Im Folgenden finden Sie eine detaillierte Beschreibung der Konservierungsmethode der Flüssigchromatografie:

Grundkenntnisse und Bedeutung der Chromatografie

Die Leistung der Flüssigchromatografie-Säulen als Kernbauteil des Trennsystems beeinflusst direkt die Genauigkeit und Wiederholbarkeit der Analyseergebnisse. Die chromatografische Säule ermöglicht die Trennung der Probenkomponenten durch die Wechselwirkung zwischen der Festphase und der Flussphase, während die richtige Erhaltung die Lebensdauer erheblich verlängert (die Lebensdauer der herkömmlichen C18-Säulen ist etwa 500-2000 Probeningriffe), das Grundgeräusch verringert und die theoretische Anzahl der Platten stabil hält. Insbesondere in komplexen Matrix-Analysen wie biologischen Proben, Lebensmittelzusatzstoffen und anderen Bereichen bestimmt die hohe Trennfähigkeit der Chromatografie-Säulen direkt die Zuverlässigkeit der Daten.

2. Regeln für den täglichen Gebrauch der Chromatografie

1. Flussphase Auswahl und Vorbehandlung

Reinheitsanforderungen: HPLC-Lösungsmittel müssen verwendet werden, um Verunreinigungen zu vermeiden, die den Zylinderkopf verstopfen. Zum Beispiel muss ein Methanol/Wasser-System durch eine 0,45 μm Filtermembran gefiltert werden, und Acenitril wird empfohlen, eine 0,22 μm Filtermembran zu verwenden.

pH-Kontrolle: Gegenphase-Säulen (wie C18) sind in einem pH-Bereich von 2-8 anwendbar, über dem eine Silikonskelettlösung verursacht werden kann. Für spezielle pH-Bedingungen sollten hybridisierte Partikelsäulen (z. B. Waters XBridge Shield) verwendet werden.

Puffersalzkonzentration: die häufig verwendete Phosphatpufferkonzentration übersteigt nicht 50 mmol / L, die hohe Ionenstärke lässt sich leicht aus dem kristallisierten Schädigungsfüllstoff auslösen. Nach Abschluss des Experiments ist der Übergang mit reinem Wasser für mindestens 30 Minuten erforderlich.

Systemausgleich vor der Probenahme

Gradiententwäsche Vorausgleich: Neue Säulen oder lange unbenutzte Chromatografie Säulen müssen mit der ersten proportionalen Strömungsphase mit einer niedrigen Durchflussgeschwindigkeit (0,2 mL / min) für mehr als 2 Stunden gespült werden, um die Festphase ausreichend befeuchten zu lassen.

Drucküberwachung: Normale Druckschwankungen sollten im Bereich von ± 5% liegen, wenn ein Anstieg von mehr als 30% auftritt, was darauf hindeutet, dass die Siebplatte verstopft oder die Füllung zusammenbricht, muss sofort eine Ausfallprüfung erfolgen.

III. Tiefenreinigungsstrategie für die Chromatografie

1. Direktes Spülen

Standardverfahren: Trennen Sie die Detektorverbindung, verwenden Sie eine Mischung von Isopropanol: Wasser = 1: 1, spülen Sie 30 Minuten mit einer Durchflussgeschwindigkeit von 1 ml / min zurück und wechseln Sie anschließend zur reinen organischen Phase (Methanol / Acenitril) für 1 Stunde. Mit dieser Methode werden über 90 Prozent der polaren Schadstoffe entfernt.

Spezielle Verunreinigungsbehandlung: Eiweißrückstände werden mit einer 6M-Harnstofflösung mit 0,1% TFA gespült; Lipide werden für 15 Minuten mit einem Ultraschall-System von Hexan: Isopropanol = 1: 1 behandelt.

2. In-situ-Regenerationstechnik

Säure-Alkali-Alternativ: Für hartnäckige Adsorbente injizieren Sie 0,1 mol / L NaOH → 0,1 mol / L HCl → 20 ml Wasser, beachten Sie, dass nach jedem Umschalten eine neutrale Flussphase erforderlich ist. Geeignet für Polymer-Matrixsäulen (z. B. PRP-Serie).

Superkritische Flüssigkeitsreinigung: CO2-Flüssigkeiten entfernen nicht-polare Verunreinigungen effektiv bei 40 ° C und 300 bar, besonders für halbfertige große Durchmessersäulen (≥ 100 Å).

4. Lagerung und Transport der Chromatografie-Säulen

Kurzfristige Lagerung (1 Monat)

Schutz gegen inerte Gase: Füllen Sie Stickstoff auf, um den internen Sauerstoff zu ersetzen, um die Vermehrung von Mikroben zu unterdrücken. Die Chromatografie kann in einem dichten Behälter mit Trocknungsmittel platziert werden.

Temperaturregelung: Die optimale Lagertemperatur beträgt 15-25 ° C, um direktes Sonnenlicht zu vermeiden. Bei einer niedrigen Temperatur (4 °C) muss es zuvor auf Raumtemperatur zurückgesetzt werden, bevor es aktiviert wird.

V. Zusammenfassung

Wissenschaftliche Chromatografie Säulen Erhaltung sollte das Konzept der "Prävention orientiert, Heilung kombiniert" aufbauen, ausführliche Wartung Protokolle Aufzeichnung der Anzahl der Anwendungen, Druckänderungen und Wartungsgeschichte zu entwickeln. Es wird empfohlen, vierteljährlich einen Integritätstest durchzuführen (z. B. Natriumbenzolat-Label-Test der Säulenwirkung), um festzustellen, dass das Ende der Lebensdauer erreicht wird, wenn die Anzahl der theoretischen Türmplatten auf 70% des ursprünglichen Wertes sinkt. Durch standardisierte Betriebsprozesse und intelligente Verwaltungsmittel können die Chromatografie-Säulen stets optimal funktionieren und die Präzision und Zuverlässigkeit der Analysedaten gewährleisten.