Im Folgenden finden Sie eine umfassende Beschreibung der wichtigsten Faktoren, die die Genauigkeit von Milchzellenanalysatoren beeinflussen, die mehrere Dimensionen abdecken, von der Probenbehandlung bis zur Instrumentleistung:
Probenahme und Vorbehandlung
Repräsentativität der Probenahme
Es ist notwendig, das Prinzip der stratifizierten Probenahme streng zu befolgen, insbesondere für große Milchbehälter oder Transportwagen, sollten die Probenahme in den oberen, mittleren und unteren drei Schichten gemischt werden, um die ungleichmäßige Verteilung der Körperzellen durch die Trennung der Fettschicht zu vermeiden. Eine unzureichende Einzelprobenangabe (<50 ml) kann den zufälligen Fehler vergrößern, und es wird empfohlen, mindestens 100 ml Kompositproben nach ISO-Standards zu nehmen.
Lager- und Transportbedingungen
Die Proben müssen bei 4 ° C gekühlt und innerhalb von 6 Stunden getestet werden, und eine überlaufene Lagerung führt zu einer autolösenden Zerstörung der Körperzellen und zur Freisetzung von DNA-Fragmenten. Bei Langstreckentransporten sollten schädliche Konservierungsmittel (z. B. Natriumstickstoff) hinzugefügt werden und starke Schütterungen vermieden werden.
Homogenisierung
Nicht ausreichend homogene Milchproben sind anfällig für Fettkugeln, die das Mikroskopsichtfeld blockieren oder den Strömungspool blockieren. Die Partikel müssen mit einer standardisierten Ultraschallbehandlung (20 kHz, 30 Sekunden) verteilt werden, während die Temperatur unter 40 ° C gesteuert wird, um Proteinedegeneration zu verhindern.
Kernleistungsindikatoren für Instrumente
Genauigkeit des optischen Systems
Die Stream-Zytometrie basiert auf der Intensität des Laserstreuungslichts, um den Zelltyp zu unterscheiden, und die Stabilität der Laserwellenlänge (± 0,5 nm) und die Empfindlichkeit des Photomultiplikators bestimmen direkt das Signal-Rausch-Verhältnis. Die tägliche Inbetriebnahme erfordert eine Kontrolle der Leere der Hülle, um Hintergrundgeräusche zu beseitigen.
Schwellenwerte festlegen Rationalität
Die Doppelparametereinstellung der Front-Scatter (FSC) und der Side-Scatter (SSC) erfordert die Vermeidung von Verunreinigungssignalbereichen. Zum Beispiel beschränken Sie die Aktivosom-Zellgemeinschaft auf einen bestimmten Streuungswinkel, um die Entfernung von Epithelzellen und mikrobielle Kontamination auszuschließen.
Flüssigkeitsdynamiksteuerung
Strömungsbecken Schnittkraft über die Versammlung führt zu zerbrechlichen Zellen, die Durchflussgeschwindigkeit sollte auf 5-10 μL / s kontrolliert werden; Wenn der Hydraulikdruck der Hülse > 5% schwankt, muss der Alterungsgrad der Pumpenrohre und die Luftwegdichtung überprüft werden.
Reagenzien- und Verbrauchsmaterialmanagement
Farbstoffqualität
Lebende Farbstoffe wie Taipan Blue müssen jetzt verwendet werden und vor Licht gehalten werden. Eine fehlerhafte Färbung kann die toten Zellen abnormal färben und eine falsch positive Anzahl verursachen. Die Färbungseffizienz (> 95%) ist für jede neue Dosierung mit einer Standard-Zellsuspension bestimmt.
Reinigungsflüssigkeitsreste
Restreinigungsmittel (z. B. Natriumhypochlorat) lösen die weißen Blutkörperchen und führen zu Leckageprüfungen. Die Leitung muss vor und nach jeder Prüfung dreimal mit deionisiertem Wasser gespült und die restliche Flüssigkeit durch Luft ersetzt werden.
Zählen Pool Sauberkeit
Proteinablagerungen, die sich an den Innenwänden der Mikrokapillaren befestigen, absorbieren die Zellen und müssen wöchentlich mit einer Enzymlösung (Panproteinase + EDTA) eingetaucht und gereinigt werden, um die Kratzer zu vermeiden.
Umwelt und menschliche Faktoren
Temperatur- und Feuchtigkeitskontrolle
Abweichungen der Labortemperatur von 25 ℃ ± 2 ℃ führen zu einer Änderung der Reaktionsgeschwindigkeit des Reagents und zu einem Kurzschluss der Elektronikkomponenten bei einer Luftfeuchtigkeit > 70% RH. Das thermostatische Feuchtigkeitssystem muss mit einem unabhängigen Entfeuchtungsmodul ausgestattet sein.
Unterschiede in den Fähigkeiten des Bedieners
Eine ungleichmäßige Dicke der künstlichen Auftragen von Folien (ideale Dicke 10-20 μm) führt zu einem lokalen Ansammlungseffekt, den ein automatisierter Auftragsgerät beheben kann. Die Ausbildung umfasst eine Bewertung der Fähigkeit zur Zellmorphorerkennung.
Frequenz der Qualitätskontrolle
Durch tägliche Rückgewinnungsratentests mit Standardmilchpulver in bekannten Konzentrationen (500.000 Zellen/mL) werden die tatsächlichen Messwerte im Bereich von ± 10% des markierten Wertes erfordert. Nach der monatlichen Wartung muss die Kalibrierkurve neu erstellt werden.