Menschliches Fettzytokin (Chemerin) ELISA-Kit

Menschliches Fettzytokin (Chemerin) ELISA-Kit

Musteranforderungen
1. Probenbehandlung: (1) Wasserprobe nach -20 ° C wiederholt gefriert und dreimal geschmolzen, dann nach der Glasfaserfiltration
(2) Gewebe Proben mit Butanol: Methanol: Wasser (5: 25: 70 V: V: V) extrahiert oder nach Phase
Die Literatur soll so schnell wie möglich nach der Extraktion experimentiert werden. Wenn der Test nicht sofort durchgeführt werden kann,
Die Probe kann bei -20 ° C gelagert werden
Proben, die NaN3 enthalten, können nicht nachgewiesen werden, da NaN3 die Aktivität der Moringa Peroxidase (HRP) hemmt.

Menschliches Fettzytokin (Chemerin) ELISA-KitBetriebsschritte
1. Probenahme: Standardlöcher und leere Löcher (leere Kontrolllöcher ohne Proben und Enzym-Standard-Reagentien, die übrigen Schritte sind dieselben),
Probenlöcher zu messen. 50 µl in das Standardloch auf der Platte des Enzympakets und 40 µl Probenverdünnung in das zu messende Probenloch hinzufügen,
Anschließend werden 10 µl der Probe hinzugefügt (die Endverdünnung der Probe ist das 5-fache). Die Probe wird an die Unterseite des Enzym-Markierungslochs gelegt.
Die Menge berührt die Löcherwand nicht und schüttelt sanft.
2. Addition von Enzymen: 50 µl Enzym-Label-Reagenz pro Loch, mit Ausnahme von leeren Lochen.
3. Temperaturzucht: 37 ° C Temperaturzucht für 60 Minuten hinter der Dichtplatte.
4. Zuordnung: 30 mal mit destilliertem Wasser verdünnen
5. Waschen: Vorsichtig entfernen Sie die Folie, entfernen Sie die Flüssigkeit, trocknen Sie, füllen Sie jedes Loch mit Waschflüssigkeit, lassen Sie es nach 30 Sekunden entfernen, so
Wiederholen Sie 5 Mal und schütten Sie.
6. Farbdesignation: Zuerst das Farbdesignant A50 μl für jedes Loch hinzufügen, dann das Farbdesignant B50 μl hinzufügen, leicht schütteln und mischen, 37 ° C Lichtschutz
15 Minuten.
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7. Beenden: 50 µl Endflüssigkeit pro Loch hinzufügen, um die Reaktion zu beenden (zu diesem Zeitpunkt wird das blaue Gelb).
8. Messung: Null mit leeren Löchern, 450 nm Wellenlänge messen die Absorption (OD-Wert) der Löcher in der Reihenfolge. Die Messung muss beendet werden
Innerhalb von 15 Minuten nach der Flüssigkeit durchgeführt werden.

Berechnen
Mit der Konzentration des Standardobjekts als horizontale Koordinate, OD-Wert als longitudinale Koordinate, Zeichnen Sie die Standardkurve auf dem Koordinatenpapier, basierend auf der Probe
Der OD-Wert ermittelt die entsprechende Konzentration durch die Standardkurve; Vielfach verdünnt; oder berechnen Sie die Konzentration und den OD-Wert des Standards
Gleichung der linearen Regression der Quasi-Kurve, ersetzen Sie den OD-Wert der Probe durch die Gleichung, berechnen Sie die Probenkonzentration und multiplizieren Sie sie mit dem Verdünnungsvermöglichten,
Die tatsächliche Konzentration der Probe.

Hinweise
1. Die Kit aus der Kühlumgebung zu entfernen sollte nach Raumtemperatur-Gleichgewicht 15-30 Minuten verwendet werden können, wenn das Enzym-Markierungspaket nach dem Öffnen der Platte nicht
Nach dem Gebrauch sollte die Platte in einer versiegelten Beutel gelagert werden.
2. Konzentrierte Waschflüssigkeit kann kristallisiert werden, kann bei der Verdünnung im Wasserbad erhitzt werden, während das Waschen das Ergebnis nicht beeinflusst.
Jeder Schritt der Probenahme sollte ein Probenahmer verwenden und seine Genauigkeit regelmäßig korrigieren, um Testfehler zu vermeiden. Einmal Zeit ist am besten.
Kontrollieren Sie innerhalb von 5 Minuten, wenn eine große Anzahl von Proben, empfehlen Sie die Verwendung von Rifle Proben.
4. Bitte machen Sie die Standardkurve gleichzeitig bei jeder Messung, am besten ein 复杂res Loch. Bei zu hohem Gehalt an Messstoff in der Probe (OD-Wert der Probe)
Größer als der OD-Wert des ersten Lochs des Standardlochs), verdünnen Sie bitte zuerst ein bestimmtes Vielfaches (n-mal) mit der Probenverdünnungsflüssigkeit und messen Sie
Zum Abschluss multiplizieren Sie das Gesamtverdünnungsvermöglichte (×n×5).
5. Dichtfilm beschränkt sich auf eine einmalige Verwendung, um Kreuzverschmutzung zu vermeiden.
6. Untergrund bitte vor Licht aufbewahren.
7. streng in Übereinstimmung mit der Bedienungsanleitung durchgeführt, müssen die Testergebnisse anhand der enzymatischen Messwerte bestimmt werden. 8. Alle Proben, Waschflüssigkeiten und Abfälle müssen mit Infektionsstoffen behandelt werden.
Verschiedene Bestandteile dieses Reagents dürfen nicht gemischt werden.

Spezifikationen:

48 Stück/Box

Aufbewahrungsbedingungen und Gültigkeitsdauer
1. Aufbewahrung der Kits: 2 bis 8°C.
Gültigkeitsdauer: 6 Monate