LS1034 +luc+RFP Menschliche Darmkrebszellen +luc+RFP

LS1034 +luc+RFP Menschliche Darmkrebszellen +luc+RFP

Zellen Eigenschaften

Gattung:Menschliche Quellen (Homo sapiens）

Organisationsquellen:Blinddarm (Cecum）

Krankheit:Darmkrebs (Kolorektalkarzinom）

Alter: 54Alter (54 Jahre）

Geschlecht:Männer (Männlich）

Zelltypen:Epidermale Zellen (Epithelial）

Wachstumsmerkmale:Wandwachstum (Anhängig）

Inhalt:>1x10^6Anzahl der Zellen

Spezifikationen:T25Flasche oder1 mlGefrierrohrverpackung

Verwendungszweck: Nur für wissenschaftliche Zwecke.

Transport und Lagerung

Trockeneis Transport und Erholung von gut überlebenden Zellen

（1）1 mlGefrierrohr Verpackung Trockeneis Transport, nach Erhalt-80Nach Übernachtung im Kühlschrank in flüssigen Stickstoff übertragen oder direkt erholen, wenn Trockeneis gefunden wird, dass es flüchtig und sauber ist, der Flaschendeckel des Gefrierrohres fällt, zerstört und die Zellen kontaminiert sind, kontaktieren Sie uns bitte sofort.

（2）T25Die Flasche Erholung von überlebenden Zellen wird bei normaler Temperatur geliefert und nach Empfang nach der Behandlung der Zellen nach Empfang betrieben.

Behandlung nach Zellenempfang

1Nach Erhalt der Zellen,75%Die Flaschenwand wird mit Alkohol desinfiziertT25Flasche in37℃ Aufbewahrungskammer ca.2-3hWenn die Kulturflasche gebrochen ist, Flüssigkeitsüberschlüsse und Zellen kontaminiert sind, kontaktieren Sie uns bitte unverzüglich, nachdem Sie ein Foto gemacht haben.

2Bitte hier4oder5XBestätigen Sie den Zellstand unter dem Mikroskop und fotografieren Sie die gerade empfangenen Zellen (10×，20x) jedes2-3Eine Aufbewahrung sowie ein Bild des Aussehens der Kulturflasche als Grundlage für den Zellstand beim Erhalt nach dem Verkauf.

3Zellen: Zellen in37℃ in der Kühlkammer platziert2-3hBeobachten Sie das Wachstum der Zellen unter dem Mikroskop und die Klebstoffsituationen, einige Klebstoffzellen fallen während des Express-Transports aufgrund der Vibration ab und gründen sich nach dem Abfall. Wenn man die Wachstumsdichte der Zellen unter dem Spiegel beobachtet,60%Anschließend können Sie das Infusionsmedium aus der Flasche entfernen (wenn nicht geklebte Zellen zentrifugiert werden müssen, werden sie wieder in die ursprüngliche Flasche aufgegeben).,Neue Formulierungen für spezielle Medien hinzufügen6-8 mlIn die Zellkultur setzen, um fortzusetzen. Wenn die Zellen wachsen70%-80%Darüber hinaus können Zellen verarbeitet werden. Während der Übertragung müssen Zellen, die aufgrund von Transportvibrationen abgefallen sind, zentrifugiert zurückgewinnt werden.

4Hinweis: Transportmedium (Irrigationsmedium) kann nicht mehr verwendet werden, um Zellen zu kultivieren, bitte ersetzen Sie die neue Formulierung nach den Bedingungen der Anleitung ZellkulturSpeziellKulturmedium, um Zellen zu kultivieren. Erste Empfehlung nach Empfang der ZellenT25Pflanzenflaschen1：2Übertragung.

Vorbereitung von Kulturmitteln und Kultureinfrierungsbedingungen:

1）1640Kulturmedium+10% FBSKuhserum+1% P/SDoppelkampf

2） Anbaubedingungen: Gasphase: Luft,95%Kohlendioxid,5%Temperatur:37Grad Celsius, Feuchtigkeit70%-80%。

3） Gefrierflüssigkeit:90%Serum,10 % DMSOgegenwärtig verfügbar.

Zweitens: Zellbehandlung:

1） Erholung der gefrorenen Zellen:

wird enthalten1 mlGefrierrohr der Zellsuspension in37℃ Wasserbad schnell schütteln auftauen, fügen Sie zu enthalten4-6 mlSpeziellDas Medium wird in einem Zentrifugerrohr gleichmäßig vermischt. in1000 RPMZentrifuge unter Bedingungen3-5 MinutenEntfernen Sie die Flüssigkeit,SpeziellKulturmedium resuspendiert Zellen. Anschließend fügen Sie die Zellsuspension6-8 mlSpeziellMedium in Flaschen (oder Schalen)37℃ über Nacht kultivieren. Am nächsten Tag wird das Zellwachstum und die Zelldichte unter dem Mikroskop beobachtet.

2） Zelltransmission: Wenn die Zelldichte80%-90%So kann die Erziehung durchgeführt werden.

Für die klebende Zelltransmission kann man sich auf die folgenden Methoden beziehen:

1. Entfernen Sie die Kultur, mit Kalzium- und Magnesium-Ionen freiPBSZellen waschen1-2Zweimal.

2. beitreten0.25％（w / v(Panproteinase)-0,53 mM EDTAin der Flasche (T25Flasche1-2 ml，T75Flasche2-3 ml(platziert in37Verdauung in der Kultivationskammer1-2Minuten (schwer verdaubare Zellen können die Verdauungszeit angemessen verlängern), dann beobachten Sie die Verdauung der Zellen unter dem Mikroskop, wenn die Zellen sich größtenteils runden und ausfallen, nehmen Sie schnell wieder auf den Arbeitstisch, klicken Sie auf die Kulturflasche ein paar Mal und fügen Sie hinzu3-4 mlenthält10% FBSKulturmittel zur Beendigung der Verdauung.

3. Nach sanftem Schlag, in1000 RPMZentrifuge unter Bedingungen3-5 MinutenEntfernen Sie die Flüssigkeit und fügen Sie hinzu.1-2 mlNach der Kultivierung gut blasen. Drücken Sie die Zellsuspension1：2Anteil an den neuenT25In der Flasche, hinzugefügt6-8 mlNeue nach Anforderungen der Anleitung konfiguriertSpeziellMedium zur Aufrechterhaltung des Wachstums der Zellen, nachfolgende Generation je nach der tatsächlichen Situation drücken1:2~1:5Verhältnisse durchgeführt werden.

3Zellfrieren:Empfang der Zellen vor der Kultivierung empfohlen3Eine Reihe von Zellsamen für die nachfolgenden Experimente eingefroren.

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