C57BL/6 Zellspezifisches Kulturmedium

C57BL/6 Zellspezifisches Kulturmedium

Der C57BL/6Das Zellkulturmedium wurde vom Team sorgfältig optimiert und nach langfristigen Tests kann dieses ProduktDer C57BL/6Ein guter Wachstumszustand der Zellen.

Dieses Produkt ist bereits enthaltenDer C57BL/6Die verschiedenen Zutaten, die für das Zellwachstum benötigt werden, können ohne Zusatz von Zutaten direkt verwendet werdenDer C57BL/6Zellkultur.

Hauptbestandteile:

DMEMBasismedium 400 ml

Serum für Rinder 75 ml

GlutaMAX-1 5 ml

MEM NEAANicht essentielle Aminosäuren 5 ml

NatriumpyruvatNatriumacetonat 5 ml

P/S 5 ml

β-Ethanol 0,5 ml（1000X)

LIF 5μg（10ng / ml）

Transport und Lagerung

Transport: Tieftemperaturtransport in einer Isolierbox mit Bio-Eisbeutel

保存方法： 2℃～8℃， 保存2Monate;

1(Erholung)Der C57BL/6Zellen: wird enthalten1 mlGefrierrohr der Zellsuspension in 37℃ Wasserbad schnell schütteln auftauen, fügen4 mlDas Medium ist gleichmäßig vermischt. in1000 RPMZentrifuge unter Bedingungen 4 Minuten, Entfernen Sie die Flüssigkeit und fügen Sie hinzu.1-2 mlNach dem Kulturmedium gut blasen. Fügen Sie dann alle Zellsuspension in die Kulturflasche für eine Übernachtung (oder fügen Sie die Zellsuspension10 cmIn den Teller, fügen Sie ungefähr8 mlKulturmedium, über Nacht kultiviert). Am nächsten Tag wechseln und überprüfen.Der C57BL/6ZellenDichte.

2Zellen übertragen: wennDer C57BL/6ZellenDichte bis80%-90%So kann die Erziehung durchgeführt werden.

1. Entfernen Sie die Kultur, mit Kalzium- und Magnesium-Ionen freiPBSWaschenDer C57BL/6Zellen1-2Zweimal.

2. plus1 mlVerdauungsflüssigkeit (0,25% Trypsin-0,53 mM EDTAin der Kulturflasche, in 37℃ Verdauung im Kultivraum1-2Minuten, dann beobachten Sie die Verdauung der Zellen unter dem Mikroskop, wennDer C57BL/6ZellenDie meisten werden abgerundet und fallen, schnell wieder auf den Arbeitstisch zu bekommen, ein paar Klicks auf die Kultur Flasche nach dem Hinzufügen einer kleinen Menge an Medium, um die Verdauung zu beenden.

3. Drücken6 bis 8 ml/Die Flasche ergänzt das Medium, nach dem leichten Schlagen und nach dem Absaugen, in1000 RPMZentrifuge unter Bedingungen 4 Minuten, Entfernen Sie die Flüssigkeit und fügen Sie hinzu1-2 mlNach der Kultivierung gut blasen.

4. Drücken Sie die Zellsuspension 1：2 Verhältnis zu neuen8 mlMedium in einer neuen Schale oder in einer Flasche.

3Zellfrieren: wartenDer C57BL/6ZellenBei gutem Wachstumszustand können Zellen gefriert werden. Hier unten.T25Flaschen für die Klasse;

1. Wenn die Zellen einfrieren, nach dem Entfernen des Kulturmediums,PBSReinigen nach dem Hinzufügen1 mlDie Zellen runden sich ab, hinterheren, schließen sich an.1 mlDas serumhaltige Medium beendet die Verdauung und kann mit einer Blutzählplatte gezählt werden.

2. 4 min 1000rpmEntfernen Sie die Zentrifuge. plus1 mlSerum resuspendiert Zellen, je nach Zellzahl Serum undDMSOleicht vermischt,DMSODie Endkonzentration ist10%Die Zelldichte ist nicht geringer als1x106/mlJedes Gefrierrohr wird gefriert.1 mlDie Zellsuspension, achten Sie darauf, dass die Gefrorenen Röhre gut gekennzeichnet sind.

3. Das Gefrierrohr in die Programmkühlbox legen und in-80 Kühlschrank,2 Nach einer Stunde in die Flüssigstickstoffspeicherung übertragen. Aufzeichnen Sie die Position des Gefrierrohres für das nächste Mal.

1.verwendenDer C57BL/6ZellenAchten Sie auf den sterilen Betrieb, um Verschmutzung zu vermeiden.

2.Dieses Produkt enthält Serum und Dual Antibody, wenn keine spezielle Notwendigkeit, ohne zusätzliche Serum und Dual Antibody, kann direkt verwendet werden.

3.Zur Aufrechterhaltung derDer C57BL/6ZellenDie ausgezeichnete Wirkung des Gebrauchs ist nicht empfehlenswert, es für eine lange Zeit in Raumtemperatur oder in einer höheren Temperaturumgebung zu platzieren.

4.Alle Produkte müssen innerhalb der Haltbarkeitsdauer verwendet werden, außerhalb der Haltbarkeitsdauer müssen sie aufgegeben werden.

5.Dieses Produkt ist ausschließlich für weitere wissenschaftliche Zwecke bestimmt und darf nicht in anderen klinischen Anwendungen verwendet werden.

6.Nachdem das Kulturmedium gefroren ist, kann es eine kleine Menge an Flocken geben, die sich nicht beeinflussenDer C57BL/6ZellenNormale Verwendung.