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Entdecken Sie die LOD der Partikelcharakterisierungsmethode: Wie wählen Sie eine präzise Prüfmethode?
Datum:2024-09-26Lesen Sie:0

Detektionsgrenze (LOD, Limit of Detection)Es bezieht sich auf die Mindestkonzentration oder die Mindestmenge von Substanz, die zuverlässig durch die Analysemethode erfasst werden kann und die die Empfindlichkeit der Methode repräsentiert.zur Lieferung von Medikamenten undNanoträgersystemeDie genaue Meldung von LODs hilft nicht nur bei der Bestimmung der Genauigkeit und Wiederholbarkeit der Prüfmethoden, sondern bezieht sich auch auf die Prüfung von Partikeln in niedrigen Konzentrationen, die Einhaltung der Vorschriften (bei der Arzneimitteldeklaration oder Qualitätskontrolle verlangen Regulierungsbehörden wie FDA, EMA usw. in der Regel eine detaillierte Meldung von LODs für Partikelcharakterisierungsmethoden), die Methodenvalidierung und die Glaubwürdigkeit der Forschungsergebnisse.Können die verschiedenen Partikelcharakterisierungsmethoden oder -instrumente auf dem Markt eine genaue LOD liefern? Was sind ihre Prüfprinzipien und Einschränkungen? Diskutieren Sie mit dem Kleinen weiter!

Nanopartikel-Tracking-Analyse (NTA) liefert keine LOD im herkömmlichen Sinne


















Nanopartikel-Tracking-Analyse (NTA) Es handelt sich um eine Methode, die einzelne Nanopartikel verfolgt und analysiert.Braune BewegungTechnik zur Messung von Partikelgröße und Konzentration. Obwohl NTA in der Lage ist, Informationen über die Partikelgrößenverteilung und die Konzentration von Nanopartikeln zu liefern, kann es aus folgenden Gründen keine LOD im traditionellen Sinne liefern:

1. Signal-Rausch-Verhältnis nicht konstant:

NTA verlässt sich auf die Streuung von Licht, um Partikel zu erkennen, während die Streuungstärke von verschiedenen Partikeln sehr unterschiedlich ist, insbesondere wenn es in der Probe eine Multidispersion gibt, die Streuungstärke von großen Partikeln neigt dazu, das Signal kleiner Partikel zu blockieren, was zu einer übergroßen Partikelgröße und einer niedrigen Konzentration führt. Daher können Partikel unterschiedlicher Partikelgröße unterschiedliche Signalstärken erzeugen, was die Definition eines einheitlichen LODs schwierig macht.

2. Einfluss der Partikelkonzentration:

Der Nachweisbereich von NTA ist durch die Partikelkonzentration begrenzt. Bei einer zu hohen Konzentration kann eine gegenseitige Störung zwischen großen und kleinen Partikeln zu einer ungenauen Analyse führen. Wenn die Konzentration zu niedrig ist, kann die Nichterkennung einer ausreichenden Anzahl von Partikeln auch zu Probenahmefehlern und Zufallsfehlern führen (. Daher ist es schwierig, eine niedrige Konzentrationsdetektionsgrenze für alle Proben zu bestimmen (die LODs von Probe zu Probe variieren). Gleichzeitig konzentrieren sich selbst klare Proben wie gereinigte extrazelluläre Veskeln in der Regel nur auf eine Größenordnung.[1][2].

Einschränkungen des optischen Systems:

Die Erfassungsempfindlichkeit von NTA hängt auch von der Auflösung des optischen Systems und der Parametereinstellung ab, insbesondere bei der Erfassung kleiner Nanopartikel. Die Einschränkungen der optischen Auflösung machen es schwierig, eine einheitliche LOD für die NTA-Technologie zu definieren.

Aufgrund dieser Faktoren bietet NTA eine relativ quantitative Ergebnis in der Partikelgröße und Konzentration Charakterisierung der Spezies und nicht eine absolute niedrige Detektionsgrenze.

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Einschränkungen der dynamischen Lichtstreuung (DLS)

Dynamische Lichtstreuung (DLS) Im Wesentlichen ist es ein Verfahren zur Messung der passenden Partikelgröße von Nanopartikeln oder Makromolekülen in einer Suspension. Da DLS von der Intensität der Partikelstreuung abhängig ist, gibt es in der Regel auch einige Einschränkungen bei der Bestimmung der Erkennungsgrenze LOD:

1. Abhängigkeit von der Streuungstärke:

DLS misst die durchschnittliche braune Bewegung aller Partikel in der Probe, so dass die Streuungssignale, die von kleineren Partikeln oder Partikeln mit niedrigen Konzentrationen erzeugt werden, von Hintergrundgeräuschen überschwemmt werden können, die nicht genau erkannt werden können. Im Allgemeinen sind die LOD-Anforderungen an die Partikelkonzentration und den Partikelgrößenbereich von DLS höher als allgemein verstanden.

2,Multidispersivität und Konzentration Auswirkungen:

In Multidispersionssystemen oder Proben mit zu niedrigen Konzentrationen ist es für DLS schwierig, einzelne Partikelgrößen zu unterscheiden, so dass es schwierig ist, eine einheitliche LOD genau zu geben. Insbesondere geht das DLS-Prinzip davon aus, dass die Proben monodisperse Größenverteilungen haben (PDI < 0,1 oder sogar kleiner), was für multidisperse (z. B. die meisten biologischen Proben) nicht geeignet ist. Auch wenn das DLS-Prinzip keine Konzentrationsdaten berechnet, ist die DLS-Probenmessung für die Konzentration erforderlich, und ungeeignete Oberprobenkonzentrationen können zu einer großen Abweichung der Partikelgröße führen, die leicht vernachlässigt werden kann.

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Zusammenfassend können wir feststellen, dass weder NTA noch DLS eine LOD von praktischer Bedeutung geben können. Das ist international.Exzelluläre Veskeln Lernen(ISEV, Internationale Gesellschaft für Extrazelluläre Vesikeln)Die jüngsten veröffentlichten Leitlinien machen auch deutlich, dass die LOD der Testmethode veröffentlicht werden muss, damit andere die Ergebnisse unabhängig von Empfindlichkeitsbegrenzungen verifizieren können. Derzeit gibt es jedoch keine Möglichkeit, eine nachverfolgbare LOD für die Nanopartikel-Tracking-Analyse (NTA), die dynamische Lichtstreuung (DLS) oder die Abbildungsstromzytologie zu erzielen.[3].


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Übersetzung:
"Die LOD der Testmethode muss veröffentlicht werden, damit andere die Ergebnisse überprüfen können, unabhängig von Empfindlichkeitsbegrenzungen." ”
"Durch die orthogonale Methode kann die Zuverlässigkeit der EV-Konzentrationsmessung erhöht werden, wobei jede Methode eine bestimmte LOD aufweist. ”
"Derzeit gibt es keine Möglichkeit, eine nachverfolgbare LOD für die Nanopartikel-Tracking-Analyse (NTA), die dynamische Lichtstreuung (DLS) oder die Abbildungsstromzytologie zu erzielen." ”


Die Methode der Widerstandsimpulsinduktion (RPS) kann eine bestimmte LOD anzeigen

Die Methode der Resistive Pulse Sensing (RPS) liefert eine bestimmte LOD sowohl bei der Partikelgröße als auch bei der Konzentrationscharakterisierung von Nanopartikeln.RPS misst die Größe und Anzahl von Partikeln durch die Erkennung von Widerstandsänderungen, die durch einzelne Partikel durch Mikroporen verursacht werden.Weil es ein einzelnes Partikel ist.RPS kann unter bestimmten Bedingungen sehr niedrige Messgrenzen liefern, insbesondere für die Erkennung niedriger Konzentrationen von Partikeln in verdünnten Proben.LOD ist in der Regel mit der Größe von Mikro- oder Nanoporen und dem Geräuschpegel in der Probe verbunden.


Abhängig von der Öffnungsgröße:

LOD ist in der Regel mit der Größe der Mikroporen und dem Geräuschpegel in der Probe verbunden. Kleinere Aperturen können kleinere Partikel erkennen, können aber auch Hintergrundgeräusche erhöhen, was die Genauigkeit der LOD beeinflusst.

Abhängig vom Geräuschpegel:

Die elektrische Leitfähigkeit der Probe, die Oberflächeneigenschaften der Löcher und die Stabilität des Hintergrundstroms beeinflussen die Messgrenzen. Wenn Hintergrundgeräusch gering ist, kann RPS sehr kleine und niedrige Konzentrationen von Partikeln erkennen, wodurch eine niedrigere LOD erzielt wird.


Im Allgemeinen kann eine niedrigere LOD erreicht werden, wenn das Hintergrundgeräusch im RPS-Testexperiment gut kontrolliert werden kann und die richtige Öffnung und die richtigen Messbedingungen gewählt werden.Dies macht die RPS-Technologie in bestimmten Bereichen erheblich vorteilhaft, wie zum Beispiel die Erkennung von verdünnten Biopartikeln oder Nanopartikeln.


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Das NanoCoulter-KorngrößenmeterAnwendungenRPS-TechnologieBrechen Sie die Einschränkungen des optischen Prinzips, nach mehr als zehn Jahren der Niedersetzung der Mikronano-Verarbeitungstechnik,InnovationLithographischer Silizium-basierter fester Nanoporchip, der den Bereich der Partikelgrößendetektion der klassischen Kurter-Technologie von Mikron bis Nano untersucht. Gleichzeitig verlassen sich auf die hohe Empfindlichkeit Pian-Niveau-Strom-Erkennung und Signal-Rausch-Analyse-Behandlung kann präzise Rausch-Reduzierung-Analyse jedes porösen Partikels, der wahre Sinn der einzelnen Partikel-Erkennung, kann präzise analysieren Partikelgröße verteilt breite multidisperse Probe, mit breiterPartikelgröße LOD (15-2000 nm) und extrem breite Konzentration LOD (106-1012 Partikelund/ml).



Referenzen

[1] Welsh JA, Goberdhan DCI, O'Driscoll L, et al. Minimale Informationen für Studien von extrazellulären Vesikeln (MISEV2023): Von grundlegenden bis fortgeschrittenen Ansätzen [veröffentlichte Korrektur erscheint in J Extracell Vesicles. 2024 Mai;13(5):e12451. Doi: 10.1002/jev2.12451].J Extrazellvesikeln. 2024; 13(2):e12404.

[2] Li Y, Zhang S, Liu C, et al. Thermophoretische Glykanprofilierung von extrazellulären Vesikeln für dreifach-negatives Brustkrebsmanagement.Nat Kommune.2024; 15(1):2292.

Tian Y, Tian D, Peng X, Qiu H. Kritische Parameter zur Standardisierung der Größe und Konzentrationsbestimmung von Nanomaterialien durch Nanopartikel-Tracking-Analyse.Int J Pharm. 2024; 656:124097.