TSKgel Protein A-5PW

TSKgel Protein A-5PW

Die TSKgel Protein A-5PW Chromatografie-Säule wurde speziell für die schnelle Isolierung und genaue Quantifizierung einer Vielzahl von Antikörpern entwickelt. Monoklonale Antikörper werden aus der geernteten Zellkulturflüssigkeit erfasst und genau quantifiziert, wobei jede Probenanalyse in weniger als 2 Minuten durchgeführt werden kann. Die Chromatografie-Säule ermöglicht mehr als 2.000 Probenanalysen ohne Regeneration oder Reinigung.

Die TSKgel Protein A-5PW-Chromatografie-Säule ist mit hochvernetzten Perlen des hydroxylierten Methylacrylpolymers gefüllt, die eine hohe Durchflussgeschwindigkeit in der Chromatografie ermöglichen, während die Chromatografie-Effizienz, Spitzenbreite und Trennungsgrad erhalten werden. Seine recombinante Protein-A-Distribution ist ein crypton-modifiziertes C-Domäne-Hexamer. Diese verstärkte recombinante Protein-A-Distribution bindet sich durch Multi-Point-Bindung an TSKgel 5PW-Matrix-Mikrosphären, was eine ausgezeichnete Stabilität in 0,1 mol/L NaOH-Lösung bietet.

Die TSKgel Protein A-5PW-Chromatografie verfügt über einen breiten Oberprobenbereich, der die Effizienz von monoklonalen Antikörpern in verschiedenen Phasen der Behandlung von Zellkulturflüssigkeiten genau bestimmt. Seine niedrige Protein-A-Abfallrate macht es zur idealen Wahl für die Reinigung kleiner monoklonaler Antikörper für die vorläufige Charakterisierung.

TSKgel Protein A-5PW ist eine Affinitäts-Chromatografie (AFC) Säule, die eine rekombinierte Protein A-Funktionsgruppe auf die Füllstoffoberfläche eines porösen hydrophilen Polymermatrizes von TSKgel G5000PW importiert und in eine PEEK-Säule gefüllt.

Da Protein A spezifisch an die Fc-Region von IgG binden kann, kann Protein A IgG aus Proben wie Zellkultur-Serum, das IgG und Verunreinigungen enthält, spezifisch adsorbieren. Darüber hinaus wird die Kalibrierung durch die Herstellung von IgG in bekannten Konzentrationen

Kurven können quantitative Konzentrationen von IgG in unbekannten Proben.

TSKgel Protein A-5PW Chromatografie Säule Matrix, Funktionsgruppen und Funktionsgruppen Bindungsmethoden sind die gleichen wie die Massenfüllstoff TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F. Daher hat diese Chromatografie Säule ähnliche Isolationsselektivitäten wie TOYOPEARL AF-rProtein A HC-650F.

Aufgrund der großen Partikelgröße und der hohen mechanischen Festigkeit der Matrix kann die Chromatografie-Säule unter hohen Durchflussbedingungen oder für die hohe Durchflussanalyse von IgG verwendet werden. Darüber hinaus kann der Inflationseffekt des Füllstoffs, der durch Lösungsmitteländerungen verursacht wird, relativ gering sein, in der Flussphase hinzugefügt werden.

Zugabe von organischen Lösungsmitteln.

Darüber hinaus verfügt die Chromatografie über eine chemisch stabile, alkalische Funktionsgruppe, die mit NaOH-Wasserlösung gereinigt werden kann. Beim Reinigen der Chromatografie-Säulen mit NaOH-Wasserlösung injizieren Sie 0,1 mol/L NaOH-Wasserlösung 0,5 aus dem Probenventil

von 2 ml.

2-2. Standardgetrennungsbedingungen

Die meisten IgG werden von Protein A unter neutralen Bedingungen (pH 7,0 bis 7,5) adsorbiert und unter sauren Bedingungen (pH 2,5 bis 3,5) gespült, daher werden bei der Isolierung von Antikörpern mit TSKgel Protein A-5PW in der Regel zwei unterschiedliche pH-Lösungen in Stufen verwendet.

Treppe Gradient Entfernung Methode.

Die Flussphase zur Adsorption und Entfernung verwendet in der Regel einen Phosphorsäurepuffer, aber die Flussphase kann auch einen Zitratpuffer mit niedrigem pH verwenden. Nach dem Vorausgleich der Chromatografie-Säulen mit Adsorptionspuffern (mit einem Pufferausgleich von mehr als 5-fachen Säulenvolumen) wird die Probenahme durchgeführt.

Danach wurde nur IgG an die Säule adsorbiert. Anschließend wird die Flussphase durch Waschen ersetzt und IgG entfernt.

Hohe Konzentrationen von Salzen (z. B. 0,15 mol/L NaCl usw.) können in der Flussphase hinzugefügt werden, aber hochhydrophobe IgG sind anfällig für eine nicht spezifische Adsorption auf der Chromatokolonne, was besonders aufmerksam ist. Darüber hinaus wird bei der Analyse von hochhydrophoben IgG

Die Zugabe von wasserlöslichen organischen Lösungsmitteln wie Ethanol oder essentieller AN-Säure (0,2 mol/L) in die Weighings- und Waschflüssigkeiten kann die nicht spezifische Adsorption effektiv hemmen. Allerdings können die oben genannten Umstände durch die Austauschflussphase zu Basisschwankungen führen, daher sollten Sie vor der Probenahme

Wechsel der Flussphase und Bestätigung.

Flussphasenbeispiele

Beispiel 1

Flussphase A: 20 mmol/L Natriumphosphatpuffer, pH 7.4

Flussphase B: 20 mmol/L Natriumphosphatpuffer, pH 2.5

Beispiel 2

Flussphase A: 20 mmol/L Natriumphosphatpuffer, pH 7,4/Ethanol = 90/10 (v/v)

Flussphase B: 20 mmol/L Natriumphosphatpuffer, pH 2,5/Ethanol = 90/10 (v/v)

Beispiel 3

Flussphase A: 20 mmol/L Natriumphosphatpuffer, pH 7.4

Flussphase B: 50 mmol/L Natriumcitratpuffer, pH 2.5

TSKgel Protein A-5PW ist langlebig und kann mit einer alkalischen Lösung gereinigt werden und eignet sich für die schnelle und präzise Dosierung von IgG in Zellkulturflüssigkeiten mit mehr Verunreinigungen. Darüber hinaus ist der quantitative Bereich von IgG breit und kann für die Analyse von Proben mit niedrigen Konzentrationen bis zu Proben mit hohen Konzentrationen in der frühen Kultivphase verwendet werden.

TSKgel Protein A-5PW Spezifikationen und Bestellinformationen

Spezifikationsparameter

ProjektParameter

Durchmesser100 nm

Partikelgröße20 µm

pH-Stabilität2.5 - 12

Resistenzbegrenzung1.000 kDa

VerteilungRekombinatives Protein A (C-Domäne-Hexamer)

Basisdichte0,9 - 1,0 g/L Gel

Bestellungsinformationen

Produktnummer (P/N)BeschreibungGröße

0023483TSKgel Protein A-5PW Chromatografie Säule4,6 mm Innendurchmesser x 3,5 cm Länge

TSKgel Protein A-5PW

Nantong Haiyue Chemical Co., Ltd.