Positive Kontrolle für in vitro Zelltoxizitätstest

KörperPositive Kontrolle für extrazelluläre ToxizitätstestsvonHatano Forschungsinstitut (HRI)Forschung Produktion，Weit verbreitet in in vitro Zelltoxizitätsexperimente, kann die chinesische Apotheke erfüllen-Methoden zur Zelltoxizitätsprüfung,nach ISO 10993undYBB 00012003Parametrische Anforderungen der Zytotoxizitätsprüfung.

Positive Kontrolle für in vitro ZelltoxizitätstestEintauchen mit herkömmlichen Medien. Die Eintauchmethode ist wie folgt: steriler Betrieb, nehmen1gPositive Kontrolle für in vitro ZelltoxizitätstestPlatziert in15 mlIn sterilen Zentrifugerrohren, nach3 ml / gEintauchungsverhältnis Eintauchungsmedium hinzufügen, horizontale Platzierung Oszillation,120 Umdrehungen pro Minute，37Eintauchen unter ℃24 StundenNach dem Eintauchen umgekehrt.10Zweitens wird die Eintauchlösung für den Test verwendet. Tauchen Sie das Medium als leere Kontrolle verwendet. Achten Sie darauf, dass ein gutes Medium in4Unter Temperaturen nicht länger als zwei Wochen aufbewahren. In vitro ZelltoxizitätstestsMTTMethode zur Prüfung: Guter ZustandL929Zellen, Verdauungszentrifuge, Zubereitung in Zellsuspension, Impfung in96Loch Kultivplatte. Setzen Sie mehrere Komplexlöcher für jede Gruppe ein und impfen Sie jedes Loch100µLZellsuspension, setzen37℃、5%Kohlendioxid.CO2Kultivierungskasten24 Stunden. Entfernen Sie das ursprüngliche Medium und fügen Sie100µLEintauchflüssigkeit, leere Kontrollflüssigkeit,CO2Die Ausbildungsbox wird fortgesetzt.24 StundenAnschließend wird die Zellmorm unter dem Mikroskop beobachtet. Entfernen Sie die Flüssigkeit im Loch und fügen Sie jedes Loch hinzu50µL 1mg/mlSterileMTTLösung (MTTverwendenMEMMediumskonfiguration, bestehende, nicht verfügbare Mediumskonfiguration), weiterkultivieren2 StundenDie Flüssigkeit im Loch entfernen und hinzufügen.100µLIsopropanol, oscillierend gemischt, in570nmund650 nmMessung der Absorption unter Wellenlängen und Berechnung der Zellenüberlebensrate.

Der Zytotoxizitätstest ist die Bewertung der potenziellen Zytotoxizität von Biomaterialien und medizinischen Geräten oder Immersionen unter Verwendung von in vitro-Zellkulturmethoden und ist einer der wichtigen Messindikatoren im biologischen Bewertungssystem von Biomaterialien und ein Projekt, das medizinische Geräte und biologische Materialien für fast alle Anwendungen untersucht werden müssen. Zytotoxizitätstests können die Auswirkungen von Biomaterialien auf die zellmetabolische Funktion auf kurze Sicht testen und schnell untersuchen, ob Materialien potenziell zytotoxisch sind.

Zytotoxizitätstests als Mittel zur Erkennung der Toxizität von Biomaterialien haben die Vorteile von Einfachheit, hoher Empfindlichkeit, niedrigen Kosten und kurzen Testzyklen, die weit verbreitet werden, um die Biokompatibilität zu prüfen und zu bewerten. Die Beurteilungsmethode für die Zytotoxizität von Biomaterialien geht von der Beobachtung der morphologischen und quantitativen Veränderungen der Zellen zur Beurteilung der Haftung, Vermehrung, Stoffwechsel usw. mit einer dynamischen Zellzahl und der Zellproduktionsfähigkeit als Beurteilungsmethode zur Beurteilung der Biokompatibilität von Zellen aus Biomaterialien. Spezifische Tests sind neutraler Rotaufnahmetest, Klonbildungstest,MTTZellotoxizitätstests undXTTMethoden zur Zelltoxizitätstest, bei denenMTTundXTTDie Zytotoxizitätstest-Methode ist aufgrund der quantitativen Messung der Zytotoxizität des Materials akzeptierter und weit verbreitet.

MTTundXTTZytotoxizitätstests Prüfprinzip für Ambersäuredehydrogenase in lebenden zellulären Mitochondrien kann exogeneMTTZur wasserlöslichen blau-violetten Kristallschicht reduziert(Formazan)Sie werden in den Zellen abgelegt, während die toten Zellen diese Funktion nicht haben. Dimethylradium(DMSO)oder Isopropanol oder Methylfenazinsulfat(PMS)In der Lage, zu lösen, in Zellen, mit enzymatischen Marker570nmBei der Wellenlänge wird der Lichtabsorptionswert bestimmt, und innerhalb eines bestimmten Zellzahlbereichs ist die Menge der Kristallbildung proportional zur Zellzahl. Nach dem gemessenen Absorptionswert(OD)Wert)um die Anzahl lebender Zellen zu bestimmen,ODJe größer der Wert, desto stärker die Zellaktivität, desto weniger Toxizität. Durch die Berechnung der Zellprogrammrate kann die Zytotoxizität von medizinischen Materialien und deren Produkten quantitativ eingestuft werden. Die Überlebensfähigkeit der Zellen kann auch berechnet werden, wenn die Verdünnung in unterschiedlichen Konzentrationen der ImmersionIC50(Unterdrückung der Zellaktivität50% der Konzentration)Beurteilung der Zelltoxizität von Biomaterialien und deren Produkten.

Positive Kontrolle für in vitro ZelltoxizitätstestMit einer guten Batch-Reproduzierbarkeit, einer stabilen Leistung und einer reichen Größe an Spezifikationen kann es als biologische Bewertung von Medizinprodukten verwendet werden-Ideales Material für die Messung der Zytotoxizität.