Objekte verwenden

BisphenoleA-Affinitätssäule kann spezifisch reinigen Proben in Bisphenol A und Bisphenol S, es verwendet das säulenförmige Joanalysegel als Festphase-Träger, das Joanalysegel mit Bisphenol A-Antikörpern verbunden ist, um Immunabsorbente zu bilden, und die Säule bildet eine Immunaffinitätssäule. Es ist in der Lage, spezifisch zu reinigen Bisphenol A in Proben. Bisphenol A-Affinitätssäule ist weit verbreitet in der Extraktion von Proben wie Lebensmittel und Getränke, die Methode ist schnell, einfach zu bedienen, hohe Genauigkeit und spielt eine sehr wichtige Rolle bei der Verbesserung der Qualität und Sicherheit von Lebensmitteln.

Die Anleitung zur Anwendung der Affinitätssäulenmethode zur Erkennung von Bisphenolen in LebensmittelnMethode der Prüfung A.

GB 5009.305-2025 Nationale Norm für Lebensmittelsicherheit Bestimmung von Bisphenolen A, F und S in Lebensmitteln

Lagerbedingungen

Die Affinitätssäule wird inUnter 2-8 °C kann es nicht gefriert werden und hat eine Haltbarkeitsdauer von 18 Monaten. Es wird empfohlen, bei Raumtemperatur (18-30 ° C) zu verwenden.

Experimentelle Lösungsvorbereitung

lMethanolWasserlösung (80+20):Methanol messen80mL, 20 ml Wasser hinzufügen und vermischen.

lMethanolWasserlösung (40+60):Methanol messen40mL, 60 ml Wasser hinzufügen und vermischen.

l盐酸溶液(10+90):Messung10 ml konzentrierte Salzsäure, 90 ml Wasser hinzufügen und vermischen.

lPBS-Lösung:gebenPBS-Puffer-Reagenzpaket (Artikelnummer: G3001) mit 1000 ml reinem Wasser gelöst und vermischt.

Schritte zur Analyse

GB 5009.305-2025 Verfahren

1.0 Probenextraktion

1.1 Fleisch und Fleischprodukte, Fischprodukte, feste und halbfeste Milchprodukte (Milchpulver, fermentierte Milch usw.), Säuglingsnahrungsmittel

Berufung1 g Probe (genau bis zu 0,01 g), in 50 ml Polypropylenzentrifugerrohr gelegt, 50 μL Isotopenmischung mit Flüssigkeit hinzugefügt und nach der Oszillationsmischung 30 min zur Stille gelassen. Fügen Sie 2mL Wasser hinzu, wirbeln Sie für 30s und fügen Sie dann 5mL Acenitril-Wirbelmischung hinzu. Mischungsflüssigkeit Ultraschall Extraktion 15min, 10 min bei 4 ° C 10,000r / min Zentrifugieren. Entnehmen Sie die Flüssigkeit in ein Glas-Stickstoff-Blasrohr und blasen Sie langsam mit Stickstoff bei 40 ° C auf etwa 2 ml, fügen Sie 8 mLPBS hinzu, um zu reinigen.

1.2 Eier, Milch und flüssige Milchprodukte

Berufung1 g Probe (genau bis zu 0,01 g) in 50 ml Polypropylenzentrifugerrohr gelegt, 50 μL Isotopenmischungsflüssigkeit hinzugefügt und nach der Oszillationsmischung 30 min beigelegt. 5 ml Acetonitril hinzufügen, Ultraschallextraktion nach Wirbelmischung 15 min, 10 min bei 4 ° C bei 10.000 r / min Zentrifugieren. Entnehmen Sie die Flüssigkeit in ein Glas-Stickstoff-Blasrohr und blasen Sie langsam mit Stickstoff bei 40 ° C auf etwa 2 ml, fügen Sie 8 mLPBS hinzu, um zu reinigen.

1.3 Getreide und Zusatznahrungsmittel für Säuglinge und Kleinkinder

Berufung1 g Probe (genau bis zu 0,01 g), in 50 ml Polypropylenzentrifugerrohr gelegt, 50 μL Isotopenmischung mit Flüssigkeit hinzugefügt und nach der Oszillationsmischung 30 min zur Stille gelassen. Fügen Sie 10 mL Methanol-Wasserlösung (80 + 20) hinzu, wirbeln Sie für 30s, extrahieren Sie mit Ultraschall für 15 min und zentrifugieren Sie 10 min bei 10.000 r / min bei 4 ° C. Entnehmen Sie die Flüssigkeit in ein Glas-Stickstoff-Blasrohr und blasen Sie langsam mit Stickstoff bei 40 ° C auf etwa 2 ml, fügen Sie 8 mLPBS hinzu, um zu reinigen.

1.4 Gemüse und Obst

Berufung1 g Probe (genau bis 0,01 g) in 50 ml Polypropylenzentrifugerrohr, 100 µL Salzsäureleisung (10+90) und 50 µL IsotopeGemischte FlüssigkeitNach der Mischung 30 min stehen lassen. Fügen Sie 5mL Acetonitril hinzu, Wirbelschwindlung 30s, Ultraschallextraktion 15min, 4 ℃ 10000r / min Zentrifuge 10min. Entnehmen Sie die Flüssigkeit in ein Glas-Stickstoff-Blasrohr und blasen Sie langsam mit Stickstoff bei 40 ° C auf etwa 2 ml, fügen Sie 8 mLPBS hinzu, um zu reinigen.

1.5 Getränke

Berufung1 g Probe (genau bis zu 0,01 g), in 2 ml Polypropylenzentrifugerrohr, 50 μL Isotope-Inmarker-Mischung mit Flüssigkeit und 30 min nach der Oszillationsmischung stehen lassen. 10000r / min Zentrifugieren 10min. Entnehmen Sie die Klärung in 50 ml Polypropylenzentrifugerrohr und fügen Sie 10 mL LPBS-Lösung hinzu, um zu reinigen.

AnmerkungenKlärproben (z. B. reines Wasser, Mineralwasser usw.) können nicht zentrifiziert werden und direkt mit PBS gemischt werden.

2.0 Reinigung

2.1 Aktivierung der Affinitätssäule

Verbinden Sie die Immunaffinitätssäule mitUnter einer 10,0 ml Spritze. Die Regelung des Drucks ermöglicht, dass die Säulenschutzlösung langsam durch die Immunaffinitätssäule mit einer Durchflussgeschwindigkeit von etwa 2 mL/min (1 Tropfen/s) passiert, bis eine geringe Menge Luft durch die Säule passiert. Genaue Dosierung von 5 ml Affinitätssäulenaktivator (Standard für Affinitätssäulenprodukte) und Waschen der Affinitätssäule mit einer Durchflussgeschwindigkeit von 1 Tropfen / Sekunde, bis eine kleine Menge Luft durch den Säulenkörper passiert. Waschen Sie die Säule einmal mit 5,0 ml reinem Wasser, entfernen Sie die gesamte Ausgangsflüssigkeit, waschen Sie die Säule mit 10,0 ml pH7,4 PBS-Lösung mit einer Durchflussgeschwindigkeit von 1 Tropfen / Sekunde, bis die letzte 2-3 ml Lösung die Säule füllt, stoppen Sie mit dem Druck, blockieren Sie die untere Ausgangsöffnung mit einem Stopfen, um zu verwenden.

Hinweis: Zur weiteren Verbesserung der BisphenoleEine Reinigung und Adsorption der Immunaffinitätssäule, die vor der Verwendung aktiviert werden muss. Die Affinitätssäule nach Aktivierung bitte innerhalb von 1 Stunde verwenden.

2.2 Affinitätssäulenreinigung

取Die Reinigungsflüssigkeit in Schritt 1,0 ist alle über die Säulen, die Durchflussgeschwindigkeit beträgt 1 Tropfen / Sekunde, entfernen Sie die gesamte Abflussflüssigkeit, waschen Sie die Immunaffinitätssäule mit 10 ml Wasser, die Durchflussgeschwindigkeit beträgt 1-2 Tropfen / Sekunde, und nach dem Ablauf des Wassertropfens pumpen Sie die Immunaffinitätssäule mit einer Vakuumpumpe. Fügen Sie 1 mL Methanol zu waschen, mit einer Durchflussgeschwindigkeit von 1-2 Tropfen / s, sammeln Sie die Waschflüssigkeit in einem Glasstickstoffblasrohr und trocknen Sie langsam mit Stickstoff bei 40 ° C. Präzise 0,40 mL Methanol hinzufügen, 10s Wirbelmischung, dann genau 0,60 mL Wasser hinzufügen, nach Wirbelmischung in 2 mL Polypropylenzentrifugeröhre übertragen, 5 min unter 10.000 r/min zentrifugieren und die reine Flüssigkeit für die Flüssigkeitschromatographie-serielle Massenspektrometer-Messung aufnehmen.

Hinweise

1)Ändern Sie nicht die Bedienungsschritte in der Bedienungsanleitung. Bitte wenden Sie sich bei Änderungen an unsere technische Abteilung, um zu bestätigen, ob die Änderung angemessen ist.

2)Im Betriebsschritt, wenn die Probe über die Säule, Waschen und Entwaschen, müssen Sie die Durchflussgeschwindigkeit kontrollieren, nicht zu schnell, sonst wird das Testergebnis niedrig sein.

3） Dieses Experiment minimiert die Verwendung von Kunststoffbehältern, insbesonderePC-Material-Kunststoff-Vorräte, experimentelle Wasser verwenden, um so gut wie möglich in Glas zu destillieren.

Affinitätssäulenkonfigurationsliste

Vorbereitungen und Reagenzien