Aladdin RIPA (stark) - auf Lager

Aladdin R301899-100ml RIPALyst (stark)

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Produktnummer:R301899-100ml

Produktname:RIPALyst (stark)

Produktspezifikationen:100 ml

Produktbeschreibung:

Spezifikationen oder Reinheit: Keine Inhibitoren

Englischer Name:RIPA Lyse Pufferlösung (stark)

Lagertemperatur:2-8°CSpeichern

Transportbedingungen: Eisbeutel

RIPADie Lyse ist eine herkömmliche Gewebe- und Zellschleunigungslösung, die hauptsächlich zur Entnahme löslicher Proteine aus tierischen Geweben und Säugetierzellen verwendet wird, um Klebstoffzellen und Suspensionszellen zu spalten. Nach der Stärke des Klysats kann in starke, mittlere und schwache Kategorien unterteilt werden, die entsprechenden Produkte können nach den experimentellen Anforderungen ausgewählt werden.RIPALüssigkeit(Stark)Es kann effektiv Zellkerne, Zellmembranen und Plasmaproteine extrahieren, das extrahierte Protein kann für die Quantifizierung von Proteinen angewendet werden,Westlichen Blot、IP-AdresseTestanalyse usw.

Die Parameter des spezifischen Produkts hängen von den Parametern ab, die die Produktbeschreibung erhalten haben

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Gebrauchsanweisung

(eins)Wandkultivierung von Zellen

1.Nehmen Sie das Produkt in Raumtemperatur gelöst und mischen Sie es mit einem Enzyminhibitor nach den experimentellen Anforderungen.

2.Entfernen Sie die Zellkulturflüssigkeit, mitPBS、NSOder ohne Serumkultur reinigen1Zweitens, mit niedriger Geschwindigkeit zentrifugieren, entfernen Sie die Fällung.

3.nach 6 Löcherplatte für jedes Loch hinzugefügt150～250 μlDer Anteil der Lysate, die Enzyminhibitoren enthalten, dieses Produkt hinzufügen. Der Pipette wird sanft geblasen, so dass Lysate und Zellen in vollem Kontakt stehen. auf Eis oder4℃fission, in der Regel fission wirkt auf die Zelle 1～3sInnerhalb werden die Zellen aufgespalten. üblicherweise 6 Lochplatte für jede Lochzelle hinzugefügt150 μlDer Lysit ist ausreichend, aber wenn die Zelldichte sehr hoch ist, kann die Dosis des Lysits angemessen erhöht werden. 200～250 μl。

4.10000～12000g，4℃Zentrifugieren 5～10min(Wenn keine Zentrifuge vorhanden ist, kann die Zentrifuge auch bei Raumtemperatur eingesetzt werden.)Nimm es rein.

5.FolgendesSDS-Seite、westlichenOperationen wie Immunsetzung und Immunsetzung.

(zwei)Suspension der Zellkultur

1.Nach dem Auflösen bei Raumtemperatur wird ein Enzyminhibitor hinzugefügt.

2.Die Zellen mit niedriger Geschwindigkeit zentrifugieren, entfernen und Fällungen sammeln.

3.Lassen Sie die Zelle mit den Fingern lösen. nach 6 Lochplatte für jede Lochzelle hinzugefügt150～250 μlDer Anteil der Lysate, die Enzyminhibitoren enthalten, dieses Produkt hinzufügen. üblicherweise 6 Lochplatte für jede Lochzelle hinzugefügt150 μlDer Lysit ist ausreichend, aber wenn die Zelldichte sehr hoch ist, kann die Dosis des Lysits angemessen erhöht werden. 200～250 μl. Dann mit dem Finger zu schießen, um die Zellen vollständig zu spalten, sollte nach der vollständigen Spaltung keine offensichtlichen Zellen, Zellen Fällungen.

4.10000～12000g，4℃Zentrifugieren5～10min(Wenn keine Zentrifuge vorhanden ist, kann die Zentrifuge auch bei Raumtemperatur eingesetzt werden.)Nimm es rein.

5.FolgendesSDS-Seite、westlichenOperationen wie Immunsetzung und Immunsetzung.

(Drei.)Organisationsproben

1.Das Produkt wird in Raumtemperatur gelöst und gemischt und mit einem Enzyminhibitor versetzt.

2.GruppenZhiIn kleine Stücke schneiden, je kleiner, desto besser.

3.In flüssigem Stickstoff oder in einem Kühlschrank eingefroren30 MinutenDas oben genannte Gewebe wird schnell mit flüssigem Stickstoff geschliffen, und der Schleifprozess wird möglichst kontrolliert.1～2 Minutenum den Abbau von Proteinen zu verringern.

4.Nach jedem20 mgOrganisation beitreten 150～250 μlDer Anteil des Lysats, das eine Lysats mit einem Enzyminhibitor hinzufügen. Auf Eis oder4℃Spalten 15～30 Minuten。

5.Schritte 3、4 Es kann auch folgendes Verfahren durchgeführt werden: nach jedem20 mgOrganisation beitreten 150～250 μlDer Anteil der Lysate wird diesem Produkt, das Enzyminhibitoren enthält, hinzugefügt. Mit einem Glas- oder Gewebeschleifmaschine, bis der Prozess vollständig zerrissen ist, so weit wie möglich kontrolliert 1～2 Minutenum den Abbau von Proteinen zu verringern.

6.10000～12000g，4℃Zentrifugieren 5～10min(Wenn keine Zentrifuge vorhanden ist, kann die Zentrifuge auch bei Raumtemperatur eingesetzt werden.)Nimm es rein.

7.FolgendesSeite、westlichenOperationen wie Immunsetzung und Immunsetzung.

Hinweise

1.Nach der Entfernung der Kulturflüssigkeit der klebenden Zellen kann, wenn das Protein im Serum nicht gestört wird, nicht gereinigt werden.

2.Wenn die Klärung nicht ausreichend ist, kann die Klärungsmenge angemessen erhöht werden, und wenn eine hohe Konzentration von Proteinproben erforderlich ist, kann die Klärungsmenge angemessen reduziert werden.

3.Wenn die Zellen größer sind, müssen sie aufgeteilt werden. 50～100 Millionen Zellen./Zentrifugerrohr, dann zerrissen. Große Gruppen von Zellen sind schwieriger, vollständig zu spalten, während eine kleine Anzahl von Zellen aufgrund des leichten Kontakts mit dem Lysate und den Zellen relativ leicht ist, vollständig zu spalten.

4.Wenn die Gewebeprobe selbst sehr klein ist, kann direkt nach dem ordnungsgemäßen Schnitt das Lysit aufgenommen werden.Vorte×Die Probe ausreichend zerbrechen lassen. Dann wird die gleiche Zentrifuge für die nachfolgenden Experimente aufgenommen. Der Vorteil der direkten Spaltung ist, dass es bequemer ist, keinen Homogenator zu verwenden, der Nachteil ist, dass es nicht so gut wie der Homogenator gehalten wird.

5.Bei niedrigen Temperaturen kann es zu Trübungen kommen,37℃Wasserbad fördert seine Auflösung, beeinflusst nicht die Wirkung der Verwendung; Die Auflösungszeit ist nicht einfach zu lang, um den Ausfall der Wirkstoffe zu vermeiden.

6.Oft erscheint eine kleine Gruppe von transparenten Klebstoffen in den Spaltprodukten, was ein normales Phänomen ist. Diese transparente Glia enthält das Genom.Die DNAKomplexe usw. Nicht-Detektion und GenomDie DNAIm Falle der Bindung von besonders engen Proteinen, kann die Reinigung direkt zentrifugiert werden, um nachfolgende Experimente; Sollten Proteine, die besonders eng mit dem Genom verbunden sind, nachgewiesen und gebunden werden müssen, können die transparenten Klebstoffe durch Ultraschallbehandlung zerkleinert und aufgelöst werden, die anschließend zur Folgeversuchung zentrifugiert werden.

7.Die Operationsschritte der Zelltrennung sollten auf Eis oder4℃Fortfahren.

Anwendungsbereich

Für allgemeine biologische und medizinische Forschung

Bestellinformationen:

R301899-100ml RIPALyst (stark) 100 ml