78PEI MAX 40K Transfektionsreagens

🔍 Produktübersicht

Chemischer Name:Lineares Polyvinylamin, lineares PEI, Polyvinylamin, lineares, MW 40000， Transfektionsgrad, lineares Polyethylenamid (Molekulargewicht 40.000)

Bestellnummer:78pei40000

Spezifikationen:100mg / 500mg / 5g

Marken:BIOHUB

CAS:49553-93-7

Molekulargewicht:40.000 (~22.000 freie Radikale)

Lösen in:水

Unlöslich in:Häufig verwendete organische Lösungsmittel (Ethanol, Aceton, Tetrahydrofuran)

Aussehen:Freifließende Feststoffe von weiß bis grauweiß

Bearbeitung:Handschuhe und Ventilator

Speichern:Trockenlagerung bei Raumtemperatur

Einführung:

1.78PEI MAX 40K Transfektionsreagens（PEI 22K) ist ein funktionales und zuverlässiges und kostengünstiges sofortiges Transfektionsreagens. In den meisten Expressionssystemen von HEK293 und CHO liefert PEI MAX eine stabile hohe Expression (96-Loch-Platte bis zu 100L-Bioreaktoren). Heute werden jedes Jahr mehr Forscher und Unternehmen PEI MAX zur Zelltransfektion verwenden, da PEI MAX sowohl auf eine stabile hohe Expression wartet als auch die Transfektionskosten um 40% senkt.

2.78 PEI MAX 40K ist einfacher zu bedienen als PEI 25K und hat eine höhere Transfektionseffizienz als PEI 25K, in der Regel dauert der Transfektionsprozess von PEI 25K in der Regel mehrere Stunden, bis die Vorbereitung abgeschlossen ist, während PEI MAX 40K den gesamten Transfektionsprozess innerhalb von zwei Stunden durchführt. Darüber hinaus enthält PEI 25K 4-11% restliche Propylagyle, die eine effektive Bindung der Polymer-Hauptkette an die DNA behindern können, während die Propylagyle von PEI MAX 40K leicht abfallen, was bedeutet, dass die Leistung von PEI MAX für jede Partie stabiler ist.

💎 Produktkonfigurationsmethoden

1. Lagerflüssigkeitszusammensetzung (1 mg/ml)

- Material: 78PEI40000 Pulver, ultrareines Wasser, 1N NaOH, 0,1 μm Filterfilm

- Schritte:

① Nehmen Sie 1 g Pulver gelöst in 900 ml ultrareines Wasser, Magnetkraft rühren, um zu lösen;

② Tropfen Sie 1N NaOH hinzu, um den pH auf 6,9-7,1 zu regulieren (wenn die Grenze überschritten wird, verwenden Sie 1N HCl);

② Kondensation auf 1L, 0,1 μm Filter Filter Desterialisierung;

4 ° C nach der Aufteilung, Flüssigkeit Gültigkeitsdauer von 6 Monaten, Gefriertrocknen Pulver Gültigkeitsdauer von 1 Jahr.

2. Arbeitsflüssigkeitsformering

- Verdünnen im Verhältnis von 1 μg DNA: 1-5 μL 78PEI40000 Speicherflüssigkeit (empfohlenes Anfangsverhältnis 1: 3);

- Verwenden Sie ein serofreies Medium wie Opti-MEM, um DNA und PEI zu verdünnen und einen Komplex zu bilden, den Sie bei Raumtemperatur 10-25 Minuten lassen.

📌 Transfektionsprozess

(a) Wandzelltransfektion

1. Zelleimpfung: 24 Stunden vor der Transfektion impfen Sie die Zellen mit einer Dichte von 70% -80% und ersetzen Sie sie durch ein Medium mit 5% Serum;

2. Komplex-Inkubation: Fügen Sie den DNA-PEI-Komplex tropfenweise in eine Petrischale und inkubieren Sie ihn sanft nach 4-6 Stunden;

3. Flüssigkeitsaustausch und Nachweis: Ersetzen Sie frisches Medium, die Genexpression kann nach 7 Stunden nachgewiesen werden, die Gene nach 24 Stunden übertragen und das Screening-Medikament hinzugefügt werden.

(2) Suspendierte Zelltransinfektion

1. Zellvorbereitung: Anpassung der Zelldichte auf 1 x 106 Zellen / ml, Schüttelbettkultur für 2-4 Stunden;

2. Komplex hinzufügen: den DNA-PEI-Komplex direkt in die Schüttelflasche tropfen und die Oszillationskultur 24-72 Stunden anhalten;

Amplifikationsoptimierung: Die Zellen können nach der Transfektion 24 Stunden verdünnt werden (1: 2-1: 5), um die Proteinproduktion zu erhöhen.

⚡78PEI MAX 40K TransfektionsreagensWichtige Hinweise

1. Lösungsanforderungen:

- Es muss vollständig gelöst werden, und ungelöste Partikel können zu einer Verringerung der Transfektionseffizienz führen;

- Es wird empfohlen, eine NEST 5 mL/14 mL Zentrifuge für die Behandlung von großen Volumenlösungen zu verwenden.

2. pH-Kontrolle:

Bei der ersten Auflösung muss der pH genau auf 6,9-7,1 eingestellt werden, zu hoch oder zu niedrig beeinflusst die Komplexbildung.

3. Zellstand:

- Es wird empfohlen, logarithmische Wachstumszellen zu verwenden, um zu vermeiden, dass die Verdauung übermäßig beschädigt die Zellmembran.

4. Toxizitätskontrolle:

Zellen mit hoher Dichte (> 90% Konvergenz) benötigen eine geringere PEI-Dosis (empfohlenes Verhältnis 1: 1).

Für weitere Produktinformationen wenden Sie sich bitte an Ihren regionalen Vertreter in China: Shanghai Starting Experimental Reagents Co., Ltd.

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(Hinweis: Der Inhalt dieses Artikels basiert auf den offenen Informationen der Marke und den allgemeinen Informationen der Branche, die spezifisch auf dem Markeninformationsdokument basieren.)

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