Details bestimmen Erfolg und Misserfolg, und das gilt auch für Laborforscher. In Elisa-Kit-Experimenten gibt es viele Bedienendetails, wie z. B. die Verwendung möglichst geringer Pistolen und den Austausch von Pistolenkopfen, die bei der Probenahme von niedrigen Konzentrationen zu hohen Konzentrationen hinzugefügt werden, da dies die Wahrscheinlichkeit von Sprunglochen verringern kann. Und der Schlüssel zum gesamten Experiment ist die Behandlung der Ergebnisse, dann in unserem heutigen technischen Artikel bringt Ihnen unsere Abteilung die Analysemethode der Ergebnisse der ELISA-Testkits.
①: Proben in ELISA-Experimenten müssen komplexe oder drei Löcher machen, und dann berechnen Sie den durchschnittlichen OD-Wert jedes Konzentrationsstandards, der Variationskoeffizient der komplexen Löcher sollte weniger als 20% sein.
②: Durchschnittlicher OD-Wert minus der OD-Wert des leeren Lochs.
3. Herstellung von Standardkurven.
Unter Abzug des OD-Wertes für die X-Achse und der Konzentration der Standardprodukte für die Y-Achse wird eine geeignete Berechnungsmethode mit der Grafiksoftware ermittelt. Es wird empfohlen, eine geeignete Software zu verwenden, zum Beispiel CurveExpert 1.4. Diese Software ist in der Lage, eine Vielzahl von Methoden (wie geradlinige, halbe Logarithmen, Logarithmen, vierparametrische Gleichungen usw.) zu geben und eine geeignete Gleichung auszuwählen. Um zu prüfen, ob eine Kurve mit den Daten in der Tabelle übereinstimmt, können Sie die Konzentration des Standards als unbekannt betrachten, den entsprechenden OD-Wert in die Gleichung einbringen und die Konzentration des Standards berechnen, und das Ergebnis sollte der tatsächlichen Konzentration sehr nahe liegen (+/-10%). Wählen Sie die Kurve mit hoher Zui-Passform aus.
Wenn eine schlechte Linearität der Standardkurve oder eine schlechte Parallelität auftritt (OD des Doppelloch-Kontrolllochs) Der Wert unterscheidet sich sehr stark), oder das Phänomen des Sprunglochs, kann die Ursache der gegenseitigen Verschmutzung zwischen den Enzym-Markierungslöchern sein, nach dem Waschen der Platte nicht so schnell wie möglich den nächsten Schritt durchzuführen, die Methode der Operation ist falsch, wenn die Probe oder ein anderes Reagenz hinzugefügt wird, ist die Inkubationsposition schlecht lichtschutz oder die Abdeckfolie ist nicht gut versiegelt, so dass die Feuchtigkeit verdampft, das Enzym-Markierungsloch fragt, ob die Reagenzversatzung unterschiedlich ist, die entsprechende Lösung ist, wenn die Probe aufgenommen wird, bitte achten Sie darauf, die Flüssigkeit nicht in ein anderes Loch zu sputtern, künstliche Platte zu waschen, bitte achten Sie darauf, die Waschflüssigkeit nicht in ein anderes Mikroloch zu sputtern, rechtzeitig nach dem Waschen der Platte den nächsten Schritt durchzuführen, das Reagenz hinzuzufügen, bitte tropfen Sie in die Suspension ein, denken Sie daran, den Pistolenkopf nicht in das Loch zu berühren, die Flüssigkeit in verschiedenen Rea Wenn ein Tropfen Flüssigkeit auf dem Pistolenkopf beim Hinzufügen der Flüssigkeit getropft wird, wird die Flüssigkeit, die auf dem Pistolenkopf zurückbleibt, auch getropft, um die Konsistenz des Flüssigkeitsvolumens zu gewährleisten.