Unterschiedliche Zelltypen haben unterschiedliche Anforderungen an die Kultivbedingungen und müssen daher eine geeignete 87050 Zellkulturrohre auswählen. Zum Beispiel müssen klebende Zellen eine gute Atmungsfähigkeit wählen, während suspendierte Zellen eine bessere Dichtung wählen können; Unterschiedliche experimentelle Anforderungen haben unterschiedliche Anforderungen an ihre Spezifikationen, Materialien, Flaschendeckeltypen usw. Daher müssen bei der Auswahl die experimentellen Bedürfnisse vollständig berücksichtigt werden.
Die Bestimmungsschritte des Zellkulturrohres 87050 umfassen hauptsächlich die folgenden Aspekte:
1. Vorbereitungsphase
Auswahl der geeigneten Zellkulturrohre: Wahl der geeigneten Größe und Art von Zellkulturrohren, wie übliche Zentrifugerrohre, Zellkulturflaschen usw., entsprechend den experimentellen Anforderungen.
- Reinigung und Sterilisation: Stellen Sie sicher, dass das Kulturrohr sauber und frei von Verunreinigungen ist, kann eine hohe Temperatur-Hochdrucksterilisierung oder eine trockene Hitzesterilisierung durchgeführt werden.
- Bereitstellung von Reagentien: einschließlich Zellkulturmedien (die auf eine geeignete Temperatur vorwärmt werden müssen, in der Regel werden Teile des Mediums vorwärmt, um Zeit zu sparen und den Proteinabbau zu vermeiden), Panenzyme (zur Verdauung von Zellen), Serum (zur Bereitstellung von Nährstoffen, die für das Zellwachstum erforderlich sind) usw.
2. Impfung von Zellen
- Zellzählung: Wenn eine genaue Kontrolle der Zellinfektionsmenge erforderlich ist, sollte zuerst eine Zellzählung durchgeführt werden und die Dichte der Zellsuspension mit einer Zellzählplatte oder einem automatischen Zellzähler bestimmt werden.
- Impfung von Zellen: Übertragen Sie eine angemessene Menge an Zellsuspension in ein Kulturrohr und schütteln Sie sanft, damit die Zellen gleichmäßig verteilt sind.
3. Ausbildungsprozess
In die Zellkultur: Ein Rohr mit guten Zellen wird in die Zellkultur gelegt und die geeignete Temperatur (in der Regel 37 ° C), die Feuchtigkeit (in der Regel 40-60) und die CO-Konzentration (in der Regel 5) eingestellt.
- Regelmäßige Beobachtung: Täglich regelmäßig beobachten Sie den Zustand des Zellwachstums, einschließlich der Zellmormologie, der Wandaufnahme, der Verunreinigung usw. Eine detailliertere Untersuchung kann direkt mit dem bloßen Auge oder mit dem Mikroskop durchgeführt werden.
Zellverarbeitung und Sammlung
Flüssigkeitsaustausch: Je nach Zellwachstum und experimentellen Bedürfnissen wird regelmäßig frisches Medium ersetzt, um ausreichende Nährstoffe zu liefern und Stoffwechselprodukte und tote Zellen zu entfernen.
- Übertragung: Wenn die Zellen auf eine gewisse Dichte wachsen (in der Regel 70-80 Fusionsgraden), ist eine Übertragung erforderlich. Verwenden Sie das Pansenzym, um die Zellen zu verdauen, so dass sie vom Grund des Röhrens abfallen, und fügen Sie dann frisches Medium hinzu, um die Verdauung zu beenden und in eine einzige Zellsuspension zu blasen, nachdem sie in ein neues Röhr aufgeteilt wurden, um fortzusetzen.
- Sammlung von Zellen: Für weitere Analysen oder Experimente mit Zellen können Sie eine Zentrifuge verwenden, um die Zellen abzusetzen und die Oberflüssigkeit zu entfernen, um die Zellen abzusetzen.