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Raum 6428, Gebäude 6, Drum Tower East Street, 33, North Street, Changping District, Peking
Beijing Yun Peptide Biotechnologie Co., Ltd.
Raum 6428, Gebäude 6, Drum Tower East Street, 33, North Street, Changping District, Peking
Solarbio/Soleilbao CA1210 CCK-8Reagenzkist(Zellprogramm- und Toxizitätstests)
Soleball CCK-8 Kit Zellprogramm- und Toxizitätstest
Produktnummer:CA1210
Produktname:CCK-8Reagenzkist(Zellprogramm- und Toxizitätstests)
Produktspezifikationen:100T/500T/1000T/10*500T/10*1000T
Produktbeschreibung:
CCK-8Reagenzkist(Zellprogramm- und Toxizitätstests)
Die Parameter des spezifischen Produkts hängen von den Parametern ab, die die Produktbeschreibung erhalten haben
Spezifikationen:10*1000T ; 10*500T ; 1000T ; 100T ; 500T
Lagerbedingungen:4℃ Lichtschutz
Zellzählkit-8kurzCCK-8Reagenzgeräte, fürMTTEine Alternative zum Gesetz basiert aufWST(Wasserlösliches Tetrazolsalz, chemischer Name:2-(2-Methoxy-4-Nitrophenyl)-3-(4-Nitrophenyl)-5-(2,4-Disulfonbenzen)-2H-Tetrazol Mononatriumsalz) ist weit verbreitet in der schnellen hochempfindlichen Testkits für Zellprogramm und Zytotoxizität. Kann für Tests wie Medikamentescreening, Zellprogrammametrie, Zytotoxizitätstest, Tumorensibilität und andere verwendet werden.
Gebrauchsanweisung:
Erstellen einer Standardkurve (bei der Bestimmung der spezifischen Anzahl von Zellen)
1Zählen Sie zuerst die Anzahl der Zellen in der hergestellten Zellsuspension mit der Zellzählplatte und impfen Sie die Zellen.
2Verhältnismäßig verdünnt in einem Zellkonzentrationsgradient mit dem Kulturmedium, in der Regel zu tun3-5Ein Zellkonzentrationsgradient für jede Gruppe3-6Ein Loch zurück.
3nach der Impfung auf die Zellwand kultiviert undCCK-8Messung nach einer bestimmten ZeitODWert, erstellt eine horizontale Koordinate für die Anzahl der Zellen (XAchsen),ODWerte als Längskoordinaten (YStandardkurve der Achse). Auf der Grundlage dieser Standardkurve kann die Anzahl der Zellen in unbekannten Proben bestimmt werden (diese Standardkurve wird unter der Voraussetzung getestet, dass die Bedingungen des Experiments konsistent sind, um die Anzahl der Zellen zu bestimmen, die Impfungen und die EinbindungCCK-8spätere Ausbildungszeit. )
II. Testen der Zellaktivität
1und in 96 Impfung der Zellsuspension in der Bohrplatte (100µL/Löcher). Die Platte in der Kultivierkammer vorkultivieren (in37 ℃, 5 % CO2unter den Bedingungen).
2Zu jedem Loch hinzufügen10µL CCK-8Lösung (Achten Sie darauf, keine Blasen in den Löchern zu erzeugen, sie können beeinflussenODWerte zu lesen).
3Inkubieren Sie die Platte in der Kultivkammer1-4Stunden.
4Mit dem Enzym-Maß bestimmt450nmAbsorption am Ort.
5Wenn vorübergehend nicht festgelegtODWerte, die später bestimmt werden sollen, können jedem Loch hinzugefügt werden10µL 0.1MderHCloder1% SDS (W/V)Lösung und Abdeckung der Platte vor Licht unter Raumtemperatur aufbewahren. in 24 Die Absorption ändert sich innerhalb einer Stunde nicht.
3. Zellverwertung-Toxizitätstest
1und in 96 Konfiguration in Bohrplatten100 µLZellsuspension. Vorkultivieren der Platte in der Kultivierkammer 24 Stunden (in37 ℃,5 % CO2unter den Bedingungen).
2Beitritt zur Kultivplatte10µLUnterschiedliche Konzentrationen von Substanzen. Inkubieren Sie für eine angemessene Zeit in einem Ausbauraum (z.B.:6、12、24 oder 48 Stunden).
3Zu jedem Loch hinzufügen10 µL CCK-8Lösung (Achten Sie darauf, keine Blasen in den Löchern zu erzeugen, sie können beeinflussenODWerte zu lesen). Wenn die Substanz oxidativ oder reduzierbar ist, kannCCK-8Bevor Sie ein frisches Medium ersetzen (das Medium entfernen und die Zellen zweimal mit dem Medium waschen und dann ein neues Medium hinzufügen), entfernen Sie die Wirkung des Medikaments.
4Inkubieren Sie die Platte in der Kultivkammer1-4Stunden.
5Mit dem Enzym-Maß bestimmt450 nmAbsorption am Ort.
6Wenn vorübergehend nicht festgelegtODWerte, die später bestimmt werden sollen, können jedem Loch hinzugefügt werden10µL 0.1MderHCloder1% SDS (W/V)Lösung und Abdeckung der Platte vor Licht unter Raumtemperatur aufbewahren. in 24 Die Absorption ändert sich innerhalb einer Stunde nicht.
Berechnung der Vitalität:.
Zellstärke (%)=[A(Zusatz)-A(Leer)]/[ A(0Zusatz)-A(Leer)]×100
A(Dosierung): mit Zellen,CCK-8Absorption von Löchern in Lösungen und Arzneimittellösungen
A(leer): mit Kulturmedium undCCK-8Absorption der Lösung ohne zelluläre Löcher
A(0 Dosierung): mit Zellen,CCK-8Absorption der Löcher der Lösung ohne Medikamentlösung
Zellstärke: Zellprogrammstärke oder zytotoxische Wirksamkeit
Hinweis:
①Es wird empfohlen, zuerst ein paar Löcher zu tun, um die Anzahl der impften Zellen und den ZugangCCK-8Zeit nach dem Reagenz.
②Weiße Blutkörperchen können länger kultiviert werden.
③Bei Verwendung von Standards 96 Bei der Bohrplatte ist die Mindestmenge der Klebstoffzellen mindestens1 ,000ein/Löcher(100 µLKulturmedium). Die Empfindlichkeit bei der Erkennung von weißen Blutkörperchen ist relativ gering, daher ist die empfohlene Impfmenge nicht geringer als2,500ein/Löcher( 100 µLKulturmedium)Wenn Sie verwenden möchten 24 Löcher oder 6 Im Loch-Plate-Experiment berechnen Sie zuerst die entsprechende Impfmenge pro Loch und folgen dem Gesamtvolumen des Mediums pro Loch10%beitretenCCK-8Lösung.
④Wenn nicht.450nmDer Filter kann in der Absorption verwendet werden.430-490 nmZwischen den Filtern, aber450nmTestempfindlichkeit am höchsten.
⑤Die Absorption von Phenol-Rot im Medium kann bei der Berechnung durch Abzug der Absorption des Bodens im leeren Loch entfernt werden, so dass es keine Auswirkungen auf die Detektion hat.
Soleball CCK-8 Kit Zellprogramm- und Toxizitätstest
Bestellinformationen:
CA1210 CCK-8Reagenzkist(Zellprogramm- und Toxizitätstests) 100T/500T/1000T/10*500T/10*1000T