Ratten Nierenschädigungsmolekül 1 (Kim-1) ELISA-Testkit

Produktinformationen:

Produktname:Ratten Nierenschädigungsmolekül 1 (Kim-1) ELISA-Testkit

Artikelnummer: YXR31104

Produktnummer: Details auf dem Produktetikett

Gültigkeitsdauer: 6 Monate

Lagerbedingungen: 2-8 ℃

Produktanwendung:

Diese Kit wird zur quantitativen Messung des Moleküls 1 (Kim-1) in Serum, Plasma, Gewebehomologation und verwandten Flüssigkeitsproben von Ratten in vitro verwendet.

2. Prüfprinzip:

Die Kits werden mit einem Dual-Antikörper-Schritt-Centrophase-kombinierten Immunabsorptionstest (ELISA) durchgeführt. Die Antikörper, die von Ratten-Nierenschädigungsmolekül 1 (Kim-1) gefangen wurden, wurden in die Mikroporen eingepackt, nachfolgend mit Proben, Standardprodukten und HRP-gekennzeichneten Detektions-Antikörpern hinzugefügt, nachdem sie warm und gründlich gewaschen wurden. Mit dem Substrat TMB wird TMB durch Peroxidase-Katalyse in Blau und unter der Wirkung der Säure in das endgültige Gelb umgewandelt. Die Farbe war positiv korreliert mit dem Molekül 1 (Kim-1) Nierenschädigung in der Probe der Ratte. Messung der Absorption (OD-Wert) mit einem Enzym-Scaler bei einer Wellenlänge von 450 nm zur Berechnung der Probenkonzentration.

Verfahren zur Sammlung, Verarbeitung und Aufbewahrung von Proben:

Im Folgenden sind nur allgemeine Leitlinien für die Probenahme aufgeführt. Natriumstoffe dürfen während aller Probenahme nicht als Konservierungsmittel verwendet werden.

1. Serum: Verwenden Sie ein Thermogen- und Endotoxinfreies Röhrchen, um jede Zellrimulation während des Betriebs zu vermeiden, lassen Sie die Vollblutproben, die in einem Serumscheiderrohr gesammelt wurden, über Nacht bei Raumtemperatur für 2 Stunden oder 4 ° C, dann 1000 x g Zentrifugieren für 20 Minuten, nehmen Sie die Reinigung ab, oder bewahren Sie die Reinigung bei -20 ° C oder -80 ° C, vermeiden Sie jedoch wiederholtes Gefrierschmelzen.

2. Plasma: Entnehmen Sie die Probe mit EDTA oder Hepatin als Antikoagulant und zentrifugieren Sie die Probe für 15 Minuten bei 2-8 ° C bei 1000 x g innerhalb von 30 Minuten nach der Entnahme, um die Reinigung zu erkennen oder die Reinigung bei -20 ° C oder -80 ° C zu bewahren, aber wiederholtes Gefrierschmelzen zu vermeiden.

3. Zellkultur-Serum oder andere biologische Proben: Bitte 1000 x g Zentrifuge für 20 Minuten, um das Serum zu entnehmen, um zu erkennen, oder das Serum bei -20 ° C oder -80 ° C aufbewahren, aber wiederholtes Gefrierschmelzen zu vermeiden.

4. Gewebehomologation: Spülen Sie das Gewebe mit vorgekühltem PBS (0,01 M, pH = 7,4), entfernen Sie das restliche Blut (die rotten Blutkörperchen, die in der Homologation aufgelöst sind, beeinflussen das Messergebnis) und schneiden Sie das Gewebe nach der Wiegung. Zerkleinertes Gewebe mit dem entsprechenden Volumen von PBS (in der Regel im Gewichtsvolumenverhältnis von 1: 9, zum Beispiel 1 g Gewebeprobe entspricht 9 ml PBS, das spezifische Volumen kann entsprechend den Anforderungen des Experiments angepasst und aufgezeichnet werden. Es wird empfohlen, einen Protease-Inhibitor in PBS hinzuzufügen) in einen Glas-Homogenator hinzuzufügen und vollständig auf Eis zu schleifen. Um die Gewebezellen weiter zu spalten, können homogene Slurms mit Ultraschall gebrochen oder wiederholt gefriert werden. Schließlich wird die Lösung in 5000 x g zentrifugiert für 5 bis 10 Minuten, um die klare Detektion zu entnehmen.

Hinweis: Die Blutholyse der Probe kann das Endergebnis beeinflussen, daher ist die Blutholyse der Probe nicht geeignet, diesen Test durchzuführen.

5. Aufbewahrung: Wenn die Probe nach der Sammlung nicht rechtzeitig erkannt wird, verteilen Sie sie bitte nach einer Dosis, einfrieren Sie sie bei -20 ° C, vermeiden Sie wiederholtes Gefrierschmelzen, auffrieren Sie sie bei Raumtemperatur und stellen Sie sicher, dass die Probe gleichmäßig und vollständig aufgefroren ist.

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Ratten Nierenschädigungsmolekül 1 (Kim-1) ELISA-Testkit