Human Complement Fragment 5a ELISA Kit

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ELISAExperimentelle Hinweise
　　1.Bei formellen Tests sollten die Testbedingungen unter positiver Kontrolle und negativer Kontrolle kontrolliert werden, und die zu prüfenden Proben sollten eine und zwei Kopien gemacht werden, um die Genauigkeit der Ergebnisse zu gewährleisten. Manchmal ist der Boden hoch, was auf eine nicht spezifische Reaktion hinweist, kann Schafseru, Kaninchenserum oderBSAWarten Sie geschlossen.
　　2.inELISAWichtig ist die Auswahl der experimentellen Bedingungen, einschließlich:
　　(1)Wahl der Festphasen-Träger: Viele Substanzen können als Festphasen-Träger verwendet werden, wie Polyvinylchlorid, Polystyren, Polypropylamid und Zellulose. Sie kann in Form von Holzplatten, Prüfrohren, Perlen usw. sein. Derzeit wird häufig40Loch Polystyren Hole Platte. Unabhängig von dem Träger kann vor der Verwendung gescreent werden: mit einer gleichen Menge an Antigen verpackt, unter den gleichen experimentellen Bedingungen reagiert, um zu beobachten, ob seine Farbreaktion gleichmäßig ist, um festzustellen, ob seine Adsorptionseigenschaften gut sind.
（2)Packung mit Antikörpern(oder Antigen)Die Wahl: Antikörper(oder Antigen)Bei der Adsorption an der Oberfläche des Festphasenträgers ist eine bessere Reinheit erforderlich,Allgemeine Anforderungen bei der AdsorptionPH-Wertin9.0～9.6Zwischen. Die Adsorptionstemperatur, die Zeit und ihre Proteinmenge haben auch einen Einfluss.,Meistens verwendet4℃18～24Stunden. Die geeignete Proteinkonzentration muss titriert werden: d.h. mit unterschiedlichen Proteinkonzentrationen(0.1、1.0und10μg／mlwarten)Nach der Verpackung werden unter den gleichen anderen Testbedingungen die positiven Proben beobachtet.ODWert. WahlODWerteZui hohe und geringe Proteinkonzentration. Für die meisten Proteine1～10μg／ml。
　　(3)Auswahl der Arbeitskonzentration des Enzym-Markers Antikörper: Zunächst mit direktenELISATitration der vorläufigen Wirksamkeit(Siehe enzym markiert Antikörper Teile). Dann andere Bedingungen festlegen oder nehmen“Frontgesetz”(Verpackungen, Referenzmateriale für Proben und enzym-markierte Antikörper mit unterschiedlichen Verdünnungsgraden)Präzise Titrierung der Arbeitskonzentration im formellen Versuchssystem.
　　(4)Auswahl des Substrats des Enzyms und der Wasserstoffversorgung: Die Auswahl der Wasserstoffversorgung ist kostengünstig, sicher, mit einer offensichtlichen farbigen Reaktion und an sich farblos. Einige liefern Wasserstoff.(wieOPDwarten)Es gibt eine potenzielle krebserregende Wirkung, sollte auf Schutz achten. Bedingte sollten eine krebserregende, empfindliche Wasserstoffversorgung verwenden, wieTMBundABTSDie Wasserstoffversorgung ist derzeit zufriedenstellender. Nach einer Weile der Substrateinwirkung sollte eine starke Säure oder eine starke Alkali hinzugefügt werden, um die Reaktion zu beenden. Normalerweise ist die Wirkungszeit der10-30Minuten sind geeignet. Die Flüssigkeit muss frisch hergestellt werden, insbesondereH2O2Vor dem Einsatz.