenleser: zum Laden von 384-Loch-Platten und zum Lesen von Probeninformationen.

Stimulierende Lichtquelle: In der Regel wird eine LED-Stimulierungswellenlänge wie 280nm mit einer Ausgangsleistung von 10mW verwendet.

Detektionssystem: umfasst Spektrometer und Detektionssysteme zur Detektion von Fluoreszenzsignalen. Der Wellenlängenbereich des Spektrometers liegt normalerweise zwischen 310 nm und 420 nm.

Datenverarbeitungssoftware: Zur Abbildung einer Kurve der Fluoreszenz-Intensität mit der Temperatur und zur Berechnung des Tm-Wertes der Proteinprobe und der zugehörigen Parameter durch die Anpassung der Boltzmann-Gleichung.

4. Betriebsprozess

Der Betriebsprozess eines DSF-Analyzers mit hohem Durchsatz umfasst in der Regel folgende Schritte:

Probenvorbereitung: Nach Mischung der Proteinprobe mit fluoreszierenden Farbstoffen in eine 384-Loch-Platte.

Einstellen von Parametern: Einstellen Sie die Erwärmungsgeschwindigkeit des Instruments, den Temperaturbereich und andere Parameter.

Beginnen Sie mit der Erkennung: Stecken Sie eine 384-Loch-Platte in das Instrument und beginnen Sie mit der Erkennung des Fluoreszenzsignals.

Datenanalyse: Verwenden Sie Datenverarbeitungssoftware zur Verarbeitung und Analyse der Testdaten, um den Tm-Wert und die zugehörigen Parameter der Proteinprobe zu ermitteln.

V. Anwendungsbereiche

Hochdurchsatz-DSF-Analyzer sind in einer Vielzahl von Anwendungsbereichen verfügbar, einschließlich, aber nicht beschränkt auf:

Proteinstabilitätsanalyse: Bewertung der Stabilität eines Proteins unter verschiedenen Bedingungen wie Temperatur, pH, Ionenstärke usw.

Medikament-Screening: Durch High-Flow-Screening-Technologien können Medikamentkandidaten, die an Zielproteine gebunden sind, schnell gescreent werden.

Protein Strukturforschung: Untersuchung der strukturellen und strukturellen Veränderungen von Proteinen, die eine starke Unterstützung für Forschung wie Proteinkristallisation bieten.

Untersuchung der Mechanismen der Inhibition von Kleinmolekularverbindungen: Untersuchung für das Screening von Inhibitoren von Kleinmolekularverbindungen und deren pharmakologischen Mechanismen.

6. Instandhaltung und Wartung von Geräten

Um den ordnungsgemäßen Betrieb und eine verlängerte Lebensdauer eines DSF-Analyzers mit hohem Durchsatz zu gewährleisten, sind regelmäßige Wartungen erforderlich. Dazu gehören die Reinigung der Oberfläche des Instruments, die Überprüfung der Lichtquelle und des Arbeitszustands des Erkennungssystems, die Kalibrierung des Instruments usw. Darüber hinaus müssen die Behandlungs- und Lagerbedingungen der Probe berücksichtigt werden, um die Auswirkungen von Verschmutzung und Verschlechterung der Probe auf die Experimentergebnisse zu vermeiden.

Zusammenfassend ist der DSF-Analyzer mit hohem Durchsatz ein leistungsstarkes und einfach zu bedienendes Instrument mit breiten Anwendungsmöglichkeiten in Bereichen wie Biopharmazeutische Forschung und Proteinstabilitätsanalyse.

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